Morfologi Koloni Mikroskopis Kapang
54
b. Menghitung Total Koloni Kapang dalam Sampel Makanan
1 ALAT DAN BAHAN
Alat : Cawan petri
Pipet ukur 1 mL Termometer
Inkubator Neraca analitik
Pipet ukur 25 mL Vortex Spatula
Mikropipet Tip Botol sample
Autoclave Pembakar
Magnet stirer Hot plate
Beaker glass Tabung reaksi Bulp
Bahan : Media PDA Potato Dextro Agar
Aquadest Sample tepung
2 PROSEDUR
Membuat Media Membersihkan kentang dan mengupasnya, kemudian cincang
sampai halus. Menimbang kentang yang sudah halus sebanyak 100 gram
55
Memasukan kentang yang sudah ditimbang dalam beaker glass, dan mengisinya dengan aquadest.
Kemudian rebus selama 1 jam Menyaring kentang dan air rebusan dengan menggunakan kain
saring yang bersih. Menambahkan agar dan glukosa ke dalam filtrat, kemudian
memanaskannya kembali sampai agar larut. Menambahkan aquadest sampai volume semula.
Menambahkan asam tartrat 10 hingga pH media mencapai 3,5-4,0 Memindahkan media yang sudah jadi tersebut ke dalam erlenmeyer
yang steril Mensterilkan media dalam autoclave dengan suhu 121
o
C selama 15 menit
Persiapan alat dan bahan Menyiapkan tabung reaksi yang berisi aquadest steril sebanyak 9
mL dan botol untuk sampel, yang berisi aquadest steril sebanyak 225 gram
Menyiapkan alat yang akan dipergunakan Mensterilkan alat yang akan dipergunakan dan tabung reaksi dan
botol yang berisi aquadest steril tadi dalam autoclave pada suhu 121
o
C selama 15 menit.
Pengenceran Menimbang sampel tepung sebanyak 25 gram dan memasukannya
ke dalam botol yang berisi aquadest steril 225 mL steril. o Mengocoknya secara manual sebanyak ± 25 kali sampai homogen
Membuat pengenceran dari 10
-1
sampai pengenceran yang dibutuhkan
Melakukan semua tahap secara aseptis
56
Inokulasi Memipet hasil pengenceran dalam tabung reaksi masing-masing 1
mL, dan memasukannya dalam cawan petri steril. o Menuangkan media PDA steril hangat suhu sekitar 45 ± 1
o
C sebanyak 15-20 mL, ke dalam cawan petri steril yang berisi hasil
pengenceran Menggerakan petri secara memutar atau membentuk angka delapan,
sehingga hasil pengenceran dan media dapat bercampur secara homogen
Melakukan setiap tahapan diatas secara aseptis Membiarkan sampai media dalam cawan membeku atau mengeras
Memasukan cawan petri tersebut dalam inkobator pada suhu 25oC
atau sekitar suhu kamar selama 5 hari, dan posisikan cawan petri secara terbalik.
Menghitung koloni kapang