Tempat dan Waktu Penelitian Sampel Vaksin Reagensia dan Bahan Habis Pakai

III. BAHAN DAN METODE

3.1. Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilaksanakan pada bulan April sampai dengan Oktober 2003 bertempat di Fasilitas Hewan Penelitian dan Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi Pusat Studi Satwa Primata, Lembaga Penelitian dan Pemberdayaan Masyarakat Insititut Pertanian Bogor PSSP LPPM-IPB. Penelitian ini merupakan bagian dari penelitian kerjasama PSSP LPPM-IPB dengan tim peneliti dari University of Melbourne, Australia.

3.2. Sampel

Hewan coba yang digunakan adalah beruk M. nemestrina jantan umur pradewasa 2-3 tahun yang berasal dari penangkaran PSSP LPPM-IPB Darmaga. Hewan telah melalui proses seleksi dan karantina sehingga dipastikan termasuk kategori hewan bebas patogen tertentu specific pathogen free, SPF dalam hal ini bebas tuberkulosis dan simian retrovirus SRV. Sampel yang digunakan adalah plasma beruk dari kelompok hewan divaksinasi A dan kelompok hewan kontrol B. Sebagai kontrol untuk acuan dalam uji ELISA digunakan serum yang telah diketahui positif dan negatif terhadap HIV-1.

3.3. Vaksin

Kelompok A diberi vaksin DNA HIV-1 berupa plasmid DNA pHIS yang diinsersi gen-gen HIV-1 subtipe B gag dan pol yang dimodifikasi, rev, tat, vpu, serta nef dan env yang dipotong dan booster vaksin rekombinan virus Fowlpox yang membawa gen gag dan pol HIV-1 rFPV-HIV. Kelompok B diberi placebo berupa plasmid DNA pHIS tanpa gen HIV-1 serta booster berupa virus Fowlpox FPV tanpa sisipan gen HIV -1. Vaksin diaplikasikan melalui rute intramuskular. Seluruh regimen vaksin yang digunakan dalam penelitian ini diperoleh dari tim peneliti Laboratorium Vaksin HIV, Departemen Mikrobiologi dan Imunologi, University of Melbourne, Australia yang dipimpin oleh Dr. Stephen J. Kent, MD, MBBS, FRACP.

3.4. Reagensia dan Bahan Habis Pakai

Larutan penyangga borat, larutan penyangga PBS phosphate buffer saline, Tween-20, susu tanpa lemak, air tanpa ion, protein p24 HIV-1, kontrol protein, goat anti-monkey IgG yang dikonjugasikan dengan peroksidase, substrat TMB 3-3-5-5-tetramethylbenzidine, larutan penyangga phosphate citrate buffer, H 2 SO 4 , jarum suntik, tabung hampa udara berheparin, 96 well ELISA plate.

3.5. Alat