V. SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan
Simpulan dari pembahasan hasil penelitian yang telah dilakukan adalah sebagai berikut:
1. Bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dapat memproduksi
enzim lipase pada kondisi optimum fermentasi yaitu pH 7, suhu 35ºC dan waktu inkubasi 48 jam. Pada kondisi ini diperoleh aktivitas unit tertinggi
yaitu 3,333 UmL. 2.
Aktivitas spesifik enzim hasil pemurnian sebesar 520,000 Umg,
meningkat kemurniannya 9,2 kali dibandingkan ekstrak kasar enzim dengan aktivitas spesifik sebesar 56,491
Umg. 3.
Enzim lipase amobil mampu digunakan sebanyak lima kali pemakaian berulang dengan aktivitas katalitik tersisa 14 dan efektif pada
pengulangan yang ke-3 dengan aktivitas katalitik tersisa 43. 4.
Data kinetika enzim lipase hasil pemurnian K
M
86,177 mgmL
-1
substrat dan V
maks
35,714 μmol mL
-1
menit
-1
dan enzim lipase hasil amobilisasi K
M
4,742 mgmL
-1
substrat dan V
maks
4,854 μmol mL
-1
menit
-1
. Enzim lipase hasil amobilisasi memiliki afinitas yang lebih tinggi terhadap
substrat dibandingkan enzim lipase hasil pemurnian.
5. Enzim lipase hasil pemurnian dan hasil amobilisasi mempunyai suhu
optimum yang sama yaitu suhu 35ºC. 6.
Aktivitas katalitik Enzim lipase hasil pemurnian pada suhu 60ºC tersisa 24,865 sedangkan enzim amobil memiliki aktivitas katalitik tersisa
39,997, hal ini menunjukkan bahwa enzim amobil lebih stabil dibandingkan enzim hasil pemurnian.
7. Stabilitas termal enzim lipase pada suhu dan pH optimum selama 60
menit dengan interval waktu 10 menit didapatkan : a.
Enzim lipase hasil pemurnian memiliki aktivitas katalitik tersisa sebesar 24,24, nilai k
i
= 0,023 menit
-1
, t
12
= 30,130 menit, dan
∆G
i
= 95,669 kJ mol
-1
. b.
Enzim lipase hasil amobilisasi memiliki aktivitas katalitik tersisa sebesar 30,12, nilai k
i
= 0,018 menit
-1
, t
12
= 38,50 menit, dan
∆G
i
= 96,296 kJ mol
-1
. 8.
Dengan penurunan nilai k
i
, peningkatan waktu paruh t
12
dan peningkatan ∆G
i
menunjukkan amobilisasi enzim lipase menggunakan matriks bentonit dapat meningkatkan kestabilan enzim dibandingkan
dengan enzim tanpa amobilisasi.
B. Saran
Untuk lebih meningkatkan kemurnian enzim lipase disarankan menggunakan metode pemurnian antara lain dengan Kromatografi ataupun
Elektroforesis dan menggunakan matrik yang efektif lainnya untuk lebih meningkatkan stabilitas enzim lipase.
DAFTAR PUSTAKA
Adel, F. dan H. Haerudin. 2003, Pembuatan Dan Karakterisasi Katalis Oksida
Mangan Dengan Pendukung Bentonit Berpilar Alumina Untuk Oksidasi Gas CO, Prosiding Pertemuan Ilmiah Ilmu Pengetahuan dan Teknologi
Bahan, BATAN.
Agustien, A. dan E. Munir. 1997. Purifikasi penisilin asilase dari Bacillus. Prosiding Seminar Wawasan Keilmuan Untuk Meningkatkan Kualitas
Pembangunan Bangsa Indonesia. Malaysia. PPI Universitas Sains Malaysia. 270-177.
Ahern, T.J. and A.M. Klibanov. 1987. Why do enzyme irreversibly inactive at high temperature. Biotec 1. Microbial Genetic Engineering and Enzyme
Technology. Journal. Gustav Fischer. Stuttgart. New York. Arbianto, P. 1989. Biokimia Konsep-konsep Dasar. Departemen Pendidikan dan
Kebudayaan Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Jakarta. 222-225 Ariesta, R. 2009. Amobilisasi Enzim Lipase dari Mucor meichei menggunakan
Matriks Polietilen. Skripsi. Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Brawijaya
August, E. 2000. Kajian Penggunaan Lipase Amobil dari Aspergillus Niger pada Pembuatan Monoasilgliserol yang bersifat Antibakteri dari Minyak
Kelapa. Journal. Bogor: Institut Pertanian Bogor. Benattouche, Z. and B. Abbouni. 2011. Production, optimization and
characterization of the lipase from Pseudomonas aeruginosa, Department of biology, faculty of science, Mascara University, 290-Algeria.
Bornscheuer, U.T. 1995. Lipase-Catalyzed Synthesis of Monoacylglycerols. Enzyme and Microbial Technology. 578-586
Boyd, R.F. 1995. Basic Medical Microbiology. USA: Lippincott Williams Wilkins. 666-671.
Chaplin, M.F and C. Bucke, 2004, Enzyme Technology Cambridge University Press, Cambridge, Great Britain. 378-380.
Cheetam, D.A. 1992, Solid State Compound, Oxford university press, 234-237
Christakopoulos, P., Constantina Tzia, Dimitris Kekos, and basil J. Macris, 1992, Production and characterization of extracellular lipase from Calvatia
gigantea, Appl Microbiol Biotecnol, 194-197 Cool, P and E.F. Vanssant, Pillared , 1988, Clays : Preparation, Characterization
and application, Molecular Sieves, Journal. Springer,. Crueger, W. and A. Crueger. 1984. Biotechnology. A Textbook of Indrustrial
Microbiology. Broch. T. D.,editor Science Tech. Inc. Madison. USA. 178- 180, 202-206.
Damaso, M. P. 2008. Utilization Of Agroindustrial Residues for LipaseProduction By Solid-State Fermentation. Brazilian Journal of Microbiology. 676-681.
Datasena, IGB. 2005. Isolasi dan Karakterisasi Enzim Lipase dari Bakteri Isolat Lokal, Skripsi, FMIPA, Universitas Lampung.
Deepali BHIST, S.K. Yadaf. N.S. Darmwal. 2012. Optimization of immobilization conditions by conventional and statistical strategies for alkaline lipase
production by Pseudomonas aeruginosa mutant cells scale-up at bench- scale bioreactor level, Research Article, Turkish Journal of Biology, India.
Dosanjh, N.S. and J. Kaur. 2002. Immobilization, Stabillity and Esterification Studies of Lipase from a Bacillus sp. Biotechnol. Appl. Biochem. 7-12
Eijnsink, G.H., G. Sirgit. V. Torben. Bertus van de Burg. 2005. Directed Evolution of Enzyme Stability. Biomolecular Engineering. 21-30.
Gaur, R. G.N.Gupta. M. Vamsikrishman. S.K. Khare. 2008. Protein Coated Microcrystal of Pseudomonas aeruginosa Pse A lipase, Appl Biochem
Journal Biotechnol, New Delhi, India.
Gilbert, J.E. Cornish, Jones, Pabai, 1996. Purification and propertis of extracelluler lipase from Pseudomonas aeruginosa, EF2, J.Gen, Journal
Microbiol.
Gupta,S. A. Bhattacharya, and C. N. Murthy, 2013 “Tune to immobilize lipases
on polymer membranes: techniques, factors and prospects ,” Biocatalysis
and Agricultural Biotechnology, vol. 2, pp. 171 –190.