14 Gangguan utama dalam absorpsi atom adalah efek matriks yang
mempengaruhi proses pengatoman. Baik jauhnya disosiasi menjadi atom-atom pada suatu temperature tertentu laju proses bergantung sekali pada komposisi
keseluruhan dari sampel Gandjar dan Rohman, 2007.
2.4 Validasi Metode Analisis
Validasi metode analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter tertentu berdasarkan percobaan laboratorium untuk membuktikan
bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya Harmita, 2004.
Menurut Harmita 2004, beberapa parameter analisis yang harus dipertimbangkan dalam validasi metode analisis adalah sebagai berikut:
a. Kecermatan Kecermatan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil
analisis dengan kadar analit yang sebenarnya. Kecermatan dinyatakan sebagai persen perolehan kembali recovery analit yang ditambahkan. Kecermatan
dapat ditentukan dengan dua cara yaitu metode simulasi dan metode penambahan baku.
Metode simulasi Spiked-placebo recovery merupakan metode yang dilakukan dengan cara menambahkan sejumlah analit bahan murni ke dalam
suatu bahan pembawa sediaan farmasi plasebo, lalu campuran tersebut dianalisis dan hasilnya dibandingkan dengan kadar analit yang ditambahkan
kadar yang sebenarnya Harmita, 2004. Metode penambahan baku standard addition method merupakan
metode yang dilakukan dengan cara menambahkan sejumlah analit dengan
Universitas Sumatera Utara
15 konsentrasi tertentu pada sampel yang diperiksa, lalu dianalisis dengan metode
yang akan divalidasi. Hasilnya dibandingkan dengan sampel yang dianalisis tanpa penambahan sejumlah analit. Persen perolehan kembali ditentukan
dengan menentukan berapa persen analit yang ditambahkan dalam sampel dapat ditemukan kembali Harmita, 2004. Menurut Miller 2005, parameter ini
memenuhi syarat jika nilainya berada pada rentang 80 - 120. b. Keseksamaan presisi
Keseksamaan atau presisi diukur sebagai simpangan baku relatif atau koefisien variasi. Keseksamaan atau presisi merupakan ukuran yang
menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual ketika suatu metode dilakukan secara berulang untuk sampel yang homogen Harmita, 2004.
Nilai simpangan baku relatif RSD untuk analit dengan kadar part per million ppm adalah tidak lebih dari 16 dan untuk analit dengan kadar part
per billion ppb RSDnya adalah tidak lebih dari 32 Harmita, 2004. c. Selektivitas Spesifisitas
Selektivitas atau spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya yang hanya mengukur zat tertentu secara cermat dan seksama dengan adanya
komponen lain yang ada di dalam sampel Harmita, 2004. d. Linearitas dan rentang
Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan respon baik secara langsung maupun dengan bantuan transformasi matematika,
menghasilkan suatu hubungan yang proporsional terhadap konsentrasi analit dalam sampel. Rentang merupakan batas terendah dan batas tertinggi analit
yang dapat ditetapkan secara cermat, seksama dan dalam linearitas yang dapat
Universitas Sumatera Utara
16 diterima Secara statistik linearitas dari kurva kalibrasi dinyatakan dalam
koefisien korelasi r. Koefisien korelasi yang lebih besar dari 0, 99 menyatakan adanya hubungan yang linear Harmita, 2004; Watson, 2005.
e. Batas deteksi Limit of detection dan batas kuantitasi Limit of quantitation Batas deteksi merupakan jumlah terkecil analit dalam sampel yang
dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan, sedangkan batas kuantitasi merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat
memenuhi kriteria cermat dan seksama Harmita, 2004.
Universitas Sumatera Utara
17
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Kimia Farmasi Kualitatif dan Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Medan
pada bulan Mei 2014 – Agustus 2014.
3.2 Bahan–Bahan
3.2.1 Sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah biji, daging buah dan daun labu kuning yang diambil secara purposif di Desa Samura,
Kecamatan Kabanjahe, Kabupaten Karo, Sumatera Utara.
3.2.2 Pereaksi
Semua bahan yang digunakan dalam penelitian ini kecuali akua demineralisata, berkualitas pro analisa keluaran E. Merck yaitu asam nitrat
65 bv, asam sulfat 96 vv, asam pikrat, etanol 96 vv, asam klorida 37 vv, larutan baku kalium 1000 µgml, larutan baku kalsium 1000 µgml
dan larutan baku natrium 1000 µgml.
3.3 Alat–Alat
Alat yang digunakan adalah Alat-alat gelas Oberoi dan Pyrex, blender, hot plate, kertas saring Whatman No. 42, kurs porselen, neraca analitik
AND GF-200, parutan stainless stell, spatula, desikator, tanur Stuart dan Spektrofotometer Serapan Atom Hitachi Z-2000 lengkap dengan lampu
katoda kalsium, kalium dan natrium.
Universitas Sumatera Utara
