17
3.4 Uji Pendugaan
a. Disiapkan sebanyak 5 tabung reaksi yang berisi media Lactose Broth
double dan sebanyak 10 tabung reaksi yang telah berisi media Lactose Broth single.
b. Tabung kemudian disusun pada rak tabung, masing-masing diberi tanda
sebagai berikut : •
Nomor Sampel •
Volume Sampel c.
Sampel dikocok terlebih dahulu agar homogen. d.
Dimasukkan sampel dengan cara dipipet sebanyak 10 mL kedalam tabung berisi Lactose Broth tebal. Kemudian 1 mL kedalam tabung Lactose Broth
tipis sebanyak 5 tabung, dan sisanya 0,1 mL atau 2 tetes. e.
Dimasukkan seluruh tabung kedalam inkubator pada suhu 35ºC selama 2 × 24 jam.
f. Selanjutnya, diamati pembentukan gas yang terjadi di dalam tabung
durham. g.
Dicatat tabung yang dinyatakan positif dengan terbentuknya gas. Selanjutnya dilakukan uji penegasan.
3.5 Uji Penegasan
1. Tabung yang dinyatakan positif pada uji pendugaan, diinokulasikan
kedalam tabung yang berisi media Tryptone masing-masing satu ose dan dilakukan secara aseptis.
2. Diinkubasi pada suhu 44ºC selama 2 × 24 jam.
Universitas Sumatera Utara
18
3. Selanjutnya setelah 48 jam, ditambahkan larutan kovaks sebanyak 0,5 mL
dan dinyatakan positif jika terbentuk cincin merah. 4.
Pembacaan hasil dilakukan dengan menghitung jumlah tabung yang positif. Angka yang diperoleh dicocokkan dengan tabel MPN.
3.6 Persyaratan
Sesuai Peraturan Menteri Kesehatan RI NO.492MENKESPERIV2010 bahwa kadar maksimum yang diperbolehkan untuk parameter bakteri Escherichia
Coli pada air minum adalah 0 koloni100mL.
Universitas Sumatera Utara
19
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Bakteri Escherichia Coli
Nomor Sampel
Pendugaan Penegasan MPN100 mL
Keterangan
180BAM 0-0-0
0-0-0 1,8
Memenuhi persyaratan PERMENKES RI
NO.429MENKESPERIV 2010
4.2 Pembahasan
Pada analisa bakteri Escherichia coli pada sampel 180BAB memenuhi syarat dan tidak melebihi batas baku mutu sesuai Peraturan Menteri Kesehatan RI
NO.492MENKESPERIV2010 bahwa kadar maksimum yang diperbolehkan untuk parameter bakteri Escherichia Coli pada air minum adalah 0 koloni100mL.
Bakteri ini berbentuk batang, Gram negatif, fakultatif aerob, tumbuh baik pada media sederhana. Dapat melakukan fermentasi lactose dan fermentasi
glukosa, serta menghasilkan gas. Escherichia Coli merupakan flora normal, hidup komensal didalam colon manusia dan diduga membantu pembuatan vitamin K
yang penting untuk pembekuan darah. Escherichia Coli digunakan untuk menilai tentang baik tidaknya persediaan air untuk keperluan rumah tangga sering kali
Universitas Sumatera Utara
Kategori