Cara Kerja Alat Persiapan Perlakuan Sampel

c. Cara Kerja Alat

Ketika power supply sebagai pembangkit tenaga dihidupkan, maka multivibrator astabil akan bekerja menghasilkan suatu deretan gelombang persegi. Karena gelombang yang dihasilkan oleh multivibrator astabil ini masih sangat lemah, maka dibutuhkan suatu penguat operasional untuk menghasilkan gelombang keluaran yang besar.

d. Persiapan Perlakuan Sampel

Langkah-langkah persiapan meliputi sterilisasi alat dan bahan, pembuatan media, peremajaan bakteri, dan membuat suspensi bakteri Gram positif dan Gram negatif. Sterilisasi alat dan bahan. Sterilisasi dilakukan menggunakan autoclaf pada suhu 121 C dan tekanan 2 atm atmosfir yang bertujuan untuk membunuh semua mikroorganisme yang terdapat pada semua bahan dan alat yang akan dipakai dalam penelitian. Hal ini untuk menghindari terkontaminasi dengan mikroorganisme lain. a. Pembuatan media Langkah pembuatan media sebagai berikut: 1. Nutrient Agar ditimbang sesuai dengan keperluan kemudian dimasukkan ke dalam beaker glass untuk dilarutkan dengan aquades. Adapun ketentuan pengenceran media adalah 23 gl, ini berarti tiap 5,75 g Nutrient Agar dilarutkan ke dalam 250 ml aquades. 2. Larutan dipanaskan dengan kompor listrik sambil diaduk-aduk, setelah mendidih diangkat kemudian ditutup dengan kapas dan dibungkus aluminium foil, selanjutnya disterilisasi dengan autoclaf. 3. Langkah selanjutnya media diambil dan dibiarkan hingga suhunya turun sampai sekitar ± 50 C, media telah siap digunakan. b. Peremajaan bakteri bakteri Gram positif dan Gram negatif Untuk mendapatkan bakteri Gram positif dan Gram negatif usia muda dilakukan cara peremajaan sebagai berikut: 1. Menimbang Nutrient Broth sesuai dengan keperluan kemudian dilarutkan dengan aquades sesuai dengan aturan. 2. Larutan dipanaskan sambil diaduk-aduk sampai mendidih kemudian diangkat. Media yang sudah mendidih dituangkan kedalam beberapa tabung reaksi dan suhunya dibiarkan turun. Setelah suhunya turun, tabung reaksi ditutup dengan kapas dan selanjutnya dibungkus dengan plastik untuk disterilisasi di autoclaf. 3. Setelah steril dan dingin, dimasukkan 1 ose kultur murni bakteri. Gram positif dan Gram negatif selanjutnya diinkubasi selama 24 jam dan siap digunakan. c. Pembuatan suspensi bakteri Gram positif dan Gram negatif Menyiapkan 8 tabung reaksi yang telah berisi aquades steril masing-masing 9 ml. Hal ini dilakukan untuk mendapatkan konsentrasi tertentu yang mana jumlah koloni nantinya memenuhi syarat hitung statistik. Konsentrasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah 10 -8 . Diagram alir pengambilan data ditunjukkan oleh gambar berikut. Gambar 3.5 Diagram Alir Pengambilan Data Bakteri Gram positif dan Gram negatif dari hasil peremajaan yang berumur sekitar 24 jam diambil 1 ml secara aseptik. Kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi aquades steril 9 ml, tabung reaksi ini dikocok-kocok supaya bakteri merata homogen. Kemudian dari tabung reaksi ini dipipet sebanyak 1 ml untuk dimasukkan kedalam tabung kedua yang berisi aquades 9 ml dan seterusnya sampai tabung ke delapan. Selanjutnya suspensi dari tabung ke delapan ini dipipet sebanyak 1 ml untuk dimasukkan ke dalam cawan petri yang nantinya akan diradiasi dengan gelombang ultrasonik.

e. Perlakuan Sampel