3.7. Prosedur Penelitian
3.7.1. Persiapan Penelitian
3.7.1.1.Persiapan Nyamuk Aedes aegypti
Nyamuk Aedes aegypti yang digunakan dalam penelitian ini adalah nyamuk Aedes aegypti umur 2-5 hari, yang diambil di Laboratorium
Rearing di Balai Litbang Banjarnegara, kemudian dimasukkan dalam paper cup. Pada paper cup terisi 50 ekor nyamuk, jumlah nyamuk
keseluruhan sebanyak 1.400 ekor.
3.7.1.2. Bahan dan Alat
Bahan dan alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah: 1.
Lotion ekstrak daun zodia. 2.
Kandang uji repellent ukuran 50x40x35 3.
Larutan gula 4.
Paper cup 5.
Thermometer 6.
Timer 7.
Aspirator 8.
Kapas 9.
Karet gelang
3.7.1.3. Pengadaan Ekstrak Daun Zodia
1. Daun zodia dikeringkan selama seminggu dengan suhu kamar agar senyawa yang terkandung dalam daun tidak rusak oleh sinar matahari.
2. Setelah kering digiling menggunakan blender hingga menjadi serbuk.
3. Serbuk diayak 4. Serbuk dimaserasi dengan pelarut polar etanol 70 selama 3
– 4 hari pada suhu kamar untuk menarik senyawa
–senyawa yang terkandung. 5. Setelah dimaserasi serbuk dimasukkan dalam perkolator Cairan
penyaring etanol 70 dituang perlahan – lahan dipermukaan serbuk
daun hingga cairan penyaring tergenang. 6. Kemudian kran perkulator dibuka dengan kecepatan menetes 1 ml
tiap menit, ekstrak ditampung dalam penampung. 7. Perkolasi dihentikan setelah ekstrak yang menetes jernih.
8. Ekstrak dalam penampung dipekatkan dengan evaporator hingga ekstrak berbentuk pasta.
3.7.1.4. Cara Pembuatan Lotion
Lotion dibuat dengan cara menimbang semua bahan dan meyiapkan mortir hangat. Bahan setil alkohol, asam stearat, PEG400,
dan metil paraben dimasukkan ke dalam cawan porselen dan dilebur di atas penangas air. Setelah bahan larut, dituang ke dalam mortir hangat
dan dicampur dengan bahan yang lain seperti trictanolamin, gliserin, dan minyak atsiri. Selanjutnya ditambah akuades sedikit demi sedikit 100
gram sambil diaduk hingga homogen. Setelah tercampur semua bahan dan suhu telah turun, dimasukkan ke dalam wadah yang telah disediakan
Mustanir, 2011.
3.7.1.5. Cara Pengujian
1 Nyamuk dimasukkan ke dalam kandang uji. Tiap kandang dimasukkan 50 ekor nyamuk betina Aedes aegypti.
2 Dioleskan lengan kiri dengan lotion ekstrak daun zodia secara merata dan tangan kanan tidak diolesi lotion sebagai pembanding dan
pemaparan 5 menit. 3 Dihitung jumlah nyamuk yang hinggap selama pemaparan, baik pada
tangan kanan maupun kiri. 4 Pengujian dilakukan 6 jam dibagi dalam 6 periode, 1 jam per periode,
dengan 5 menit pemaparan dan selama periode evaluasi repelensi, probandus tidak diijinkan mengusap atau menghapus atau mencuci
tangan. 5 Setiap kali selesai pengamatan, nyamuk ujilumpuh diganti dengan
nyamuk segar 6 Suhu tubuh probandus maupun suhu dan kelembaban udara selama
pengujian diukur setiap jam. 7 Efektivitas repellent yang diuji ditentukan berdasarkan daya proteksi
yang dihitung dengan rumus.
3.8. Pengumpulan dan Analisis Data