Improved Neubauer, object glass, cover glass, hand counter, thermometer, dan luxmeter.
3.3. Rancangan Penelitian
Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap RAL yang terdiri atas enam perlakuan dan tiga kali ulangan. Variabel
yang digunakan dalam penelitian ini adalah variasi konsentrasi limbah cair tahu dan kerapatan rata-rata jumlah sel mikroalga Scenedesmus sp. Berikut ini
merupakan perlakuan yang akan diberikan. 1. Perlakuan I
: Limbah Cair Tahu konsentrasi 10 2. Perlakuan II
: Limbah Cair Tahu konsentrasi 20 3. Perlakuan III
: Limbah Cair Tahu konsentrasi 30 4. Perlakuan IV
: Limbah Cair Tahu konsentrasi 40 5. Perlakuan V
: Medium Basal Bold MBB sebagai kontrol positif. 6. Perlakuan VII
: Akuades streril sebagai control negatif
3.4. Cara Kerja
3.4.1. Persiapan Alat
Erlenmeyer, tabung ukur, dan pipet yang akan digunakan dicuci, dikeringkan, dan dibungkus dengan kertas kemudian disterilisasi menggunakan
autoclave dengan suhu 121
o
C selama 15 menit dengan tekanan 2 atm.
3.4.2. Isolasi mikroalga Scenedesmus sp .
Untuk mengisolasi spesies yang diinginkan dari alam, diambil 5 liter air danau Agathis UI Depok. Kemudian air danau tersebut dimasukkan ke dalam
wadah isolasi berupa akuarium dan ditambahkan dengan pupuk NPK yang sebelumnya telah dilarutkan dengan akuades terlebih dahulu. Selanjutnya wadah
tersebut diletakkan di tempat terbuka yang terkena sinar matahari dan dimasukkan selang aerator. Pembiakan mikroalga ini ditunggu hingga hari ke-4 setelah
didapatkannya biota yang diinginkan yaitu Scenedesmus sp.
3.4.3. Pembuatan Medium Basal Bold MBB
Sebelum membuat MBB, terlebih dahulu dibuat larutan stok MBB yang terdiri atas :
a NaNO
3
b CaCl
2.
2H2O c MgSO
4.
7H
2
O d K
2
HPO
4
e NaCl f Trace element EDTA dan KOH
g Trace element FeSO
4
.7H
2
O h
Trace element H
3
BO
3
i dan Trace element ZnSO
4.
5H
2
O, MoO
3,
CuSO
4
.5H
2
O, MnCl
2
.4H
2
O, CoNo
3 2
.6H
2
O
Larutan stok MBB ini dibuat dengan cara melarutkan bahan kimia sesuai dengan komposisi medium yang ditetapkan Tabel 11. Menurut Nichols 1973
dalam Damayanti, 2006, Pembuatan Medium Basal Bold MBB dilakukan dengan cara menambahkan 10 ml dari setiap larutan stok makronutrien dan
mikronutrien ke dalam erlenmeyer 1 liter kemudian ditambahkan akuades. Larutan yang telah dihomogenkan tersebut selanjutnya disterilisasi menggunakan
autoclave pada suhu 121
o
C dengan tekanan 2 atm selama 15 menit.
3.4.4. Pemurnian Scenedesmus sp.
Kultur Scenedesmus dimurnikan menggunakan metode pengenceran. Sebanyak 1 ml biakan Scenedesmus dari hasil isolasi dimasukkan ke dalam
tabung reaksi yang berisi 9 ml MBB kemudian dicampur hingga homogen. Selanjutnya dari kultur tersebut diambil 0,1 ml dan dimasukkan ke dalam tabung
reaksi ke dua. Proses ini dilakukan hingga tabung reaksi keempat. Kultur selanjutnya diletakkan di rak kultur dan diinkubasi selama 14 hari. Kultur
Scenedesmus yang tumbuh dengan baik dan murni tanpa kontaminan diperbanyak lagi secara bertahap hingga didapatkan 100 ml kultur murni
Scenedesmus Damayanti, 2006.
3.4.5. Pembuatan Medium Ekstrak Tauge MET