Kromatografi Lapis Tipis Cara Spektrofotometri UV

Fase Diam : Silika gel GF 254 Fase Gerak : i.Toluen– Asam asetat glasial 80 : 20 ii.Metanol : Benzen : Kloroform 15 : 20 : 80 Penjenuhan : Kertas Saring Jarak Rambat : 15 cm Volume Penotolan : Larutan A 10 µl dan B 10 µl Penampak Bercak : Cahaya Ultraviolet 254 nm

3.4.3.2 Cara Spektrofotometri UV

Larutan A dan B sesuai volume penotolan sampai diperoleh bercak uji serta dengan bercak baku dikromatografi lapis tipis seperti tersebut diatas. Bercak baku dan senyawa yang mempunyai harga Rf sama ditandai dan dikerok. Hasil kerokan dilarutkan dengan 5 ml. Larutan HCL 0,01 N dalam metanol dan disaring. Serapan filtrat di scan pada panjang gelombang antar 200 – 400 nm. Piroksikam memberikan serapan maksimum pada lebih kurang 330 nm.

BAB IV HASILDAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil

Dari hasil pengujian identifikasi senyawa obat piroksikam dalam sediaan padat obat tradisional dengan metode kromatografi lapis tipis dan spektrofotometri ultraviolet, diketahui bahwa obat tradisional yang diuji mengandung senyawa obat piroksikam karena pada sampel obat tradisional yang diuji menghasilkan harga Rf dan panjang gelombang yang mendekati harga Rf dan panjang gelombang baku piroksikam BPFI. Kromatogram, perhitungan Rf dan hasil pengukuran panjang gelombang dari pengujian identifikasi senyawa obat piroksikam dapat dilihat pada lampiran.

4.2 Pembahasan

Identifikasi senyawa obat piroksikam dalam sediaan padat obat tradisional dilakukan dengan pengambilan sampel obat tradisional dan diidentifikasi senyawa obat piroksikam menggunakan metode kromatografi lapis tipis dengan fase gerak Metanol : Benzen : Kloroform 15:20:80 dan Toluen : Asam Asetat Glasial 80:20 dan dilanjutkan dengan metode spektrofotometri ultraviolet dengan panjang gelombang 330 nm. Pelarut yang digunakan adalah larutan HCL 0,01 N dalam metanol. Hasil penelitian menunjukkan bahwa obat tradisional yang diuji mengandung senyawa obat piroksikam dapat diketahui dari harga Rf dan panjang gelombang sampel obat tradisonal yang mendekati harga Rf dan panjang gelombang Piroksikam BPFI. Edentifikasi spektrum serapan ultraviolet larutan 1 dalam 100.000 dalam asam klorida – metanol menunjukkan maksimum dan minimum pada panjang gelombang yang sama seperti pada piroksikam BPFI Ditjen POM,1995.