Amobilisasi enzim lipase menggunakan bentonit.

Perhitungan aktivitas sisa Virdianingsih, 2002. d. Penentuan waktu paruh t 12 , konstanta laju inaktivasi k i , dan perubahan energi akibat denaturasi ∆G i Penentuan nilai k i konstanta laju inaktivasi termal enzim lipase hasil pemurnian dan hasil amobilisasi dilakukan dengan menggunakan persamaan kinetika inaktivasi orde 1 Kazan et al., 1997 dengan persamaan: ln E i E = - k i t Sedangkan untuk perubahan energi akibat denaturasi ∆G i enzim hasil pemurnian dan hasil amobilisasi dilakukan dengan menggunakan persamaan Yandri et al., 2007: ∆G i = - RT ln k i hk B T Keterangan : R = konstanta gas 8,315 J K -1 mol -1 T = suhu absolut K k i = konstanta laju inaktivasi termal h = konstanta Planck 6,63 x 10 -34 J det k B = konstanta Boltzmann 1,381 x 10 -23 JK -1 Secara keseluruhan, penelitian ini terangkum dalam diagram alir penelitian yang ditunjukkan dalam Gambar 9. Gambar 9. Diagram alir penelitian Isolasi Enzim Ekstrak Kasar Enzim Uji aktivitas enzim lipase metode Titrimetri dan penentuan kadar protein metode Lowry Pemurnian Enzim : 1. Fraksinasi dengan ammonium sulfat 2. Dialisis Amobilisasi Enzim Karakterisasi Enzim Enzim Lipase amobil Penentuan suhu optimum Penentuan Km dan Vmaks Penentuan stabilitas termal Produksi Enzim Uji pemakaian berulang enzim amobil

V. SIMPULAN DAN SARAN

A. Simpulan

Simpulan dari pembahasan hasil penelitian yang telah dilakukan adalah sebagai berikut: 1. Bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dapat memproduksi enzim lipase pada kondisi optimum fermentasi yaitu pH 7, suhu 35ºC dan waktu inkubasi 48 jam. Pada kondisi ini diperoleh aktivitas unit tertinggi yaitu 3,333 UmL. 2. Aktivitas spesifik enzim hasil pemurnian sebesar 520,000 Umg, meningkat kemurniannya 9,2 kali dibandingkan ekstrak kasar enzim dengan aktivitas spesifik sebesar 56,491 Umg. 3. Enzim lipase amobil mampu digunakan sebanyak lima kali pemakaian berulang dengan aktivitas katalitik tersisa 14 dan efektif pada pengulangan yang ke-3 dengan aktivitas katalitik tersisa 43. 4. Data kinetika enzim lipase hasil pemurnian K M 86,177 mgmL -1 substrat dan V maks 35,714 μmol mL -1 menit -1 dan enzim lipase hasil amobilisasi K M 4,742 mgmL -1 substrat dan V maks 4,854 μmol mL -1 menit -1 . Enzim lipase hasil amobilisasi memiliki afinitas yang lebih tinggi terhadap substrat dibandingkan enzim lipase hasil pemurnian.