Aktivitas imunomodulator ekstrak etanolik daun kemangi (Ocimum basilicum L. forma citratum Back) terhadap mencit jantan galur Balb/C dengan metode Carbon Clearance dan Neutrophil Adhesion - USD Repository

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

AKTIVITAS IMUNOMODULATOR EKSTRAK ETANOLIK DAUN
KEMANGI (Ocimum basilicum L. forma citratum Back) TERHADAP
MENCIT JANTAN GALUR BALB/C DENGAN METODE CARBON
CLEARANCE DAN NEUTROPHIL ADHESION

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)
Program Studi Farmasi

Oleh :

Nisia Anggita Linsentia
NIM : 068114066

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2011

 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

AKTIVITAS IMUNOMODULATOR EKSTRAK ETANOLIK DAUN

KEMANGI (Ocimum basilicum L. forma citratum Back) TERHADAP
MENCIT JANTAN GALUR BALB/C DENGAN METODE CARBON
CLEARANCE DAN NEUTROPHIL ADHESION

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)
Program Studi Farmasi

Oleh :
Nisia Anggita Linsentia
NIM : 068114066

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2011

ii

 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

Persetujuan Pembimbing

iii
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN

MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

Pengesahan Skripsi Berjudul

iv
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

There’s no life without God

Our savior
There’s no one can be success without God
Our Strength
There’s no one can feel the happiness without God
Our Light
There’s no peace and freedom without God
Our Hope

Dedicated to :
My Savior, Jesus Christ
My Parents,
My Sister,
and My Love

v
 

 

PLAGIAT

PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH
UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

vi
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA
Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis
ini tidak memuat karya atau bagian karya orang lain, kecuali yang telah
disebutkan dalam kutipan dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah.
Apabila di kemudian hari ditemukan indikasi plagiarisme dalam
naskah ini, maka saya bersedia menanggung segala sanksi sesuai peraturan
perundang-undangan yang berlaku

Yogyakarta, 12 Januari 2011
Penulis

Nisia Anggita Linsentia

vii
 

 

PLAGIAT

PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus atas
segala penyertaan, perlindungan, kekuatan, berkat dan rahmat-Nya, sehingga
penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Aktivitas Imunomodulator
Ekstrak Etanolik Daun Kemangi (Ocimum Basilicum L. forma citratum
Back) Terhadap Mencit Jantan Galur Balb/c Dengan Metode Carbon
Clearance dan Neutrophil Adhesion”.
Skripsi ini disusun guna memenuhi salah satu syarat untuk
memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Farmasi di
Universitas Sanata Dharma.
Proses penyusunan skripsi ini telah melibatkan bantuan dari banyak
pihak baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis
menyampaikan terima kasih kepada :

1. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
2. Bapak Dr. C. J. Soegihardjo, Apt., selaku dosen pembimbing yang telah
membimbing dan membantu penulis dari awal hingga selesainya skripsi ini.
3. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si. selaku dosen penguji atas masukan, saran,
dan petunjuk yang telah diberikan.
4. Ibu Yunita Linawati, M.Sc., Apt. selaku dosen penguji atas masukan, saran,
dan petunjuk yang telah diberikan.

viii
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

5. Dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, yang telah membimbing
penulis selama studi.
6. Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma beserta
stafnya.
7. Laboran Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, yang telah membantu
penulis selama studi, khususnya Mas Heru, Mas Parjiman, dan Mas Wagiran
yang telah membantu dan mendampingi penulis selama penelitian.
8. Sahabat dan teman-temanku tersayang: Lina Rosita, Irene Christina, Dwitiya
Kusuma, Cik Yohana Octaviani, Ika Rahayu, M.A. Ratna Kumalasari, Jayanti
Micell, Bernadus Tatag, Alvonsius Rudianto, Thomas Anggun, Ivana
Carolina, Nadya Stephanie, dan Monica Aprilda yang telah banyak membantu
penulis dalam penyusunan skripsi ini.
9. Semua pihak yang telah membantu secara moral maupun material.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa skripsi ini masih jauh dari
sempurna, untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak.
Akhir kata, penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca.

Yogyakarta, Januari 2011
Penulis

ix
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ........................................................................................... ii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .................................................iii
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................. iv
HALAMAN PERSEMBAHAN .......................................................................... v
LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI .......................................................... vi
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ............................................................ vii
PRAKATA ....................................................................................................... viii
DAFTAR ISI ....................................................................................................... x
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xv
INTISARI ......................................................................................................... xvi
ABSTRACT ...................................................................................................... xvii
BAB I. PENGANTAR ........................................................................................ 1
A. Latar Belakang .................................................................................. 1
1. Perumusan masalah ............................................................... 3
2. Keaslian penelitian ................................................................ 3
3. Manfaat penelitian ................................................................. 4
B. Tujuan Penelitian .............................................................................. 4
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ................................................................. 5
A. Kemangi ............................................................................................ 5
1. Keterangan botani ....................................................................... 5

x
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

2. Nama daerah ................................................................................ 5
3. Morfologi .................................................................................... 5
4. Keanekaragaman ......................................................................... 6
5. Kandungan kimia ........................................................................ 6
6. Kegunaan .................................................................................... 7
B. Flavonoid .......................................................................................... 8
C. Penyarian ......................................................................................... 10
D. Sistem Imun ..................................................................................... 13
E. Imunomodulator .............................................................................. 17
F. Metode Carbon Clearance .............................................................. 19
G. Metode Neutrophil Adhesion .......................................................... 20
H. Imboost® ........................................................................................... 21
I. Landasan Teori ................................................................................ 22
J. Hipotesis .......................................................................................... 22
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ........................................................ 23
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ...................................................... 23
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ................................. 23
1. Variabel penelitian .................................................................... 23
2. Definisi operasional .................................................................. 24
C. Bahan dan Alat Penelitian ............................................................... 24
D. Tata Cara Penelitian ........................................................................ 25
1. Determinasi tanaman ................................................................. 25
2. Pengumpulan tanaman .............................................................. 25

xi
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

3. Pembuatan serbuk daun tanaman kemangi ............................... 26
4. Ekstraksi serbuk daun tanaman kemangi .................................. 26
5. Uji kualitatif flavonoid daun kemangi ....................................... 26
6. Penyiapan hewan uji ................................................................. 27
7. Pembuatan CMC Na 0,5% ........................................................ 27
8. Pengelompokan hewan uji ........................................................ 27
9. Carbon clearance test ............................................................... 28
10. Neutrophil adhesion test ........................................................... 29
E. Analisis Hasil .................................................................................. 29
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 31
A. Determinasi Tanaman Kemangi ...................................................... 31
B. Ekstraksi Daun Tanaman Kemangi ................................................. 31
C. Uji Kualitatif Flavonoid Daun Kemangi ......................................... 32
D. Hasil Perlakuan Terhadap Hewan Uji .............................................. 33
E. Hasil Uji Carbon Clearance ........................................................... 35
F. Hasil Uji Neutrophil Adhesion ........................................................ 39
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 44
A. Kesimpulan ..................................................................................... 44
B. Saran ................................................................................................ 44
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 45
LAMPIRAN ...................................................................................................... 49
BIOGRAFI PENULIS .................................................................................... 123

xii
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

DAFTAR TABEL
Tabel I.

Hasil Uji Kualitatif Flavonoid Ekstrak Etanolik Daun Kemangi .... 33

Tabel II.

Indeks Fagositosis Tinta Karbon dalam Darah Mencit ................... 36

Tabel III.

Uji ANOVA Indeks Fagositosis Taraf Kepercayaan 95% .............. 37

Tabel IV.

Rangkuman Hasil Post Hoc Test LSD Carbon Clearance .............. 37

Tabel V.

Prosentase Neutrophil Adhesion Tiap Perlakuan ............................. 40

Tabel VI.

Uji ANOVA Neutrophil Adhesion Taraf Kepercayaan 95% ........... 41

Tabel VII. Rangkuman Hasil Post Hoc Test LSD Neutrophil Adhesion ........... 41

xiii
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.

Contoh Struktur Kimia Senyawa Penyusun Minyak Atsiri
Kemangi ......................................................................................... 7

Gambar 2.

Struktur Senyawa Flavonoida ........................................................ 9

Gambar 3.

Profil Rata-rata Berat Badan Mencit Tiap Hari Selama Masa
Perlakuan Carbon Clearance ......................................................... 34

Gambar 4.

Profil Rata-rata Berat Badan Mencit Tiap Hari Selama Masa
Perlakuan Neutrophil Adhesion ..................................................... 35

Gambar 5.

Histogram Indeks Fagositosis Hasil Uji Carbon Clearance ........ 38

Gambar 6.

Histogram Hasil Uji Neutrophil Adhesion ................................... 42

Gambar 7.

Foto Tanaman Kemangi ............................................................... 50

Gambar 8.

Foto Daun Tanaman Kemangi ..................................................... 50

Gambar 9.

Foto KLT pada 254 nm Setelah Diuapi Amoniak ....................... 53

Gambar 10. Foto KLT pada 365 nm Setelah Diuapi Amoniak ....................... 54
Gambar 11. Foto KLT Setelah Diuapi Amoniak ............................................. 55

xiv
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi Tanaman .................................... 49
Lampiran 2. Foto-foto Tanaman Kemangi ...................................................... 50
Lampiran 3. Foto Ekstrak Kental Daun Kemangi ........................................... 51
Lampiran 4. Foto Peringkat Dosis Ekstrak Etanolik Daun Kemangi ............. 52
Lampiran 5. Hasil Uji Kualitatif Flavonoid Daun Tanaman Kemangi ........... 53
Lampiran 6. Perhitungan Dosis Ekstrak Etanolik Daun Kemangi .................. 56
Lampiran 7. Data Absorbansi dan Perhitungan Indeks Fagositosis ................ 59
Lampiran 8. Foto Sel Leukosit Mencit ........................................................... 62
Lampiran 9. Data Jumlah Neutrofil, TLC, Perhitungan Indeks Neutrofil dan
Neutrophil Adhesion ................................................................... 63
Lampiran 10. Data ANOVA Indeks Fagositosis ............................................... 67
Lampiran 11. Data ANOVA Neutrophil Adhesion ............................................ 70
Lampiran 12. Data Uji Neutrofil dan TLC Kontrol Positif Imboost®................ 73
Lampiran 13. Data Uji Neutrofil dan TLC Kontrol Negatif CMC Na 0,5% .... .83
Lampiran 14. Data Uji Neutrofil dan TLC Kemangi Dosis I ............................ 93
Lampiran 15. Data Uji Neutrofil dan TLC Kemangi Dosis II .......................... 103
Lampiran 16. Data Uji Neutrofil dan TLC Kemangi Dosis III ........................ 113

xv
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

INTISARI
Peningkatan aktivitas sistem imun dikembangkan ke arah penggunaan
bahan alam yang mengandung senyawa aktif sebagai imunostimulator. Flavonoid
berfungsi untuk meningkatkan respon imun dan berpotensi sebagai antioksidan
pada pertumbuhan kanker. Namun belum dapat dipastikan bahwa flavonoid yang
terkandung dalam berbagai jenis tanaman bisa meningkatkan aktivitas sistem
imun. Dari literatur telah diketahui bahwa kemangi (Ocimum basilicum L.)
mengandung senyawa flavonoid. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
aktivitas imunomodulator ekstrak etanolik daun kemangi terhadap mencit jantan
galur balb/c yang dibandingkan dengan kontrol. Penelitian ini merupakan jenis
penelitian eksperimental murni dengan analisis statistik deskriptif. Aktivitas
imunomodulator ekstrak etanolik daun kemangi diuji dengan menggunakan
peringkat dosis 132,28 mg/kg BB, 264,573 mg/kg BB, dan 529,129 mg/kg BB
secara oral. Efek imunomodulator ditentukan dengan metode carbon clearance
dan neutrophil adhesion. Analisis statistik menggunakan one way ANOVA yang
dilanjutkan dengan analisis Post Hoc LSD multiple comparison. Pemberian
ekstrak etanolik daun kemangi menunjukkan peningkatan nilai indeks fagositosis
dan peningkatan jumlah neutrofil yang melekat pada serat nilon. Nilai indeks
fagositosis yang didapat dari tiap dosis ekstrak adalah 0,0268 ± 0,0165, 0,0332 ±
0,0071, dan 0,0343 ± 0,0071. Nilai neutrophil adhesion dari tiap dosis ekstrak
adalah 18,2714 ± 5,6569, 19,5930 ± 4,9507, dan 25,8580 ± 5,0383.
Kata kunci : imunomodulator, flavonoid, Ocimum basilicum, carbon clearance, neutrophil
adhesion

xvi
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

ABSTRACT
Increased activity of the immune system developed toward the use of
natural materials that contain the active compounds as immunostimulatory.
Flavonoids serve to enhance immune response and potential as antioxidants in
cancer growth. But has not been established that flavonoids contained in different
types of plants can increase the activity of the immune system. From the literature
it is known that basil (Ocimum basilicum L.) contain flavonoids. This study aims
to determine the immunomodulatory activity of ethanolic extract of basil leaf in
male mice strain Balb/c compared with controls. This research is a kind of pure
experimental research with descriptive statistical analysis. Immunomodulatory
activity of basil ethanolic extract was tested by using the rank dose of 132.28
mg/kg, 264.573 mg/kg, and 529.129 mg/kg orally. Immunomodulatory effects are
determined by carbon clearance method and the adhesion of neutrophils.
Statistical analysis using one-way ANOVA test followed by multiple comparison
LSD Post Hoc analyze. Giving basil ethanolic extract showed an increase in value
index of phagocytosis and increased number of neutrophils attached to nylon
fibers. Phagocytosis index values obtained from each dose of extract was 0.0268 ±
0.0165, 0.0332 ± 0.0071, and 0.0343 ± 0.0071. The value of each dose of
neutrophils adhesion extract is 18.2714 ± 5.6569, 19.5930 ± 4.9507, and 25.8580
± 5.0383.
Key words : immunomodulatory, flavonoid, Ocimum basilicum, carbon clearance, neutrophil
adhesion

xvii
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

BAB I
PENGANTAR

A. Latar Belakang
Pertumbuhan jaringan kanker dan mikroorganisme patogen erat
kaitannya dengan lemahnya immunologic surveillance yang dilakukan oleh sistem
imun baik selular maupun humoral pada tubuh. Salah satu penanda terjadinya
peningkatan immunologic surveillance adalah adanya peningkatan jumlah sel
leukosit (Kusmardi, 2007).
Sel leukosit merupakan salah satu sel yang berperan penting dalam
respon imun, baik berperan fungsional dalam fagositosis maupun perannya
sebagai antigen presenting cells (APC). Dalam melakukan kedua peran tersebut,
bantuan mediator endogen seperti sitokin sudah pasti dibutuhkan, sedangkan
kebutuhan akan mediator eksogen seperti eugenol dan flavonoid masih perlu
penelitian mendalam (Kusmardi, 2007).
Saat ini peningkatan aktivitas sistem imun dikembangkan ke arah
penggunaan bahan alam sebagai imunostimulator. Oleh sebab itu, segala
informasi dan mekanisme kerja senyawa aktif yang terkandung dalam bahan alam
menjadi

sangat

penting

dalam

upaya

penapisan

bahan

alam

sebagai

imunostimulator (Hargono, 1996).
Indonesia sudah terkenal sebagai negara yang kaya akan bahan alam.
Keberadaan bahan alam di Indonesia sendiri belum sepenuhnya dipergunakan
dengan sebaik mungkin oleh masyarakat. Masih banyak bahan alam yang belum

1
 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

2

diketahui fungsi dan khasiatnya bagi kesehatan tubuh. Kebanyakan masyarakat
hanya mengkonsumsi sayur-sayuran dengan pengetahuan yang terbatas saja, yaitu
untuk memenuhi kebutuhan serat. Namun di samping semua itu, ternyata setiap
tanaman memiliki khasiat lain yang mungkin dapat digunakan sebagai peningkat
kekebalan tubuh. Salah satu senyawa yang terdapat dalam tanaman yang sangat
baik untuk dikonsumsi oleh masyarakat adalah flavonoid (Kusmardi, 2007).
Flavonoid berfungsi untuk meningkatkan respon imun dan berpotensi
sebagai antioksidan pada pertumbuhan kanker. Namun belum dapat dipastikan
bahwa flavonoid yang terkandung dalam berbagai jenis tanaman bisa
meningkatkan aktivitas sistem imun (Ma’at, 2009).
Dari literatur telah diketahui bahwa kemangi (Ocimum basilicum
Linn.) mengandung senyawa flavonoid, eugenol, dan linalool. Kemangi dapat
digunakan sebagai stimulan, karminatif, antispasmodik, diuretik, demulsen,
antibakteri, dan antifungal (Khare, 2007). Kemangi yang biasanya hanya
digunakan sebagai lalapan, ternyata memiliki khasiat untuk kesehatan.
Uji untuk mengetahui efek imunomodulator biasanya menggunakan
metode carbon clearance dan neutrophil adhesion. Metode carbon clearance
digunakan untuk mengukur aktivitas eliminasi partikel karbon dari aliran darah
oleh makrofag (Ghaisas et al., 2009). Uji ini berguna untuk melihat pengaruh
ekstrak etanolik daun kemangi terhadap kemampuan fagositosis makrofag pada
partikel asing (karbon). Metode neutrophil adhesion digunakan untuk mengetahui
daya lekat dari neutrofil terhadap serat nilon yang berhubungan dengan proses
pelepasan neutrofil dalam pembuluh darah (Thakur et al., 2006).

 
 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

3

Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dan
gambaran berharga kepada masyarakat tentang seberapa besar kemampuan
ekstrak etanolik daun kemangi sebagai imunostimulator yang dibandingkan
dengan kontrol, sehingga dapat dijadikan acuan untuk penggunaan selanjutnya
dalam pemanfaatan daun kemangi sebagai obat.
1. Perumusan masalah
a. Bagaimana perbandingan nilai aktivitas fagositosis sel makrofag mencit dalam
pembersihan karbon yang diberi ekstrak etanolik daun kemangi bila
dibandingkan dengan nilai aktivitas fagositosis sel makrofag kontrol?
b. Bagaimana perbandingan jumlah neutrofil yang melekat pada serat nilon
dalam pembuluh darah mencit yang diberi ekstrak etanolik daun kemangi
dengan jumlah neutrofil yang melekat pada serat nilon dalam pembuluh darah
mencit kontrol?
2. Keaslian penelitian
Penelitian mengenai aktivitas imunomodulator ekstrak air dan etanol
daun kemangi pernah dilakukan oleh Neelam dan Nilofer (2010). Neelam dan
Nilofer menggunakan ekstrak etanolik daun kemangi dosis 400 mg/kg BB dan
ekstrak air daun kemangi dosis 400 mg/kg BB yang diekstraksi menggunakan
ekstraksi soxhlet, dan mencit albino galur Swiss sebagai hewan uji. Pada
penelitian ini, peneliti menggunakan tiga peringkat dosis ekstrak etanolik daun
kemangi (132,28 mg/kg BB, 264,573 mg/kg BB dan 529,129 mg/kg BB) dengan
maserasi sebagai proses ekstraksinya, dan mencit jantan galur balb/c sebagai
hewan uji.

 
 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

4

3. Manfaat penelitian
Secara teoritis penelitian ini dapat menambah informasi bagi ilmu
pengetahuan, khususnya dalam bidang kefarmasian mengenai penemuan manfaat
daun kemangi sebagai imunomodulator dengan metode carbon clearance dan
neutrophil adhesion. Secara praktis penelitian ini bermanfaat untuk mengetahui
seberapa besar nilai aktivitas fagositosis sel makrofag dan jumlah neutrofil yang
menempel pada serat nilon yang diberi ekstrak etanolik daun kemangi.

B. Tujuan Penelitian
Tujuan dari penelitian ini adalah :
1. Mengetahui perbandingan nilai aktivitas fagositosis sel makrofag mencit
dalam pembersihan karbon yang diberi ekstrak etanolik daun kemangi bila
dibandingkan dengan nilai aktivitas fagositosis sel makrofag kontrol.
2. Mengetahui perbandingan jumlah neutrofil yang melekat pada serat nilon
dalam pembuluh darah mencit yang diberi ekstrak etanolik daun kemangi
dengan jumlah neutrofil yang melekat pada serat nilon dalam pembuluh darah
mencit kontrol.
 
 
 
 

 
 

 

PLAGIAT
PLAGIAT MERUPAKAN
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA

A. Kemangi
1. Keterangan botani
Kemangi termasuk dalam familia Lamiaceae. Dalam bahasa inggris,
kemangi dikenal dengan nama sweet basil. Basil berasal dari kata basileus
(Yunani) yang berarti “raja” karena aroma yang berasal dari herba kemangi
(Dashputre, 2010).

2. Nama daerah
Indonesia

: Selasih

Sumatera

: Selasih, selasi

Jawa

: Solasih, selasih, telasih, kemangi

Sulawesi

: Amping, kukuru

Sunda

: Surawung

3. Morfologi
Kemangi merupakan tanaman herba tegak, sangat harum, tinggi 0,3 0,6 m. Batang keunguan dan berambut (van Steenis, 1975).
Bunga membentuk karangan semu berbunga 6 berkumpul menjadi
tandan ujung. Mahkota berbibir 2, panjang 8-9 mm dari luar, berambut, bibir atas

5
 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

6

bertaju 4, bibir bawah rata, berwarna putih (Direktorat Jenderal Pengawas Obat
dan Makanan RI, 1989).
Letak daun berhadapan, tangkai 0,5-2 cm, daun panjang dengan
cabang tulang 6-10 pada sebelah-menyebelah dari ibu tulang daun 3,5-7,5 kali
1,5-2,5 cm, karangan semu berbunga 6 berkumpul menjadi tandan ujung. Daun
pelindung elips atau bulat telur, panjang 0,5-1 cm (Tjitrosoepomo, 1994).
Tangkai dari kelopak buah tegak dan tertekan pada sumbu dari
karangan bunga, dengan ujung berbentuk kait melingkar seolah-olah duduk
dengan mulut yang terarah miring merendah. Kelopak buah 6-9 mm panjangnya.
Buah keras coklat tua, gundul, waktu dibasahi membengkak sekali, sering
ditanam. Lebih sering menjadi liar, tepi jalan dan tepi kebun (van Steenis, 1975).

4. Keanekaragaman
Ocimum basilicum L. dapat dibedakan dalam banyak bentuk, misalnya
forma citratum berbatang hijau, mahkota putih, dan berbau sereh; forma
violaceum berbatang ungu, mahkota ungu dan berbau adas (van Steenis, 1947).

5. Kandungan kimia
Daun kemangi mengandung minyak essential dengan komponen
terbesar adalah linalool (mencapai 55%), metil eter (estragol) mencapai 70% dan
eugenol; derivat asam kafeat; flavonoid. Bagian daun mengandung timol,
xanthomicrol, eskuletin, p-asam kumaran, eriodictiol 7-glucosid, dan vicenin-2
(Khare, 2007). Sineol, pinen, metil kavikol, d-kamfor, terpin hidrat, anethol, citral

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

7

(Phery, 1980), eukaliptol, borneol, geraniol, β-kariopilen, α-terpionel, 3-oktanone,
safrol, 1-epebicyclosequipellandrine, protein, karbohidrat, β-karoten, tiamin,
riboflavin, niasin, asam leusin, lisin, metionin, cistin, penilalanin, tirosin, valin,
arginin, histidin, alanin, asam aspartat, asam glutamat, glisin, prolin, serin,
kalsium, fosfor, besi, natrium, dan kalium (Duke, 1929).
OCH3

OH

  

Linalool

 

  

Eugenol

Metilkavikol

Gambar 1. Contoh Struktur Kimia Senyawa Penyusun Minyak Atsiri Kemangi
(Wagner, 1984)

6. Kegunaan
Daun kemangi berkhasiat sebagai peluruh dahak, obat batuk, peluruh
haid, pencegah mual, menambah nafsu makan, pengobatan pasca persalinan,
penurun panas, dan pereda kejang (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan
Makanan RI, 1985). Daun kemangi dapat pula digunakan untuk mengobati
selesma, encok, urat syaraf tegang, air susu tidak lancar, sariawan, panu, radang
telinga, muntah-muntah, mencuci ulcer, alkoholisme, tuli, delirium, depresi, diare,
desentri, radang usus, epilepsi, influensa, radang gastrointestinal, gonorhoe, asam
urat, gravel, dan halitosis (Duke, 1929).

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

8

Selain itu, kemangi juga berkhasiat sebagai tonik, stimulan, karminatif,
melancarkan pencernaan, obat polip nasal, obat penyakit kulit, stimulansia,
antipiretik, konstipasi, diuretik dan antiseptik (Perry, 1980), demulsen, laksatif,
pektoral, asma, empisema, rematik, mengobati iritasi pada kulit, dan antidotum
dari racun serangga atau gigitan ular berbisa (Lawless, 1995).
Dari penelitian Neelam dan Nilofer (2010) menyebutkan bahwa nilai
neutrophil adhesion ekstrak air daun kemangi (dosis 400 mg/kg BB) adalah 45,02
± 1,01 dan nilai neutrophil adhesion ekstrak etanolik daun kemangi (dosis 400
mg/kg BB) adalah 46,26 ± 0,34. Hasil indeks fagositosis yang didapat dari ekstrak
air daun kemangi (dosis 400 mg/kg BB) adalah 0,010 ± 0,0008 dan indeks
fagositosis ekstrak etanolik daun kemangi (dosis 400 mg/kg BB) adalah 0,082 ±
0,0009 (Dashputre, 2010).

B. Flavonoid
Senyawa flavonoida adalah suatu kelompok senyawa fenol terbesar
yang ditemukan di alam. Senyawa-senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu
dan biru dan sebagai zat warna kuning yang ditemukan dalam tumbuh-tumbuhan
(Leny, 2006).
Flavonoida mempunyai kerangka dasar karbon yang terdiri dari 15
atom karbon, dimana dua cincin benzene (C6) terikat pada suatu rantai propana
(C3) sehingga membentuk suatu susunan C6-C3-C6. Susunan ini dapat
menghasilkan tiga jenis struktur senyawa flavonoida, yaitu flavonoida,
isoflavonoida dan neoflavonoida.

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

a

b

9

c

Gambar 2. Struktur Senyawa Flavonoida
a. Flavonoida
b. Isoflavonoida
c. Neoflavonoida

Senyawa-senyawa flavonoid terdiri dari beberapa jenis tergantung
pada tingkat oksidasi dari rantai propane dari sistem 1,3-diarilpropana. Flavon,
flavonol dan antosianidin adalah jenis yang banyak ditemukan di alam sehingga
sering disebut sebagai flavonoida utama. Senyawa-senyawa isoflavonoida dan
neoflavonoida hanya ditemukan dalam beberapa jenis tumbuhan, terutama suku
Leguminosae (Lenny, 2006).
Aglikon flavonoid adalah polifenol, sehingga mempunyai sifat kimia
senyawa fenol, yaitu bersifat agak asam maka dapat larut dalam basa. Karena
mempunyai sejumlah gugus hidroksil yang tidak bersulih atau suatu gula
flavonoid merupakan senyawa polar, maka umumnya flavonoid larut dalam
pelarut seperti etanol, metanol, butanol, dan air. Adanya gula yang terikat pada
flavonoid cenderung menyebabkan flavonoid lebih mudah larut dalam air dan
dengan demikian campuran pelarut di atas dengan air merupakan pelarut yang
lebih baik untuk glikosida flavonoid. Sebaliknya, aglikon yang kurang polar
seperti isoflavon, flavonon, dan flavon serta flavonol yang termetoksilasi

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

10

cenderung lebih mudah larut dalam pelarut seperti eter dan kloroform (Markham,
1982).
Menurut Ma’at (2009), flavonoid sebagai imunomodulator bekerja
pada sel-sel tubuh yang menjadi bagian dari sistem imun. Caranya dengan
mengirimkan sinyal intraseluler pada reseptor sel, sehingga sel bekerja lebih
optimal. Jika sistem imun dalam sel berfungsi memakan bakteri (fagosit), maka
nafsu makan seseorang menjadi bertambah. Jika fungsinya mengeluarkan
mediator yang menambah ketahanan tubuh, hasil pengeluarannya akan lebih baik.
Atau jika kerjanya mengurai sel lain, proses urainya berlangsung mulus.
Kandungan flavonoid pada umumnya dapat dideteksi dengan
kromatografi kertas. Kromatografi lapis tipis dapat digunakan sebagai pengganti
kromatografi kertas dengan menggunakan selulosa sebagai penyerap. Cairan
pengembang yang digunakan adalah Forestal, BAA (n-butanol-asam asetat-air),
atau asam asetat dengan konsentrasi tertentu (Harborne, 1984).

C. Penyarian
Metode dasar penyarian adalah infundasi, maserasi, perkolasi dan
penyarian berkesinambungan. Pemilihan keempat metode tersebut disesuaikan
dengan kepentingan dalam memperoleh sari yang baik (Direktorat Jenderal
Pengawas Obat dan Makanan RI, 1986).
Infundasi merupakan salah satu proses penyarian yang umumnya
digunakan untuk menyari zat aktif yang larut dalam air berasal dari bahan nabati.
Penyarian dengan cara infundasi menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

11

tercemar oleh kapang dan jamur. Oleh sebab itu, sari yang didapat dengan cara
infundasi tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam. Infusa dibuat dengan menyari
simplisia dengan air pada suhu 90oC selama 15 menit. Penyaringan dilakukan
pada saat cairan masih panas, kecuali bila bahan yang mengandung senyawa yang
mudah menguap (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan RI, 1986).
Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana. Maserasi
dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cawan penyari. Cairan
penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang
mengandung zat aktif. Zat aktif akan larut karena adanya perbedaan konsentrasi
antara zat aktif di dalam sel dengan di luar sel, maka larutan yang terpekat akan
didesak keluar. Peristiwa ini terjadi berulang-ulang sehingga terjadi keseimbangan
konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam sel (Direktorat Jenderal
Pengawas Obat dan Makanan RI, 1986).
Maserasi dilakukan selama 4-10 hari. Persyaratan dari maserasi adalah
rendaman simplisia dalam cairan penyari harus dikocok berulang-ulang (kira-kira
3 kali sehari). Dengan upaya ini dapat dijamin keseimbangan konsentrasi akan
segera dicapai. Apabila selama proses maserasi tidak dikocok maka akan
menyebabkan penurunan perpindahan zat aktif (Voigt, 1984).
Keuntungan penyarian dengan cara maserasi adalah cara pengerjaan
dan peralatan yang digunakan relatif sederhana dan mudah diusahakan.
Kerugiannya adalah pengerjaannya lama dan penyariannya kurang sempurna
(Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan RI, 1986).

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

12

Perkolasi adalah cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan
cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi (Direktorat Jenderal
Pengawas Obat dan Makanan RI, 1986). Perkolasi dilakukan dalam wadah
berbentuk silindris atau kerucut, yang memiliki jalan masuk dan keluar yang
sesuai (Voigt, 1984).
Prinsip perkolasi adalah, serbuk simplisia ditempatkan dalam suatu
bejana silinder, yang bagian bawahnya diberi sekat berpori. Cairan penyari
dialirkan dari atas ke bawah melalui serbuk. Cairan penyari akan melarutkan zat
aktif yang dilalui sampai mencapai keadaan jenuh. Gerak ke bawah disebabkan
oleh kekuatan gaya beratnya sendiri dan cairan di atasnya, dikurangi dengan daya
kapiler yang cenderung untuk menahan (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan
Makanan RI, 1986).
Penyarian berkesinambungan adalah proses untuk menghasilkan
ekstrak cair, yang dilanjutkan dengan proses penguapan. Prinsip penyarian
berkesinambungan adalah cairan penyari diisikan pada labu, serbuk simplisia
diisikan pada tabung yang terbuat dari kertas saring. Cairan penyari dipanaskan
hingga mendidih, uap penyari akan naik ke atas melalui serbuk simplisia. Setelah
melalui pendingin balik, uap penyari mengembun dan turun melalui serbuk
simplisia sambil melarutkan zat aktif dan kembali ke labu. Cairan akan menguap
kembali berulang-ulang seperti proses di atas (Direktorat Jenderal Pengawas Obat
dan Makanan RI, 1986).

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

13

D. Sistem Imun
Sistem imun adalah sistem rumit yang melindungi tubuh terhadap
invasi

organisme

patogen

seperti

mikroorganisme

(fungsi

pertahanan),

mengidentifikasi dan menghancurkan sel-sel tubuh sendiri yang bermutasi dan
berpotensi menjadi neoplasma (fungsi surveillance) dan membersihkan sisa sel
dan zat buangan sehingga tipe sel tetap seragam dan tidak berubah (fungsi
homeostasis) (Johnson, 1993).
Pada makhluk tingkat tinggi seperti hewan vertebrata dan manusia,
terdapat dua sistem pertahanan (imunitas), yaitu imunitas nonspesifik (innate
immunity) dan imunitas spesifik (adaptive imunity).
1. Imunitas nonspesifik
Merupakan mekanisme pertahanan terdepan yang meliputi komponen
fisik berupa keutuhan kulit dan mukosa; komponen biokimiawi seperti asam
lambung, lisozim, komplemen; dan komponen seluler nonspesifik seperti neutrofil
dan makrofag. Neutrofil dan makrofag melakukan fagositosis terhadap benda
asing dan memproduksi berbagai mediator untuk menarik sel-sel inflamasi lain di
daerah infeksi. Selanjutnya, benda asing akan dihancurkan dengan mekanisme
inflamasi (Widianto, 1987).
Makrofag terdistribusi di berbagai jaringan dan sinus cavity, seperti
paru-paru (alveolar), otak (microglial), ginjal (mesangial), tulang (osteoclast),
hati (kupffer), limpa dan lymphnode (marginal) sebagai sel bebas dan tetap. Sel ini
telah diketahui sebagai penjerat partikel asing. Makrofag mempunyai waktu hidup
yang panjang dan fagosit aktif dengan granula lisosom yang berkembang baik

 

14

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

untuk degranulasi dan eliminasi sebagai bagian dari mekanisme proteksi terhadap
infeksi. Makrofag juga mampu memproses atau merusak antigen menjadi bagian
yang lebih kecil yang kemudian akan kembali ke permukaannya sendiri serta
sekitar sel retikular dan limfosit. Makrofag atau permukaan sel retikular yang
mengikat antigen sangat imunogenik dan imunogenisitas dapat dihilangkan
dengan perlakuan agen pengkhelat seperti EDTA atau tripsin (Dasgupta, 1992).
Neutrofil atau leukosit polimorfonuklear (PMN) adalah leukosit yang
paling sering dalam darah tepi manusia normal, sekitar 40-60% dari seluruh
leukosit dalam darah. Satu milimeter kubik darah mengandung sekitar 4500
neutrofil. Diameter neutrofil 12-15 µm. Inti mempunyai tiga sampai lima lobi,
heterokromatin yang besar dan tidak mengandung anak inti. Sitoplasma agak
asidofil dan mengandung dua jenis granula (Johnson, 1993).
Granulanya mengandung bermacam enzim, seperti protein dan
glikosaminoglikan yang berperan pada fungsi sel. Neutrofil sangat diperlukan
untuk pertahanan tubuh sebagai fagosit dan proses pemusnahan patogen di
jaringan (Akib, 2008). Bakteri dapat difagosit setelah opsonisasi. Bakteri
melepaskan

kemoatraktif

yang

menyebabkan

neutrofil

kemotaksis

dan

merangsang perlekatan neutrofil pada bakteri. Komponen komplemen adalah
kemoatraktif neutrofil yang dilepaskan selama peradangan. Mula-mula neutrofil
melekat pada bakteri dan kemudian memasukkannya dalam suatu fagosom yang
dibatasi membran. Fagosom melebur dengan granula sekunder dan kemudian
granula primer untuk membentuk fagolisosom (Johnson, 1993).

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

15

Bila bakteri menyerang tubuh, sumsum tulang dirangsang untuk
menghasilkan dan mengeluarkan neutrofil dalam jumlah besar. Ketika memasuki
jaringan neutrofil sudah merupakan sel-sel yang matang. Sewaktu mendekati
partikel yang akan difagositosis, sel-sel neutrofil mula-mula melekat pada reseptor
yang terdapat pada partikel itu kemudian menonjolkan pseudopodia ke semua
jurusan di sekeliling partikel tersebut dan pseudopodia itu akan saling bertemu
satu sama lain pada sisi yang berlawanan dan akan bergabung sehingga terjadi
ruang tertutup yang berisi partikel-partikel yang sudah difagositosis. Kemudian
ruang ini akan berinvaginasi kedalam rongga sitoplasma dan akan melepaskan diri
dari bagian luar membran sel membentuk gelembung fagositik (vesikel fagositik)
yang mengapung dengan bebas disebut sebagai fagosom dalam sitoplasma.
Selanjutnya akan terjadi proses pencernaan enzimatik pada partikel
yang telah terfagositosit oleh makrofag yang dilakukan oleh lisosom. Lisosom
akan bersentuhan dengan vesikel fagositik dan membrannya menjadi satu dengan
gelembung tadi. Selanjutnya akan membuang banyak enzim pencernaan dari
lisosom masuk kedalam gelembung. Jadi gelembung fagositik ini akan berubah
menjadi gelembung pencernaan sehingga dimulailah proses pencernaan partikel
yang telah terfagositosis. Neutrofil dan makrofag banyak mengandung lisosom
yang berisi enzim proteolitik untuk mencernakan bakteri dan bahan-bahan protein
asing lain. Bila enzim lisosomal gagal membunuh kuman maka agen bakterisid
yang akan membunuh kuman atau bakteri tersebut.
Bila antigen terlalu besar atau terlalu banyak terdapat antigen disekitar
sel maka fagositosis oleh makrofag diaktifkan karena makrofag mempunyai

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

16

kemampuan untuk memfagositosis jaringan nekrotik dan bahkan sel neutrofil
yang sudah mati sewaktu menderita infeksi kronis atau peradangan. Makrofag
akan menelan dan membunuh kuman melalui proses yang sama seperti neutrofil.
Sistem imun non spesifik Natural Killer Cell (NKC) akan ikut
diaktifkan pada proses peradangan, dimana NKC akan bermigrasi ke tempat
proses peradangan. NKC adalah sel pembunuh alamiah yang merupakan limfosit
besar dan disebut juga dengan limfosit non-T dan limfosit non-B. Sel ini
membunuh virus dan memiliki reseptor Fc yang memungkinkan membunuh virus
berselubung antibodi serta dapat menghancurkan sel yang telah mengalami
transformasi maligna tanpa membutuhkan sensitisasi terlebih dahulu dan tanpa
melibatkan antigen histokompatibel utama (Handayani, 2009).
2. Imunitas spesifik
Memiliki karakterisasi khusus antara lain kemampuannya untuk
bereaksi secara spesifik dengan antigen tertentu; kemampuan membedakan
antigen asing dengan antigen sendiri (nonself terhadap self); dan kemampuan
untuk bereaksi lebih cepat dan lebih efisien terhadap antigen yang sudah dikenal
sebelumnya. Respon imun spesifik ini terdiri dari dua sistem imun, yaitu imunitas
seluler dan imunitas humoral. Imunitas seluler melibatkan sel limfosit T,
sedangkan imunitas humoral melibatkan limfosit B dan sel plasma yang berfungsi
memproduksi antibodi. Aktivitas respon imun spesifik memerlukan partisipasi
kelompok sel yang disebut sebagai Antigen Presenting Cell (APC) (Widianto,
1987).

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

17

E. Imunomodulator
Imunomodulator adalah senyawa tertentu yang dapat meningkatkan
mekanisme pertahanan tubuh baik secara spesifik maupun non spesifik. Yang
terutama terjadi adalah induksi non spesifik baik mekanisme pertahanan seluler
maupun humoral. Pertahanan non spesifik terhadap antigen ini disebut
paramunitas, dan zat bersangkutan disebut penginduksi paraimunitas. Induktor
semacam ini biasanya tidak atau sedikit sekali kerja antigennya, malahan sebagian
bekerja sebagai mitogen, yaitu menaikkan proliferasi sel yang berperan pada
imunitas. Sel tujuan adalah makrofag, granulosit, limfosit T dan B; karena
induktor paraimunitas ini terutama menstimulasi mekanisme pertahanan seluler.
Mitogen ini dapat bekerja langsung maupun tak langsung (misalnya melalui
sistem komplemen atau limfosit, melalui produksi interferon atau enzim
lisosomal) untuk meningkatkan fagositosis mikro dan makro. Mekanisme
pertahanan spesifik maupun non spesifik umumnya saling berpengaruh. Dalam
hal ini pengaruh pada beberapa sistem pertahanan mungkin terjadi, hingga
mempersulit penggunaan imunomodulator ini dalam praktek (Widianto, 1987).
Metode uji aktivitas imunomodulator yang dapat digunakan adalah :
1. Metode bersihan karbon (“Carbon-Clearance”)
Pengukuran secara spektrofotometrik laju eliminasi partikel karbon dari darah
hewan. Ini merupakan ukuran aktivitas fagositosis.

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

18

2. Uji granulosit
Percobaan in vitro dengan mengukur jumlah sel ragi atau bakteri yang
difagositir oleh fraksi granulosit yang diperoleh dari serum manusia.
Percobaan ini dilakukan di bawah mikroskop.
3. Bioluminisensi radikal
Jumlah radikal O2 yang dibebaskan akibat kontak mitogen dengan granulosit
atau makrofag, merupakan ukuran besarnya stimulasi yang dicapai.
4. Uji transformasi limfosit T
Suatu populasi limfosit T diinkubasi dengan suatu mitogen. Timidin bertanda
(3H) akan masuk ke dalam asam nukleat limfosit 1. Dengan mengukur laju
pembentukan dapat ditentukan besarnya stimulasi dibandingkan dengan
fitohemaglutinin A (PHA) atau konkanavalin A (Con A) (Widianto, 1987).
Beberapa imunomodulator yang sudah diteliti antara lain ekstrak organ
atau darah (misal dari timus dan limpa, ekstrak embrio); ekstrak bakteri dan jamur
(misal lipopolisakarida); endotoksin; ribosom bakteri; ekstrak tanaman; dekstran;
hormon dan senyawa yang mirip hormon; lipida; protein dan hasil urai protein;
senyawa anorganik; racun dari hewan) (Widianto, 1987).
Beberapa tanaman yang sering digunakan untuk maksud ini antara
lain: Chamomilla recutita, Arnica montana, Baptisia tinctoria, Mangifera indica,
Aconitum napelus, Eupatorium perfoliatum, Solanum nigrum, dan lain-lain
(Widianto, 1987).

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

19

Imunomodulator terbagi menjadi dua, yaitu :
1. Imunosupresan
Kelompok obat yang digunakan untuk menekan respon imun seperti pencegah
penolakan transplantasi, mengatasi penyakit autoimun dan mencegah
hemolisis rhesus pada neonatus. Sebagian dari kelompok ini bersifat sitotoksis
dan digunakan sebagai antikanker (Widianto, 1987).
2. Imunostimulan
Imunostimulan ditunjukkan untuk perbaikan fungsi imun pada kondisi-kondisi
imunosupresi. Kelompok obat ini dapat mempengaruhi respon imun seluler
maupun humoral. Kelemahan obat ini adalah efeknya menyeluruh dan tidak
bersifat spesifik untuk jenis sel atau antibodi tertentu. Selain itu efek
umumnya lemah. Indikasi imunostimulan antara lain AIDS, infeksi kronik,
dan keganasan terutama yang melibatkan sistem limfatik (Widianto, 1987).

F. Metode Carbon Clearance
Metode bersihan karbon (Carbon Clearance) merupakan pengukuran
secara spektrofluorometrik laju eliminasi partikel karbon dari darah hewan. Ini
merupakan ukuran aktivitas fagositosis (Widianto, 1987).
Aktivitas fagositosis sistem retikuloendotelial diukur dari kecepatan
perpindahan partikel karbon dari aliran darah. Peningkatan indeks pembersihan
karbon merefleksikan perbaikan fungsi fagositik dari makrofag mononuklear dan
imunitas non spesifik. Fagositosis oleh makrofag penting terhadap parasit kecil
dan keefektifannya ditandai dengan peningkatan opsonisasi parasit dengan

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

20

antibodi dan C3b komplemen, memulai kecepatan pembersihan yang lain untuk
parasit dari darah (Ghaisas et al., 2009).
Uji carbon clearance dilakukan untuk mengevaluasi efek obat pada
sistem retikuloendotelial. Sistem retikuloendotelial (RES) adalah suatu sistem
difusi yang terdiri dari sel fagositik. Sel RES mempunyai peranan penting pada
pembersihan partikel dari aliran darah. Ketika partikel koloid karbon yang berupa
tinta diinjeksi masuk ke dalam sirkulasi sistemik, kecepatan pembersihan karbon
dari darah oleh makrofag ditunjukkan dengan suatu persamaan aljabar (Gokhale et
al., 2003).
Indeks fagositosis dihitung menggunakan rumus sebagai berikut :
        

 (1) 

Dimana OD1 dan OD2 adalah kerapatan optik pada t1 dan t2 secara
berturut-turut. OD1 didapat dari perhitungan anti log absorbansi tinta karbon
dalam darah mencit yang diukur pada menit ke-0. OD2 didapat dari perhitungan
anti log absorbansi tinta karbon dalam darah mencit yang diukur pada menit ke-15
(Ghaisas et al., 2009). 

G. Metode Neutrophil Adhesion
Metode neutrophil adhesion digunakan untuk mengevaluasi efek dari
ekstrak pada penempelan neutrofil. Uji ini mengindikasikan marginalisasi sel
fagositik pada pembuluh darah. Peningkatan persen neutrophil adhesion adalah
sifat marginalisasi sel fagositik, contohnya meningkatnya respon pertahanan di
bawah keadaan normal (Thakur et al., 2006).

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

21

Ketika sampel darah diinkubasi dengan serat nilon, pengurangan
persentase neutrofil karena penempelan neutrofil pada serat nilon dihitung.
Penempelan neutrofil pada serat nilon menggambarkan perpindahan sel dari
pembuluh darah dan sejumlah neutrofil mencapai sisi inflamasi (Ismail, 2009).
Persen neutrophil adhesion dihitung dengan menggunakan rumus
sebagai berikut :
                     (2)

NIu didapat dari perkalian antara jumlah neutrofil dan TLC sebelum
diinkubasi dengan serat nilon, sedangkan NIt didapat dari perkalian antara jumlah
neutrofil dan TLC sesudah inkubasi dengan serat nilon (Ghaisas et al., 2009).

H. Imboost®
Imboost® sirup adalah produksi SOHO. Tiap ml mengandung
Echinacea Dry Extract 250 mg dan Zinc Picolinate 5 mg. Indikasi terapi suportif
untuk menstimulasi sistem imun terhadap infeksi akut, kronis, atau kambuhan
terutama infeksi saluran nafas dan genitalia seperti kandidiasis dan vaginitis.
Echinacea

sudah

diketahui

berfungsi

sebagai

imunostimulan

dengan

mempengaruhi sistem imun non spesifik. Pemberian Echinacea memodulasi
sistem imun tubuh, menghambat enzim hyaluronidase yang berfungsi untuk
mencegah

penyebaran

infeksi,

menghambat

enzim

siklooksigenase

dan

lipooksigenase sebagai antiinflamasi, dan mengaktivasi fibroblast yang salah satu
fungsinya adalah untuk mempercepat penyembuhan luka (Sarmoko, 2009).

 

 
PLAGIAT
MERUPAKAN
PLAGIAT
MERUPAKAN TINDAKAN
TINDAKAN TIDAK
TIDAK TERPUJI
TERPUJI

22

I. Landasan Teori
Penyakit kanker yang semakin banyak terjadi dikarenakan sistem imun
yang kurang baik. Maka dari itu, diperlukan adanya senyawa yang dapat
meningkatkan sistem imun tubuh manusia atau yang disebut dengan
imunomodulator.

Salah

satu

senyawa

yang

dapat

digunakan

sebagai

imunomodulator adalah flavonoid. Sampai saat ini belum ada penelitian mengenai
aktivitas imunomodulator dari kemangi yang mengandung senyawa flavonoid.
Penelitian ini dilakukan untuk meneliti adanya daya imunomodulator dari
kemangi yang biasanya hanya digunakan sebagai lalapan.
Uji bersihan karbon (Carbon Clearance) digunakan untuk mengetahui
kecepatan aliran pembersihan karbon dalam aliran