lxvii
Uji Angka Paling Mungkin MPN Coliform dalam Makanan dan Minuman menggunakan acuan MA PPOM 69MIK06 dan pustaka syarat SNI 01-3707-1995
untuk sampel Abon Ikan Tuna dan SNI 01-3543-1994 untuk sampel kecap.
1 Ruang Lingkup
Metode ini digunakan untuk menetapkan MPN Coliform dalam makanan atau minuman.
2 Prinsip :
Pertumbuhan bakteri coliform setelah dicuplikan diinokulasikan pada media cair yang sesuai, dengan mengamati adanya reaksi fermentasi dan
pembentukan gas dalam tabung durham.
3 Pereaksi Khusus Media dan pengencer : a Pepton Dilution Fluid PDF
b Mac Conky Broth MCB c Briliant Green Lastose Bile 2 Broth BGLB
4 Peralatan Khusus 1 Stomacher
2 Erlenmeyer 3 Pipet ukur mulut ukuran 1 ml, 5 ml, 10 ml
4 Tabung reaksi dilengkapi tabung durham 5 Prosedur Kerja dan Pernyataan Hasil
Pada lampiran 1.2 Flow Chart Uji MPN Coliform
c. Uji Salmonella dalam M akanan dan M inuman
Uji Salmonella dalam Makanan dan Minuman menggunakan acuan MA PPOM 74MIK06 dan pustaka syarat SNI 01-3707-1995
yaitu SNI sampel Abon Ikan Tuna 1 Ruang Lingkup
Metode ini digunakan untuk menetapkan adanya Salmonella dalam makanan dan minuman.
2 Prinsip Ada 4 tahap untuk mendeteksi adanya Salmonella yaitu
lxviii a Pra. Pengkayaan dalam media cair non selektif yang diinkubasi
pada 37+1°C selama 18+2 jam. b Pengkayaan dalam media cair selektif yang diinkubasi pada
41,5+1°C selama 24+3 jam dalam RVS Rappaport Vassiliadis Medium cair dan 37+1°C selama 24+3 jam MKTTn Muller
Kaufimann Tetrathionate Novobiocin Broth cair. c Inokulasi dan identifikasi dalam 2 media padat selektif, media
selektif yaitu BGA Bismuth Green Agar dan XLD Xylose Lysine Deoxycholate diinkubasi pada 37+1°C selama 24+3 jam.
d Konfirmasi terhadap identitas Salmonella dengan uji biokimia dan serologi.
3 Pereaksi Khusus a Media dan Pengencer
Buffered Peptone Water BPW Muller Kaufimann Tetrathionate Novobiocin Broth MKTTn
Rappaport Vassiliadis Medium + Soya RVS Bismuth Green Agar BGA atau Brillian Green Phenol red lactose
Sucrose Agar BPLS Xylose Lysine Deoxycholate XLD
Tryptic Soy Agar atau Nutrient Agar Miring Urea Agar Christensen
L.Lysine Decarboxy Lase Medium Tryptophan Medium Tryptone Broth
MR-VP medium Larutan Natrium Klorida 0,85
Nutrient Agar NA semi padat b Pereaksi
Larutan Alfa Naftol Larutan KOH 40
lxix Kovac
Cakram kertas ONPGC O-nitrophenyl betagalactopiranoside Salmonella antisera polivalen D, H Vi
c Mikroba baku
Salmonella Typhimurium ATCC 14028
4 Peralatan khusus Stomacherblender a Stomacher
b Erlenmeyer c Cawan Petri
d Tabung reaksi e Pipet ukur berskala, mulut lebar dengan ukuran 1 ml 10 ml
f Incubatortangas air pada 37+1 °C g Incubatortangas air pada 41,5+1 °C
5 Prosedur Kerja
Pada Lampiran 1.3 Flow Chart Uji Salmonella
6 Interpretasi Hasil TSIA
: butt = positif ; slant = negatif ; gas = positif H
2
S negativepositif Hidrolisis urea
: negative Dekarbosilasi Lysine
: positif β-Galaktosidase
: negative
Reaksi Voges : negative
7 Persyaratan Makanan atau minuman tidak boleh mengandung
Salmonella negative per 25 gram atau 25 ml.
d. Uji Staphylococcus aureus dalam M akanan dan M inuman