11
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1 HASIL 3.1.1 Isolasi Vibrio harveyi
Sebanyak delapan isolat terpilih dikulturkan pada media TCBS yaitu V-U5, V-U7, V-U8, V-U9, V-U24, V-U27, V-U41NL, dan V-V44.
a b
Isolat Vibrio sp. yang berpendar akan tumbuh sebagai koloni yang berwarna hijau di media TCBS Gambar a, sedangkan yang non luminescen
cenderung berwarna kekuningan Gambar b.
3.1.2 Karakterisasi Ekspresi Gen Hemolysin Isolat Vibrio Pada Media Agar
Darah.
Sebanyak 8 isolat terpilih telah dilakukan uji hemolisis dengan menggunakan media blood agar. Kode isolat, karakter luminesensi dan karakter
hemolisisnya tercantum pada Tabel 2dibawah ini.
Tabel 2.Karakterisasi uji hemolisis pada blood agar dari isolat-isolat Vibrio
No Kode
Karakter Luminous Uji
Hemolisis Tipe Hemolisis
1 V-U5
luminous +++
β - hemolisis 2
V-U7 luminous
++ α - hemolisis
3 V-U8
luminous +++
β - hemolisis 4
V-U9 luminous
++ α - hemolisis
5 V-U24
luminous +++
β - hemolisis 6
V-U27 luminous
+ α - hemolisis
7 V-U41NL
non luminous +++
β - hemolisis 8
V-V44 luminous
++ α - hemolisis
Gambar 3. Morfologi koloni isolat Vibrio sp. pada media TCBS
12 Berdasarkan uji hemolisis yang telah dilakukan dengan menggunakan
media blood agar, isolat yang ada menunjukkan ekspresi yang berbeda-beda. Secara kualitatif bisa dikategorikan lemahsangat lemah untuk isolat V-U27,
kategori hemolisis sedang untuk isolat V-U7,V-U9 dan V-V44, sedangkan untuk kategori zona lisis kuat terlihat pada isolat V-U5, V-U8, V-U24, dan V-U41NL.
Sedangkan jenis hemolisis untuk isolat V-U7, V-U9, V-U27, V-V44 adalah jenis α - hemolisis. Sedangkan untuk isolat V-U5, V-U8, V-U24, V-U41NL memiliki
tipe β – hemolisis. Dengan melihat ekspresi isolat yang telah dikultur di media blood agar
dan menghasilkan zona lisis maka dapat diduga bahwa proses amplifikasi gen hemolysin dari galur bakteri Vibrio dengan teknik PCR, dapat
dilakukan. Hasil uji hemolisis pada media blood agar dapat dilihat pada Gambar 4 di bawah ini.
Keterangan : Isolat V-U5 kiri mengekspresikan kemampuan
hemolisis kuat tipeβ – hemolisis, sedangkan V-U27 kanan memiliki kemampuan hemolisis lemah tipe
α - hemolisis. Keterangan : Uji hemolisis dilakukan secara kualitatif yaitu :
+++ : Menunjukkan zona lisis yang kuat ++ : Menunjukkan zona lisis yang sedang
+ : Menunjukkan zona lisis yang lemahsangat lemah
Gambar 4. Hasil uji hemolisis pada isolat-isolat Vibrio yang ditumbuhkan pada media blood agar.
13
3.1.3 Ekstraksi DNA kromosom dan Elektroforesis
