Gambar 6. Menghitung besarnya tailing factor pada kromatogram
2.5.5 Komponen Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Sistem KCKT sederhana terdiri dari wadah fase gerak, pompa bertekanan tinggi, injektor, kolom, detektor, dan perekam. Gambar ilustrasi dapat dilihat pada
gambar 5 McMaster, 2007.
Gambar 7. Sistem KCKT isokratik
2.5.5.1 Wadah fase gerak
Wadah fase gerak terbuat dari bahan yang inert terhadap fase gerak. Bahan yang umum digunakan adalah gelas dan baja anti karat. Pelarut yang digunakan harus
bebas dari partikel debu dan partikel padat. Pelarut seharusnya disaring dengan
Universitas Sumatera Utara
penyaring mikrometer sebelum digunakan pada sistem KCKT. Degassing digunakan untuk menghilangkan gas terlarut dalam fase gerak dan menghilangkan
gas terlarut dalam fase gerak dan mengurangi kemungkinan gelembung yang terbentuk pada pompa atau detektor selama proses pemisahan Putra, 2007.
Fase gerak atau eluen biasanya terdiri atas campuran pelarut yang dapat bercampur yang secara keseluruhan berperan dalam daya elusi dan resolusi. Untuk
fase normal fase diam lebih polar daripada fase gerak, kemampuan eluasi meningkat dengan meningkatnya polaritas pelarut. Sementara untuk fase terbalik
fase diam kurang polar daripada fase gerak, kemampuan eluasi menurun dengan meningkatnya polaritas pelarut Rohman, 2007.
Menurut Johnson dan Stevenson 1991, fase gerak haruslah: a.
Murni, tanpa cemaran. b.
Tidak bereaksi dengan kemasan. c.
Sesuai dengan detektor. d.
Dapat melarutkan cuplikan. e.
Mempunyai viskositas rendah. f.
Memungkinkan memperoleh kembali cuplikan dengan mudah, jika diperlukan.
g. Harganya wajar.
2.5.5.2 Pompa
Pompa yang cocok digunakan untuk KCKT adalah pompa yang mempunyai syarat sebagaimana syarat wadah pelarut yakni pompa harus inert terhadap fase
gerak. Bahan yang umum dipakai adalah gelas, baja tahan karat, teflon, dan batu
Universitas Sumatera Utara
nilam. Tujuan penggunaan pompa atau sistem penghantaran fase gerak adalah untukmenjamin proses penghantaran fase gerak berlangsung secara tepat,
reproduksibel, konstan, dan bebas dari gangguan. Ada dua jenis pompa dalam KCKT yaitu pompa dengan tekanan konstan, dan pompa dengan aliran fase gerak
yang konstan. Tipe pompa dengan aliran fase gerak yang konstan sejauh ini lebih umum dibandingkan dengan pompa dengan tekanan tetap Rohman, 2007.
2.5.5.3 Injektor