3.4 Bagan Skrining Fitokimia
- Ekstraksi Maserasi dengan Pelarut Metanol
serbuk daun tumbuhan jambu biji Psidium guajava
L. Diekstraksi maserasi dengan metanol
Disaring Dipekatkan
Dibagi kedalam 4 tabung reaksi
Tabung I Tabung II
Tabung III Tabung IV
Ditambahkan pereaksi
FeCl
3
5
Larutan hitam Ditambahkan
pereaksi NaOH 10
Diamati perubahan
warna Larutan hijau kekuningan
Ditambahkan pereaksi
Mg-HCl Diamati
perubahan warna
Larutan merah muda Ditambahkan
pereaksi H
2
SO
4p
Diamati perubahan
warna Larutan orange
kekuningan Positif
Flavonoida Negatif
Flavonoida Positif
Flavonoida Positif
Flavonoida Diamati
perubahan warna
Universitas Sumatera Utara
- Ekstraksi Maserasi dengan Pelarut Etil Asetat
serbuk daun tumbuhan jambu biji Psidium guajava L.
Diekstraksi maserasi dengan etil asetat Disaring
Dipekatkan Dibagi kedalam 2 tabung reaksi
Tabung I Tabung II
Ditambahkan pereaksi
FeCl
3
5
Larutan hitam Ditambahkan
pereaksi H
2
SO
4p
Diamati perubahan
warna Larutan orange
kekuningan Positif
Flavonoida Positif
Flavonoida Diamati
perubahan warna
Universitas Sumatera Utara
3.5 Bagan Penelitian
750 gram serbuk daun tumbuhan jambu biji Psidium guajava L.
diskrining fitokimia dimaserasi dengan metanol sebanyak 5 L
didiamkan selama ± 24 jam dilakukan sebanyak 3 kali
disaring Ekstrak metanol
Residu diskrining fitokimia
Ekstrak pekat metanol diuapkan hingga semua metanol menguap
dilarutkan dengan etil asetat disaring
Ekstrak etil asetat Endapan
diskrining fitokimia dipekatkan dengan rotarievaporator
Ekstrak pekat etil asetat diuapkan hingga semua etil asetat menguap
dilarutkan dengan metanol diekstraksi partisi dengan n-heksana sampai bening
Lapisan metanol Lapisan n-heksana
diskrining fitokimia dipekatkan dengan rotarievaporator
diuapkan hingga pekat dilakukan uji kandungan gula dengan pereaksi Benedict sambil dipanaskan +
dihidrolisis dengan HCl 6 sambil dipanaskan selama 45 menit didinginkan
disaring Ekstrak metanol asam
Residu diekstraksi partisi dengan kloroform sebanyak 3 kali
Lapisan kloroform Lapisan metanol asam
dipekatkan Ekstrak pekat kloroform
dipekatkan dengan rotarievaporator
diskrining fitokimia Diskrining
fitokimia Hasil
Universitas Sumatera Utara
Lanjutan
Ekstrak pekat kloroform diskrining fitokimia
diuji Kromatografi Lapis Tipis untuk mengetahui eluen yang sesuai dikolom kromatografi dengan fasa diam silika gel dan fasa gerak eluen n-heksana:etil asetat 90:10;
80:20; 70:30; 60:40;50:50vv ditampung tiap fraksi sebanyak ± 12 mL dalam botol vial
digabung fraksi dengan Rf yang sama diuji Kromatografi Lapis Tipis
Fraksi 22-24 90:10 Fraksi 25-4780:20 Fraksi 48-69 70:30 Fraksi 70-90 60:40 diuji FeCl
3
5 diuji FeCl
3
5 diuji FeCl
3
5 diuji FeCl
3
5 Hasil positif
Hasil positif Hasil positif
Hasil positif dianalisis Kromatografi Lapis Tipis
dipreparatif dengan eluen n-heksan:etil asetat 80:20 vv dikeringkan
disinari di bawah lampu UV digerus dari plat
dilarutkan dengan campuran metanol:etil asetat 1:1 disaring
Senyawa murni dianalisis Kromatografi Lapis Tipis
diuapkan dianalisis dengan
spektrofotometer UV-Vis, spektrofotometer Inframerah FT-IR,
spektrometer
1
H-NMR Hasil Analisis
Fraksi 91-11250:50
diuji FeCl
3
5 Hasil positif
Universitas Sumatera Utara
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Peneltian
Dari hasil skrining pendahuluan terhadap ekstrak metanol dan etil asetat dari daun tumbuhan jambu biji Psidium guajava L. dengan adanya penambahan pereaksi-
pereaksi warna untuk menentukan golongan senyawa kimia yang dikandung dengan menggunakan pereaksi flavonoida ternyata sampel positif mengandung
flavonoida.
Hasil elusi dari perbandingan pelarut n-heksana:etil asetat antara 80:20 vv pada fraksi 25-47, dilakukan KLT preparatif dengan eluen n-heksana : etil
asetat 80:20 vv untuk mendapatkan senyawa murni. Sehingga diperoleh senya- wa murni berupa pasta berwarna kuning kecoklatan, seberat 12 mg, dan nilai Rf=
0,38. Spektrum UV-Visible senyawa hasil isolasi dengan menggunakan pelarut metanol memberikan panjang gelombang maksimum 204 nm dan 330 nm,
ditunjukkan pada gambar 4.1 dibawah ini : Gambar 4.1 Spektrum UV-VISIBLE Senyawa Hasil Isolasi
Universitas Sumatera Utara