Penentuan panjang gelombang maksimum. Pembuatan kurva kalibrasi dan validasi metoda

dengan boraks pada kadar 10 µ gml, 12,5 µgml, 18,75 µ gml, 20 µ gml, 25 µgml, 30 µgml, 31,25 µ gml, 37 µgml, 43,75 µgml, 50 µgml.

4.4.2 Penentuan panjang gelombang maksimum.

Dari larutan mie dengan kadar 25 µgml dipipet 1 ml kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselin dan ditambahkan 1 ml larutan NaOH 10, dipanaskan di atas penangas air sampai kering, kemudian pemanasan dilanjutkan dengan oven pada suhu 100 ± 5 C selama 5 menit, didinginkan. Ditambahkan 3 ml larutan kurkumin 0,125 dipanaskan sambil diaduk selama 5 menit, didinginkan lagi. Kemudian ditambahkan 3 ml larutan asam sulfat–asetat 1:1 dipanaskan sambil diaduk sampai tidak ada warna kuning, baik pada cawan maupun pada pengaduk, didiamkan selama 15 menit. Ditambahkan sedikit alkohol kemudian dimasukkan ke dalam labu kur 100 ml, diencerkan dengan alkohol sampai garis tanda. Kemudian larutan disaring dengan kertas penyaring. Hasil saringan dikumpulkan dan diamati serapannya pada panjang gelombang antara 400 sampai 600 nm.

4.4.3 Pembuatan kurva kalibrasi dan validasi metoda

Dari larutan 6,25 µgml dipipet 1 ml kemudian dimasukkan ke dalam cawan porselin dan ditambahkan 1 ml larutan NaOH 10, dipanaskan di atas penangas air sampai kering, kemudian pemanasan dilanjutkan dengan oven pada suhu 100 ± 5 C selama 30 menit, kemudian didinginkan pada suhu ruangan. Ditambahkan 3 ml larutan kurkumin 0,125 dipanaskan sambil diaduk selama 5 menit, didinginkan lagi. Kemudian ditambahkan 3 ml larutan asam sulfat–asetat 1:1 dipanaskan sambil diaduk sampai tidak ada warna kuning, baik pada cawan maupun pada pengaduk, didiamkan selama 15 menit. 37 Ditambahkan sedikit alkohol kemudian dimasukkan ke dalam labu kur 100 ml, diencerkan dengan alkohol sampai garis tanda. Disaring dengan kertas saring. Hasil saringan dikumpulkan dan diamati serapannya pada panjang gelombang 545,95 nm. Lakukan hal yang sama pada , 12,5 µ gml, 18,75 µ gml, , 25 µgml, , 31,25 µgml, 37 µgml, 43,75 µgml, 50 µ gml untuk kurva kalibrasi dan 10 µgml, 20 µ gml, 30 µgml untuk validasi metoda.

4.4.4 Analisa sampel pasar secara kualitatif dan kuantitatif a.