Tempat Sampel, Alat, dan Bahan .1 Sampel Prosedur .1 Pembuatan Media

15

BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Tempat

Analisa bakteri Escherichia Coli pada air minum dilakukan di Laboratorium Biologi Balai Teknik Kesehatan Lingkungan dan Pengendalian Penyakit BTKLPP yang bertempat di Jalan K. H. Wahid Hasyim No.15 Medan. 3.2 Sampel, Alat, dan Bahan 3.2.1 Sampel Sampel dengan kode 180BAM adalah air minum dari Kabupaten Tobasa. 3.2.2 Alat 1. Peralatan yang digunakan untuk pembuatan media terdiri dari autoklaf, beaker glass, hot plate, magnetic stirrer, neraca analitis, pipet volume, petri dan spatula. 2. Peralatan yang digunakan untuk pengujian terdiri dari bola karet, inkubator 35 C, inkubator 44 C, jarum ose, lampu Bunsen, oven, pipet volume, rak tabung, tabung durham dan tabung reaksi.

3.2.3 Bahan

Bahan-bahan yang digunakan terdiri dari aquadest, Media Lactose Broth, Media Tryptone. Universitas Sumatera Utara 16 3.3 Prosedur 3.3.1 Pembuatan Media

1. Pembuatan Media Lactose Broth Single

Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 g. Dimasukkan kedalam beker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 1 liter. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 10 mL. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.

2. Pembuatan Media Lactose Broth Double

Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 26 g. Dimasukkan kedalam beker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 500 mL. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 5 mL. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering. 3. Pembuatan Media Tryptone Ditimbang seksama media Tryptone sebanyak 15 g. Dimasukkan kedalam beker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 1 liter. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi masing-masing 10 mL. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121ºC selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering. Universitas Sumatera Utara 17

3.4 Uji Pendugaan