4
C.Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Formulasi dan Teknologi Farmasi, dan Laboratorium Mikrobiologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
D.Jalannya Penelitian 1. Pembuat ekstrak etanol buah asam gelugur
Buah asam gelugur dicuci, ditiriskan, dipotong dan dijemur dengan menggunakan penutup kain berwarna hitam. Simplisia buah asam gelugur yang telah kering dipotong
lebih kecil lagi dan direndam dalam etanol 96 dalam bejana maserasi yang terlindung dari cahaya matahari, didiamkan selama 5 hari. Simplisia yang dimaserasi diaduk beberapa
kali untuk mendapat konsentrasi jenuh. Hasil yang didapatkan disaring dan dilakukan remaserasi 2x. Maserat hasil maserasi dan remaserasi diuapkan dengan rotory evaporator
dan dilanjutkan dengan waterbath pada suhu 60
o
C sampai diperoleh ekstrak kental.
2. Uji aktivitas antibakteri ekstrak dan gel
a. Sterilisasi alat dan bahan Alat-alat dan bahan yang akan digunakan dicuci, dibungkus, dan disterikan terlebih
dahulu. Alat-alat gelas seperti cawan petri, tabung reaksi, erlenmeyer, pipet volume dimasukkan ke dalam oven pemanasan kering dan disterilkan pada suhu 175
o
C selama 2 jam. Alat dan bahan yang tidak tahan pemanasan kering seperti media, tips dimasukkan
dalam autoklaf pemanasan basah pada suhu 121
o
C selama 15 menit. b.
Pembuatan media MH Media padat MH 9,5 g dilarutkan dalam akuadest steril 250 mL dan dipanaskan
hingga melarut. Kemudian disterilisasi dengan autoklaf 121
o
C selama 15-20 menit. Media yang telah steril dimasukkan ke dalam cawan petri di ruangan LAF.
c. Pembuatan stok bakteri dan suspensi bakteri
Media yang telah mengeras diambil dan digoreskan bakteri secara streak plate, dan diinkubasi selama 24 jam. Suspensi bakteri dibuat dengan cara mengambil beberapa
koloni tunggal yang telah dikultur dimasukkan ke dalam 2 mL BHI cair. Setelah itu dibandingkan dengan kekeruhan larutan standar Mc.Farland, bila tidak sama ditambahkan
larutan NaCl 0,9 . d.Uji antibakteri ekstrak.
Ekstrak etanol buah asam gelugur dibuat 4 seri konsentrasi yaitu 1, 2, 4, dan 8. Media yang telah diinokulasi dengan bakteri S.aureus 200 μL 1,5x10
8
CFUmL
