15
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Tempat
Analisa bakteri Escherichia Coli pada air minum dilakukan di Laboratorium Biologi Balai Teknik Kesehatan Lingkungan dan Pengendalian Penyakit
BTKLPP yang bertempat di Jalan K. H. Wahid Hasyim No.15 Medan.
3.2 Sampel, Alat, dan Bahan 3.2.1 Sampel
Sampel dengan kode 180BAM adalah air minum dari Kabupaten Tobasa. 3.2.2 Alat
1. Peralatan yang digunakan untuk pembuatan media terdiri dari autoklaf,
beaker glass, hot plate, magnetic stirrer, neraca analitis, pipet volume, petri dan spatula.
2. Peralatan yang digunakan untuk pengujian terdiri dari bola karet,
inkubator 35 C, inkubator 44
C, jarum ose, lampu Bunsen, oven, pipet volume, rak tabung, tabung durham dan tabung reaksi.
3.2.3 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan terdiri dari aquadest, Media Lactose Broth, Media Tryptone.
Universitas Sumatera Utara
16
3.3 Prosedur 3.3.1 Pembuatan Media
1. Pembuatan Media Lactose Broth Single
Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 g. Dimasukkan kedalam beker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 1 liter. Dimasukkan
magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 10 mL.
Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.
2. Pembuatan Media Lactose Broth Double
Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 26 g. Dimasukkan kedalam beker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 500 mL. Dimasukkan
magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 5 mL.
Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15
menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering. 3.
Pembuatan Media Tryptone
Ditimbang seksama media Tryptone sebanyak 15 g. Dimasukkan kedalam beker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 1 liter. Dimasukkan magnetic
stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi masing-masing 10 mL. Disterilkan di dalam autoklaf dengan
tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.
Universitas Sumatera Utara
17
3.4 Uji Pendugaan