39
t - 1 r - 1 ≥ 15
4 - 1 r - 1 ≥ 15
3 r - 1 ≥ 15
r – 1 ≥ 5
r ≥ 6 Jadi bila n=6 telah memenuhi syarat di atas.
t = treatmentperlakuan r = replacementperulangan
mempertimbangkan drop out DO 20, dilakukan penambahan 1 ekor mencit pada masing-masing kelompok sehingga jumlah mencit yang digunakan sebanyak
28 ekor n=7.
3.2.4 Prosedur Kerja
3.2.4.1 Pengumpulan Bahan
- Buah merah Pandanus conoideus Lam. kultivar merah panjang, segar,
dan berwarna merah terang, berasal dari Wamena, Papua, Irian Jaya.
- Azoxymethane AOM Sigma – A2853 – 100 mg
- Dextran sulfate sodium DSS AMRESCO – 0198 – 50 g
3.2.4.2 Persiapan Bahan Uji
Bahan uji yang digunakan adalah buah merah. Pembuatan sari buah merah ini dilakukan di Laboratorium Farmakognostik Sekolah Farmasi, ITB, Bandung,
dengan prosedur sebagai berikut : 1.
Buah merah dipotong-potong dan dicuci sampai bersih 2.
Selanjutnya buah dikukus dan dipisahkan dari mesokarpnya, kemudian diperas hingga diperoleh pasta berwarna merah.
3. Pasta dipanaskan dengan suhu tidak melebihi 40
C, hingga diperoleh bagian minyak.
40
4. Bagian minyak dipisahkan dari bagian airnya, kemudian dibiarkan selama 24
jam sampai terdapat sisa pasta yang mengendap. 5.
Selanjutnya bagian minyak dipisahkan dari pasta yang mengendap, lalu dipanaskan kembali pada suhu di bawah 40
C. 6.
Sari buah merah disimpan di lemari pendingin pada suhu 4 C. Sebelum dimulai
perlakuan, sari buah merah terlebih dahulu dibiarkan dalam suhu ruangan selama beberapa saat.
3.2.4.3 Persiapan Hewan Coba
Mencit yang sudah ditindik dan diadaptasikan dibagi menjadi 4 kelompok secara acak menggunakan undian.
Masing-masing kelompok terdiri dari 7 ekor mencit yaitu kelompok kontrol negatif aquabidest 0,4 ml intraperitoneal,
aquadest ad libitum, aquabidest 0,1 ml per oral, kelompok kontrol positif buah merah aquabidest 0,4 ml intraperitoneal, aquadest ad libitum, sari buah merah
0,1 ml per oral, kelompok kontrol positif AOM dan DSS AOM 12 mgkgBB intraperitoneal, DSS 2,5 wv ad libitum, dan aquabidest 0,1 ml per oral, dan
kelompok perlakuan AOM 12 mgkgBB intraperitoneal, DSS 2,5 wv ad libitum, dan sari buah merah 0,1 ml per oral.
3.2.4.4 Sterilisasi Alat
Alat-alat gelas yang akan digunakan dicuci bersih dan dikeringkan. Setelah kering alat-alat tadi dibungkus dengan aluminium foil, kemudian disterilisasi
dengan menggunakan autoklaf pada suhu 121˚C, dengan tekanan 121 psi selama 20 menit.
41
3.2.4.5 Prosedur Penelitian
