BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Nutrisi, Departemen Ilmu Nutrisi dan Teknologi Pakan, Fakultas Peternakan dan Laboratorium Farmasi,
Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor mulai bulan Juni sampai Agustus 2008. Penelitian ini
dilaksanakan dalam dua tahap, yaitu tahap persiapan dan pelaksanaan. Tahap persiapan meliputi pembuatan simplisia, pembuatan ekstrak etanol daun alpukat,
persiapan kandang, pakan dan hewan percobaan sedangkan tahap pelaksanaan meliputi perlakuan, pengamatan dan analisis data.
3.2 Alat dan Bahan
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sonde lambung, gelas ukur, timbangan digital, maserator, rotary evaporator, instrumen AAS,
spektrofotometer, oven, gelas piala 100 ml, cawan penguap, batang pengaduk, ayakan nomor 20, seperangkat alat bedah tikus dan tabung mikro Eppendorf
®
. Bahan yang digunakan adalah daun alpukat, etanol 70 , etilen glikol 0,75 ,
amonium klorida 2 , eter, tikus putih jantan galur Sprague Dawley, asam nitrat 0,4 N dan akuades.
3.3 Determinasi dan Pengumpulan Daun Alpukat
Daun alpukat diperoleh dari Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat BALITRO dan dilakukan determinasi daun alpukat di Pusat Penelitian Biologi,
Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia LIPI, Cibinong untuk memastikan bahwa bahan coba benar-benar jenis Persea americana Mill. Bagian yang digunakan
adalah daun yaitu daun yang sudah tua dan terletak di tengah ranting.
3.4 Pembuatan Serbuk Simplisia Daun Alpukat
Daun alpukat kemudian dibersihkan dari kotoran yang menempel, kemudian dicuci dengan air mengalir sampai bersih dan ditiriskan, kemudian
dikeringkan dengan cara diangin-anginkan atau dijemur di bawah sinar matahari dengan ditutup plastik hitam. Setelah kering kemudian dibersihkan kembali dari
kotoran yang mungkin tertinggal saat pencucian. Setelah bersih dari kotoran,
maka simplisia kering diserbukan dan diayak dengan ayakan nomor 20 sehingga didapat serbuk daun alpukat, disimpan dalam wadah bersih dan tertutup rapat
Ditjen POM 2000.
3.5 Pembuatan ekstrak etanol Daun Alpukat