25
3.7 Alur Penelitian
Bagan 3.1 Alur Penelitian
3.8 Cara Kerja Penelitian 3.8.1 Tahap Persiapan
3.8.1.1 Perhitungan Sampel
Jumlah sampel dihitung menggunakan rumus federer t-1r-
1≥15
Pembuatan stok bakteri Escherichia
coli pada media Endo Agar
1 ose bakteri diambil dan dicampurkan
kedalam pengencer NaCl 0.9
Suspensi bakteri dihomogenkan
menggunakan vortex
Suspensi bakteri disamakan
kekeruhannya dengan larutan standar 0.5
McFarlan
Suspensi dioleskan ke Mueller Hinton Agar
menggunakan kapas lidi steril
Pembuatan konsentrasi ekstrak
biji pepaya 5, 25, 50 dan 75 pada
cawan petri
Cakram uji kosong direndam kedalam
konsentrasi ekstrak selama 15-20 menit
Cakram uji yang telah direndam dengan ekstrak
diletakkan pada media Mueller Hinton Agar yang
telah dioleskan bakteri Escherichia coli
Diinkubasi selama 24 jam pada suhu
37
o
C Zona hambat yang
terbentuk diamati dan diukur diameternya
26
t=jumlah kelompok perlakuan konsentrasi r=jumlah pengulangan
Dengan t=6 maka: t-1r-
1≥15 6-1r-
1≥15 5r-
5 ≥ 15 5r ≥ 20
r ≥ 4 Berdasarkan perhitungan tersebut, maka dilakukan 4 kali pengulangan.
3.8.1.2 Sterilisasi Alat dan Bahan
Seluruh alat yang akan digunakan sebelumnya dicuci bersih, dikeringkan dan dibungkus dengan kertas kemudian disterilisasi di dalam
autoclave selama 15 menit sampai menunjukkan tekanan sebesar 15 dynecm3 1 atm dengan suhu sebesar 121
o
C.
19
3.8.1.3 Persiapan Sampel
Biji papaya diperoleh dari tukang penjual buah di daerah Meruya sehingga didapatkan biji pepaya kering sebanyak 1 kg. Biji pepaya
dideterminasi di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia LIPI Bogor untuk
memastikan kebenaran spesies tanaman yang akan digunakan.
3.8.1.4 Pembuatan Ekstrak Biji Pepaya
Pembuatan ekstrak biji pepaya dilakukan di Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik BALITRO Bogor menggunakan metode maserasi
dengan pelarut etanol 96. Dari 1 kg biji pepaya kering diperoleh ekstrak sebanyak 4,2 gram.
3.8.1.5 Pembuatan KulturBakteri Escherichia coli
Pembuatan stok bakteri ini dilakukan untuk memperbanyak bakteri, dengan cara menginokulasikan 1 ose biakan murni bakteri Escherichia coli
yang berasal dari laboratorium FKIK UIN Syarif Hidayatullah ke atas
Kategori