Perhitungan Rendemen Ekstrak Etanol Tempe Kedelai Pembuatan Fase Gerak Data Penetapan Kadar Genistein pada Ekstrak Etanol Tempe Kedelai Perhitungan Pembuatan Dapar Fosfat pH 6,5 50 Mm

LAMPIRAN

A. Perhitungan Rendemen Ekstrak Etanol Tempe Kedelai

Bobot serbuk kering = 442,268 gram Ekstrak kental =32,9 gram Rendemen yang diperoleh yaitu = 32,9 gram 442,268 gram x 100 = 7,439 bb

B. Pembuatan Fase Gerak

a . Fase gerak = Toluen : Etil asetat : Aseton : Asam format 20 : 4 : 2 : 1 Permatasari, 2015 dibuat sebanyak 20 ml b. Perhitungan masing-masing komposisi fase gerak Toluen = 20 27 x 20 ml = 15 ml Etil asetat = 4 27 x 20 ml = 3 ml Aseton = 2 27 x 20 ml = 1,5 ml Asam format = 1 27 x 20 ml = 0,74 ml

C. Data Penetapan Kadar Genistein pada Ekstrak Etanol Tempe Kedelai

C.1 Standar Genistein Massa ng Area Standar 10 µgml 20 728,56 Standar 15 µgml 30 913,38 Standar 20 µgml 40 1225,33 Standar 30 µgml 60 1759,37 Standar 40 µgml 80 2017,50 Standar 60 µgml 120 2935,99 Standar 75 µgml 150 3571,84 Persamaan regresi : Y = 21,77X + 324 r = 0,99811 C.2 Sampel Ekstrak Etanol Tempe Kedelai Replikasi Penimbangan mg Massa Hasil Percobaan mg Kadar bb RSD 1 50,6 0,1244 0,246 1,497 2 50,5 0,120683 0,24 3 50,6 0,1246 0,246 Rata-rata 0,244 C.3 Perhitungan Kadar Misal : Area sampel replikasi 1 sebesar 1948,67 Y = 21,77 X + 324 1948,67 =21,77X + 324 X= 74,64 ng6 µl Massa genistein dalam 10 ml = 74,64ng 6µl ×10000µl=124400 ng =0,1244 mg Penimbangan ekstrak = 50,6 mg bb = massa genistein massa ekstrak x 100 = 0,1244mg 50,6mg X 100=0,246 b b

D. Perhitungan Pembuatan Dapar Fosfat pH 6,5 50 Mm

a. KH 2 PO 4 BM KH 2 PO 4 = 136,09 M = massa BM × 1000 V ml 50 mM = X 136,09 × 1000 250ml 6804,5 mg = 4X X = 1,701125 gram KH 2 PO 4 Untuk 300 ml, maka KH 2 PO 4 yang diambil = 50ml KH 2 PO 4 X = 200ml 300ml = 75ml diambil b. NaOH BM NaOH = 40 M = massa BM × 1000 Vml 50mM = X 40 × 1000 50ml 2000 mg = 20X X= 100 mg NaOH Untuk 300ml, maka NaOH yang diambil = 12,6ml NaOH X = 200ml 300ml = 18,9ml diambil Jadi, untuk membuat dapar fosfat pH 6,5 50 mM maka KH 2 PO 4 ditimbang sebanyak 1,701125 gram dilarutkan dalam akuades hingga volume 250 ml, sehingga diperoleh larutan KH 2 PO 4 50 mM. Kemudian NaOH ditimbang sebanyak 100 mg dilarutkan dalam akuades hingga volume 50 ml, sehingga diperoleh larutan NaOH 50 mM. Larutan dapar fosfat pH 6,5 dibuat dengan cara menambahkan 75 ml KH 2 PO 4 50mM dengan 18,9 ml NaOH 50mM lalu diencerkan dengan akuades hingga volume 300 ml . Lalu dilakukan pengukuran pH dengan pH meter sampai diperoleh pH 6,5, jika perlu ditambahkan NaOH untuk meningkatkan pH larutan.

E. Perhitungan Larutan Substrat L-Tirosin 1mM