Perhitungan Mikroba dengan Teknik Most Probable Number MPN
80
3 Terhindar dari pencemaran yang berasal dari bahan dan peralatan.
Dari setiap pengenceran, masing-masing dimasukkan 1 ml masing-masing ke dalam tabung yang berisi medium, dimana untuk setiap pengenceran
digunakan 3 atau 5 seri tabung. Setelah inkubasi pada suhu dan waktu tertentu, dihitung jumlah tabung yang positif. Misalnya, pada pengenceran
pertama 3 tabung menghasilkan pertumbuhan positif, pada pengenceran kedua menghasilkan 2 tabung yang positif, pada pengenceran ketiga
menghasilkan 1 tabung positif, dan pada pengenceran terakhir tidak adatabung yang positif. Dari hasil tersebut didapatkan kombinasinya
menjadi 3,2,1,0 dan jika diambil 3 pengenceran pertama kombinasinya menjadi 3,2,1. Angka kombinasi ini kemudian dicocokkan dengan tabel
MPN. Kemudian nilai MPN tersebut dihitung dengan rumus sebagai berikut:
MPN sampel = Nilai MPN dari tabel x 1pengenceran tabung tengah Tabel yang digunakan untuk menentukan nilai MPN dari 3 seri tabung
berbeda dengan tabel untuk 5 seri tabung.
Gambar 22. Metode MPN seri pengenceran 5 tabung
ungu : mediatidak terkontaminasi e coli, kuning : terkontaminasi e coli Sumber:http:www.qmlive.leeds.ac.ukq4session.watermicrobiology
81
Output metode MPN adalah nilai MPN.Nilai MPN adalah perkiraan jumlah unit tumbuh growth unit atau unit pembentuk-koloni colony-forming
unit dalam sampel.Namun, pada umumnya, nilai MPN juga diartikan sebagai perkiraan jumlah individu bakteri.Satuan yang digunakan,
umumnya per 100 mL atau per gram.Jadi misalnya terdapat nilai MPN 10g dalam sebuah sampel air, artinya dalam sampel air tersebut diperkirakan
setidaknya mengandung 10 coliform pada setiap gramnya.Makin kecil nilai MPN, maka air tersebut makin tinggi kualitasnya, dan makin layak minum.
Metode MPN memiliki limit kepercayaan 95 persen sehingga pada setiap nilai MPN, terdapat jangkauan nilai MPN terendah dan nilai MPN tertinggi
FDA, 1989.
Tabel 1. Daftar MPN coliform menggunakan 3 tabung
KombinasiJumlah tabung yang positif MPN per gramml
1 : 10 1 : 100
1 : 1000 1
1 1
1 1
2 2
2 2
2 2
3 3
3 3
3 3
3 3
3 1
1 1
2 1
1 2
2 1
1 1
2 2
2 1
1 1
1 1
1 1
2 1
2 1
2 3
3 3
4 7
7
11 11
9 14
15 20
21 28
23 39
64 43
75
120 93
150 210
82
3 3
3 3
3 3
3 3
1 2
3 240
460 1 100
2 400
Tabel 2. Daftar MPN Coliform menggunakan 5 tabung
KombinasiJumlah tabung positif
MPN100 ml KombinasiJumlah
tabung positif MPN100 ml
0-0-0 0-0-1
0-1-0 0-2-0
1-0-0 1-0-1
1-1-0 1-1-1
1-2-0
2-0-0 2-0-1
2-1-0 2-1-1
2-2-0 2-3-0
3-0-0 3-0-1
3-1-0 3-1-1
3-2-0 3-2-1
4-0-0 4-0-1
4-1-0 4-1-1
4-1-2 2
2 2
4
2 4
4 6
6
4 7
7 9
9
12 8
11 11
14 14
17
13 17
17 21
26 4-2-0
4-2-1 4-3-0
4-3-1 4-4-0
5-0-0 5-0-1
5-0-2 5-1-0
5-1-1 5-1-2
5-2-0 5-2-1
5-2-2 5-3-0
5-3-1 5-3-2
5-3-3 5-4-0
5-4-1 5-4-2
5-4-3 5-4-4
5-5-0 5-5-1
5-5-2 5-5-3
5-5-4 5-5-5
22 26
27 33
34
23 30
40 30
50 60
50 70
90 80
110 140
170 130
170 220
280 350
240 300
500 900
1600 1600
83
84
Contoh soal: Dari gambar diatas, berpakah nilai MPN coliform100 ml?
Kombinasi atau jumlah tabung yang positif adalah 5-3-1.Beapakah jumlah coliform dalam 100 ml sampel?
Jawab : Nilai dalam tabel MPN untuk untuk kombinasi 5-3-1 adalah 110
Nilai MPN = Nilai MPN dari tabel x 1pengenceran tabung tengah
= 110 x 110
-3
= 110000 Maka nilai MPN coliform100 ml adalah 110000 MPNml
85
Dengan menggunakan metode MPN ini, kita mendapat beberapa keuntungan antara lain:
1 Dapat dibuat sangat peka dengan penggunaan contoh lebih besar dari 1
mltabung 2
Dapat digunakan di lapangan karena media dapat disiapkan sebelumnya
3 Untuk tujuan tertentu dapat menggunakan media pertumbuhan selektif
sehingga hanya mikroba yang diharapkan dapat tumbuh baik Kelemahan utama dari metode MPN adalah membutuhkan waktu dan biaya
yang cukup besar untuk persiapannya karena pada prosedur kerjanya membutuhkan ulangan yang cukup banyak, dapat dilanjutkan dengan
melakukan uji biokomia yaitu uji IMVIC.