16
BAB III METODE PERCOBAAN
3.1 Tempat
Pemeriksaan bakteri koliform pada air bersih dilakukan di Laboratorium Biologi Balai Teknik Kesehatan Lingkungan dan Pengendalian Penyakit
BTKLPP Kelas I Medan yang bertempat di Jalan K.H. Wahid Hasyim No.15 Medan.
3.2 Sampel
Sampel yang digunakan adalah air bersih dari air sumur yang diambil di Kecamatan Sei Bamban. Dengan nomor sampel 82BAB, 131BAB, dan
217BAB.
3.3 Alat
Alat timbang analitik, alat gelas, bola pipet, bunsen, hot plate, inkubator, kapas, magnetic stirrer, jarum ose, otoklaf, oven, pipet volume 10 mL, rak
tabung, tabung durham, tabung reaksi.
3.4 Bahan
Sampel air bersih, media lactose broth LB, aquadest, media brilliant green lactose broth BGLB.
3.5 Pembuatan Media 3.5.1 Media Lactose Broth LB
A. Pembuatan Media lactose broth double Ditimbang seksama media lactose broth sebanyak 52 gram. Dimasukkan
ke dalam beaker gelas, dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic
Universitas Sumatera Utara
17 stirrer, dipanaskan di atas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung
reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 5 mL dalam 5 tabung. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
o
C selama 15 menit, setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.
B. Pembuatan Media lactose broth single Ditimbang seksama media lactose brothsebanyak 13 gram. Dimasukkan
ke dalam beaker gelas, dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer, dipanaskan di atas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung
reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 mL dalam 10 tabung. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
o
C selama 15 menit, setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.
3.5.2 Media Brilliant Green Lactose Broth BGLB
Ditimbang seksama media brilliant green lactose broth sebanyak 40 gram. Dimasukkan ke dalam beaker gelas, dilarutkan dalam 1 liter aquadest.
Dimasukkan magnetic stirrer, dipanaskan di atas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing
10 mL. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
o
C selama 15 menit, setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.
3.6 Prosedur Analisa
Kategori