14
Lampiran 3 Prosedur Analisis Proksimat AOAC 1999
3. 1 Kadar Air Cawan porselen di oven pada suhu 105 sampai 110 °C selama 1 jam dan
didinginkan di dalam desikator kemudian ditimbang X1. Bahan sebanyak 2 sampai 3 g A dimasukkan ke dalam cawan porselen dan dioven pada suhu 105
sampai 110 °C selama 2 jam. Setelah itu cawan dipindahkan ke desikator selama 30 menit dan kemudian ditimbang X2, Kadar air dihitung dengan menggunakan
rumus sebagai berikut.
Kadar air = X + A
A − X x
3.2 Kadar Abu
Cawan porselen di oven pada suhu 105 sampai 110 °C selama 1 jam, kemudian didinginkan di dalam desikator selama 15 sampai 30 menit dan ditimbang
X1, Bahan sebanyak 2 sampai 3 g A dimasukkan ke dalam cawan tersebut dan dipanaskan di dalam tanur pada suhu 600 °C, kemudian didinginkan di dalam
desikator selama 30 menit dan ditimbang X2. Persentase kadar abu dihitung dengan menggunakan rumus :
Kadar abu = X − X
A x
3.3 Kadar Protein
3.3.1 Tahap oksidasi
Bahan, katalis, dan H
2
SO
4
pekat masing-masing di timbang sebanyak 0,5 g A, 3 gram dan 10 ml. Setelah itu dimasukkan ke dalam labu Kjedhal dan
dipanaskan selama 3 sampai 4 jam di dalam rak oksidasi hingga berwarna hijau bening, Larutan didinginkan dan kemudian diencerkan dalam erlenmeyer sampai
volume larutan mencapai 100 ml.
3.3.2 Tahap Destilasi
Erlenmeyer 250 ml diisi dengan 10 ml H
2
SO
4
0,05 N dan 2 tetes larutan indikator phenolpthalein yang disimpan di bawah pipa pembuangan kondesor
dengan cara dimiringkan sehingga ujung pipa tenggelam dalam cairan. Larutan hasil oksidasi sebanyak 5 ml dimasukkan ke dalam tabung destilasi melalui corong
dan dibilas dengan aquades, kemudian 10 ml NaOH 30 dimasukkan melalui corong tersebut dan kemudian ditutup. Campuran alkalin dalam labu destilasi
disuling menjadi uap air selama 10 menit setelah terjadi pengembunan pada kondesor.
15
3.3.3 Tahap Titrasi
Hasil destilasi dititrasi dengan larutan NaOH 0,05 N hingga berubah warna menjadi bening, Hasil volume titrasi dicatat V. Prosedur yang sama juga
dilakukan pada blangko. Persentase protein dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut :
Kadar protein = ,
∗ x , ∗∗ x Vb − Vs x A
x Keterangan :
Vb = ml 0,05 N titran NaOH untuk blangko
Vs = ml 0,05 N titran NaOH untuk sampel
A = Bobot sampel g
= Setiap ml 0,05 NaOH ekuivalen dengan 0,0007 g N = Faktor nitrogen
3.4 Kadar Lemak
Metode ekstraksi Soxhlet Labu dipanasklan pada suhu 104 sampai 110 °C selama satu jam, lalu
didinginkan di dalam desikator selama 30 menit dan ditimbang X1, Bahan sebanyak 2 sampai 3 g A dimasukkan ke dalam selongsong, kemudian
dimasukkan ke dalam tabung Soxhlet dan di beri 100 sampai 150 ml N-Hexan hingga selongsong terendam. Sisa N-Hexan dimasukkan ke dalam labu, labu di
panaskan di atas hotplate hingga larutan perendam selongsong dalam soxhlet berwarna bening, labu dan lemak yang tersisa dipanaskan di dalam oven selama 15
menit dan didinginkan, kemudian di timbang X2, Persentase lemak dihitung dengan menggunakan rumus :
Kadar lemak = X + X
A x
Metode ekstraksi Folch
Labu silinder dioven terlebih dahulu pada suhu 105°C -110°C selama 1 jam, lalu didinginkan dalam desikator selama 30 menit kemudian ditimbang X1.
Sampel ditimbang sebanyak 2-3 g A dan dimasukkan ke dalam gelas homogen dan ditambahkan larutan kloroformmetanol 20 x A, sebagian disisakan untuk
membilas pada saat penyaringan. Sampel dihomogenkan selama 5 menit lalu disaring dengan vacuum pump. Sampel yang telah disaring tersebut dimasukkan ke
dalam labu pemisah yang telah diberi larutan MgCI2 0,03 N 0,2 x C lalu dikocok dengan kuat minimal selama 1 menit kemudian ditutup dengan aluminium foil dan
didiamkan selama 1 malam. Lapisan bawah yang terdapat dalam labu pemisah disaring ke dalam labu silinder kemudian dievaporasi sampai kering. Sisa
kloroformmethanol yang terdapat dalam labu ditiup dengan menggunakan vacuum lalu ditimbang X2.
Kadar lemak = X2− X1 A x 100
