3 METODE PENELITIAN
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian yang terdiri dari beberapa tahap dilakukan pada tahun 2007- 2008. Tahap kultivasi Chaetoceros gracilis, pemanenan, pengeringan biomasa,
dan ekstraksi komponen aktif antibakteri, analisis aktivitas antibakteri, analisis kerusakan sel bakteri, dan analisis kandungan kimia dlakukan di Laboratorium
Mikrobiologi Hasil Perairan dan Laboratorium Bioteknologi Hasil Perairan, Departemen Teknologi Hasil Perairan, FPIK, IPB, Bogor dan Laboratorium di
lingkungan IPB. Pengamatan morfologi sel bakteri yang menggunakan Scanning Electron Microscopy
SEM dilakukan di Laboratorium Bidang Biologi, LIPI Cibinong, sedangkan analisis kandungan kimia seperti komposisi asam amino
menggunakan HPLC dan asam lemak menggunakan GC dilakukan di Laboratorium Terpadu IPB.
3.2 Bahan dan Alat
1 Bahan Bahan baku yang digunakan pada penelitian ini adalah mikroalga laut
jenis Chaetoceros gracilis yang merupakan koleksi dari Pusat Penelitian Oseanografi, LIPI, Jakarta. Mikroalga ini terlebih dahulu disegarkan, selanjutnya
ditumbuhkan di Laboratorium Bioteknologi Hasil Perairan, Departemen Teknologi Hasil Perairan, FPIK-IPB.
Beberapa bahan lain yang digunakan pada penelitian ini meliputi bahan untuk proses kultivasi mikroalga Chaetoceros gracilis, yaitu urea, tripple super
fosfat TSP, silika, vitamin, trace element. Bahan untuk ekstraksi metanol dan heksan, bahan untuk karakterisasi komponen aktif yang meliputi Mueller Hinton
Agar MHA, Nutrient Broth NB, bahan untuk analisis kerusakan bakteri, serta bahan-bahan untuk analisis komposisi kimia dan fitokimia biomasa Chaetoceros
gracilis. Bakteri yang digunakan pada penelitian ini meliputi beberapa jenis, yaitu
bakteri Gram negatif yang meliputi Vibrio harveyi diperoleh dari Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar, Bogor dan Departemen Budidaya Perikanan,
Institut Pertanian Bogor dan Escherichia coli ATCC 25922 diperoleh dari Departemen Kesehatan Masyarakat Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan,
Institut Pertanian Bogor, serta bakteri Gram positif yang meliputi
Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Bacillus cereus ATCC 13091
diperoleh dari Departemen Kesehatan Masyarakat Veteriner, Institut Pertanian Bogor. Bakteri-bakteri ini disegarkan dalam Nutrien Agar, sedangkan Vibrio
harveyi disegarkan dalam medium sea water complete SWC
4 Peralatan Peralatan yang digunakan pada penelitian ini terdiri dari peralatan untuk
kultivasi Chaetoceros gracilis erlenmeyer, akuarium, pompa udara, lampu dan sebagainya, peralatan untuk pemanenan biomasa filter keramik, pompa, freeze
dryer dan sebagainya serta alat untuk ekstraksi komponen aktif vortex,
magnetic stirrer , evaporator dan sebagainya. Selain itu juga digunakan
peralatan untuk analisis aktivitas antibakteri inkubator, clean bench, oven sterilisasi, autoklaf, refrigeraor dan sebagainya, peralatan untuk analisis
kerusakan bakteri sentrifus, refrigerator, freezer dan sebagainya, peralatan untuk analisis morfologi sel bakteri mikroskop elektron serta beberapa
peralatan untuk analisis kandungan kimia HPLC, GC, AAS, Gen Quant.
3.3 Tahapan Penelitian dan Analisis
Kategori