36
4.6 Isolasi Senyawa SteroidTriterpenoid
Isolasisenyawa steroidtriterpenoid dilakukansecara KLT preparatif menggunakan fase gerak n-heksan-etilasetat 80:20 dan sebagai penampak
bercak pereaksi Liebermann-Burchard. Kromatogram hasilKLT preparatif dapat dilihat pada Gambar 4.2.
Gambar 4.2 Kromatogram hasilKLT preparatif
Keterangan: Fasediam: silika gel 60 GF
254
, fasegerak: n-heksan-etilasetat 80:20,
penampak bercak Liebermann-Burchard,
tp=titik penotolan, bp=batas pengembangan.
Isolat yang dihasilkan menunjukkan noda tunggal berwarna merah ungu dengan penambak bercak pereaksi Liebermann-Burchard yang merupakan
golongan senyawa triterpenoid dengan harga Rf 0,60. tp
bp
Universitas Sumatera Utara
37
Kromatogram isolat hasilKLT preparatif dapat dilihat pada Gambar 4.3.
Gambar 4.3 Kromatogram isolat hasilKLT preparatif
Keterangan: Fasediam: silika gel 60 F
254,
fasegerak: n-heksan-etilasetat 80:20,penampak bercak Liebermann-Burchard, tp = titik
penotolan,bp=batas pengembangan. 4.7Uji Kemurnian Isolat Secara KLT Dua Arah
Isolat yang diperoleh diuji kemurniannya secara KLT dua arah. Uji kemurnian isolat secara KLT dua arah menggunakan dua sistem pengembang
fase gerak yang berbeda sifat kepolarannya. Fase gerak I digunakan n-heksan- etilasetat 80:20 dan fase gerak II digunakan benzen-etilasetat 80:20 dengan
penampak bercak digunakan pereaksi LBLiebermann-Burchard. Hasil KLT dua arah menunjukkan satu noda berwarna merah ungu dengan harga Rf 0,55. Hasil
ini menunjukkan bahwa senyawa triterpenoidyang diperoleh sudah
murni.Kromatogram hasil KLT dua arah dapat dilihat pada Gambar 4.4. tp
bp
Universitas Sumatera Utara
38
Gambar 4.4 Kromatogram hasil KLT dua arah dari isolat murni
Keterangan: Fase diam silika gel 60 F
254
, fase gerak I = n-heksana-etilasetat 80:20, fase gerak II = benzen-etilasetat 80:20 , penampak bercak
Liebermann–Burchard, tp = titik pentotolan, bp1 = batas pengembangan 1, bp2 = batas pengembangan 2, A1= arah
pengembangan pertama, A2 = arah pengembangan kedua.
4.8 Identifikasi Isolat Secara Spektrofotometri Ultraviolet