Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Dari Tumbuhan Pacar Air (Impatiens balsamina L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis DAN Pseudomonas aeruginosa

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI

EKSTRAK DAUN DARI TUMBUHAN PACAR AIR (Impatiens

balsamina L.) TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus,

Staphylococcus epidermidis DAN Pseudomonas aeruginosa

SKRIPSI

OLEH: PUSPA UTARI NIM 091524066

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN DARI TUMBUHAN PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP

BAKTERI Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis DAN Pseudomonas aeruginosa

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk mencapai Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

OLEH: PUSPA UTARI NIM 091524066

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN

LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN DARI TUMBUHAN PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP

BAKTERI Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis DAN Pseudomonas aeruginosa

OLEH: PUSPA UTARI NIM 091524066

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara Pada tanggal : Juni 2011

Pembimbing I, Panitia Penguji,

Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. Dra. Masfria, M.Si., Apt.

NIP 195109081985031002 NIP 195707231986012001

Pembimbing II, Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt.

NIP 195109081985031002

Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt.

NIP 195008221974121002 Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP 105107231982032001

Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si.,Apt. NIP 195304031983032001

Medan, Juni 2011 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

Dekan,

Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP 195311281983031002

KATA PENGANTAR

Alhamdulillah, penulis ucapkan atas ke hadirat Allah SWT Yang Maha Agung yang telah melimpahkan rahmat, hidayah dan kemudahan kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul “Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antibakteri Eksrak Daun Dari Tumbuhan Pacar Air (Impatiens balsamina L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus,

Staphylococcus Epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa” sebagai salah satu syarat

untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Dengan kerendahan hati penulis mengucapkan terma kasih yang tulus kepada kedua orangtua tercinta Tasrif Saka dan Rahayu, untuk kakak dan adikku tersayang Wewet Witarsa, Nuriman Jaya Tarsa, Indera Permana Tarsa, Nugraha Adya Putra Tarsa, Yuda priyatna Tarsa dan Aditya Tarsa atas dukungan doa, semanagat dan pengorbanan baik moril maupun materil. Semoga Allah SWT selalu melindungi.

Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Drs. Suryadi Achmad,M.Sc., Apt. dan Bapak Drs. Awalludin Saragih,M.Si., Apt. yang telah membimbing dengan penuh kesabaran dan ikhlas, sehingga penelitian dan penulisan skripsi ini dapat diselesaikan.

Penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih kepada :

1. Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. Selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan.

2. Ibu Dra. Saleha Salbi,M.Si,. Apt. selaku pembimbing akademik yang telah membimbing dan member semangat kepada penulis selama menjalani pendidikan. 3. Ibu Dra. Masfria,M.Si,. Apt., Ibu Dra. Suwarti Aris,M.Si,. Apt., dan Ibu Aswita

Hafni Lubis,M.Si,. Apt. selaku dosen penguji yang telah memberikan saran hingga selesainya skripsi ini.

4. Bapak Kepala Laboratorium Obat Tradisional Fakultas Farmasi dan Laboratorium Kesehatan Medan yang telah memberikan fasilitas kepada penulis dalam menyelesaikan penelitian.

5. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah membina dan mendidik penulis selama menjalani pendidikan.

6. Teman-teman mahasiswa/i Farmasi khususnya Ekstensi angkatan 2008 dan 2009 yang telah membantu dan memberikan semangat seingga penelitian dan penulisan skripsi ini dapat diselesaikan.

7. Fadliyata yang telah memberikan semua doa, kasih saying dan semangat yang luar biasa dalam menyelesaikan skripsi ini.

8. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah membantu penulis dalam menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan, oleh karena itu penulis bersedia menerima saran dan kritik yang membangun dari pembaca. Semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang Farmasi.

Medan, Juni 2011 Penulis

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN DARI TUMBUHAN PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP

BAKTERI Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis DAN Pseudomonas aeruginosa

Abstrak

Daun tumbuhan pacar air (Impatiens balsamina L.) merupakan salah satu bagian tumbuhan yang perlu dikembangkan manfaatnya, secara tradisional digunakan sebagai obat pencuci luka, nyeri haid, keputihan dan infeksi pada kulit. Selama ini masyarakat hanya mengenal tumbuhan ini sebagai tumbuhan hias, dan ternyata selain itu tumbuhan ini dapat dimanfaatkan sebagai tumbuhan obat. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian terhadap daun pacar air.

Pada penelitian ini dilakukan pemeriksaan karakterisasi, skrining fitokimia dan uji aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Staphylococcus

aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa yang dilakukan

secara invitro dengan metode difusi agar menggunakan kertas cakram.

Hasil skrining fitokimia dari simplisia dan ekstrak daun pacar air menunjukkan adanya senyawa flavonoida, steroida dan saponin. Ekstrak daun pacar air mempunyai aktivitas antibakteri. Aktivitas antibakteri dari ekstrak daun pacar air menunjukkan konsentrasi hambat minimum (KHM) pada bakteri Staphylococcus

aureus sebesar 12 mg/ml, pada bakteri Staphylococcus epidermidis sebesar 24 mg/ml

dan pada bakteri Pseudomonas aeruginosa sebesar 24 mg/ml. Sedangkan batas daerah hambat yang efektif dengan diameter 14,5 mm pada konsentrasi 60 mg/ml untuk bakteri Staphylococcus aureus, diameter 14,2 mm pada konsentrasi 60 mg/ml untuk bakteri Staphylococcus epidermidis dan diameter 14,4 mm pada konsentrasi 60 mg/ml untuk bakteri Pseudomonas aeruginosa.

Kata kunci : Skrining, Ekstrak Daun Pacar Air, Antibakteri, Staphylococcus

PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF EXTRACT HENNA WATER LEAVES (Impatiens balsamina L.) WITH RESPECT TO Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis AND

Pseudomonas aeruginosa

Abstract

The leaf of henna water (Impatiens balsamina L.) is one of the plants that need to be developed benefits, traditionally used as a drug wash wounds, menstrual pain, vaginal discharge and infection of the skin. As long as this society are only familiar with this plant as an ornamental plant, and in fact other than that this plant can be used as a medicinal plant. Therefore it needs to do research on henna water leaf.

In this research was conducted at the characteristic, phytochemical screening and examination antibacterial activity of extract the henna leaves water against

Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Pseudomonas aeruginosa

that was conducted as invitro agar diffusion method by using the disc paper.

The result of phytochemical screening of crude drugs and extracts of henna leaves indicate water flavonoida compounds, steroid and saponin. Henna leaf water extract has antibacterial activity. Antibacterial activity of water extract of henna leaves showed a minimum inhibitory concentration (MIC) of the Staphylococcus

aureus bacterium at 12 mg/ml, the Staphylococcus epidermidis bacterium at 24

mg/ml and the Pseudomonas aeruginosa bacterium at 24 mg/ml. While the limit of effective inhibition area with a diameter of 14,5 mm at a concentration of 60 mg/ml for Staphylococcus aureus, 14,2 mm diameter at a concentration of 60 mg/ml for

Staphylococcus epidermidis and a diameter of 14,4 mm at a concentration of 60

mg/ml to Pseudomonas aeruginosa.

Keyword : Screening, Extract Henna Water Leaf, Antibacterial, Staphylococcus

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

HALAMAN JUDUL ... ii

PENGESAHAN SKRIPSI ... iii

KATA PENGANTAR ... iv

ABSTRAK ... vi

ABSTRACT ... vii

DAFTAR ISI ... viii

DAFTAR TABEL ... xii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiii

BAB I PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Perumusan Masalah ... 3

1.3 Hipotesis ... 3

1.4 Tujuan Penelitian ... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 4

2.1 Uraian Tumbuhan ... 4

2.1.1 Morfologi Tumbuhan ... 4

2.1.2 Sistematika Tumbuhan ... 4

2.1.3 Nama Daerah ... 5

2.1.4 Kandungan Kimia ... 5

2.1.5 Khasiat Tumbuhan ... 5

2.2.1 Flavonoida ... 5

2.2.2 Saponin ... 6

2.2.3 Steroida ... 7

2.2.4 Glikosida ... 7

2.3 Ekstrak ... 8

2.3.1 Pengertian... 8

2.3.2 Metode Ekstraksi ... 9

2.4 Uraian Bakteri ... 10

2.4.1 Pertumbuhan Bakteri ... 11

2.4.2 Media Pertumbuhan Bakteri ... 12

2.4.3 Fase Pertumbuhan Bakteri ... 14

2.4.4 Bakteri Staphylococcus aureus ... 15

2.4.5 Bakteri Staphylococcus epidermidis... 16

2.4.6 Bakteri Pseudomonas aeruginosa ... 17

2.6.7 Pengukuran Aktivitas Antibakteri ... 17

BAB III METODE PENELITIAN ... 19

3.1 Lokasi dan Waktu Penelitian ... 19

3.2 Metode Penelitian ... 19

3.3 Alat dan Bahan ... 19

3.3.1 Alat ... 19

3.3.2 Bahan ... 20

3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi ... 20

3.4.1 Larutan Pereaksi Mayer ... 20

3.4.3 Larutan Pereaksi Bouchardat ... 20

3.4.4 Larutan Pereaksi Lieberman-Bourchard ... 21

3.4.5 Larutan Pereaksi Molish ... 21

3.4.6 Larutan Pereaksi Timbal (III) Asetat 0,4 M ... 21

3.4.7 Larutan Pereaksi Besi (III) Klorida 1 % ... 21

3.4.8 Larutan Pereaksi Asam Sulfat 2 N ... 21

3.4.9 Larutan Pereaksi Asam Klorida 2 N ... 21

3.4.10 Larutan Pereaksi Kloralhidrat ... 21

3.5 Penyiapan Bahan Tumbuhan ... 22

3.5.1 Identifikasi Tumbuhan ... 22

3.5.2 Pengumpulan Tumbuhan ... 22

3.5.3 Pembuatan Simplisia ... 22

3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ... 23

3.6.1 Pemeriksaan Makroskopik ... 23

3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopik ... 23

3.6.3 Penetapan Kadar Air ... 23

3.6.4 Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Air .... 24

3.6.5 Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Etanol.. 24

3.6.6 Penetapan Kadar Abu Total ... 25

3.6.7 Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut Asam ... 25

3.7 Skrining Fitokimia ... 25

3.7.1 Pemeriksaan Glikosida ... 25

3.7.2 Pemeriksaan Alkaloida ... 26

3.7.4 Pemeriksaan Flavonoida ... 27

3.7.5 Pemeriksaan Tanin ... 27

3.7.6 Pemeriksaan Saponin ... 27

3.8 Pembuatan Ekstrak ... 27

3.9 Sterilisasi Alat ... 28

3.10 Pembuatan Media ... 28

3.10.1 Nutrient Agar (NA)... 28

3.10.2 Mueller Hinton Agar (MHA) ... 29

3.10.3 Larutan NaCL 0,9 % ... 29

3.10.4 Pembuatan Suspensi Standard Mc. Farland .... 30

3.10.5 Pembuatan Media Miring ... 30

3.11 Pembuatan Stok Kultur Bakteri ... 30

3.12 Pembuatan Inokulum Bakteri ... 30

3.13 Pembuatan Pengenceran Ekstrak ... 31

3.14 Uji Aktivitas Antibakteri ... 31

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 33

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 39

5.1 Kesimpulan ... 39

5.2 Saran ... 39

DAFTAR PUSTAKA ... 40

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1. Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia ... 33 4.2. Hasil skrining fitokimia dari daun pacar air ... 35 4.3. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air

terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Identifikasi Tumbuhan ... 42

2. Gambar Tumbuhan Pacar Air dan Daun Pacar Air ... 43

3. Gambar Simplisia Daun Pacar Air dan Serbuk Simplisia ... 44

4. Gambar Mikroskopik Penampang Melintang Daun Segar Pacar Air ... 45

5. Gambar Mikroskopik Serbuk Simplisia ... 46

6. Kerangka Percobaan ... 47

7. Hasil uji aktivitas antibakteri ... 51

8. Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Staphylococcus aureus …... 52

9. Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis ... 54

10. Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Staphylococcus pseudomonas... 55

SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN DARI TUMBUHAN PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP

BAKTERI Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis DAN Pseudomonas aeruginosa

Abstrak

Daun tumbuhan pacar air (Impatiens balsamina L.) merupakan salah satu bagian tumbuhan yang perlu dikembangkan manfaatnya, secara tradisional digunakan sebagai obat pencuci luka, nyeri haid, keputihan dan infeksi pada kulit. Selama ini masyarakat hanya mengenal tumbuhan ini sebagai tumbuhan hias, dan ternyata selain itu tumbuhan ini dapat dimanfaatkan sebagai tumbuhan obat. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian terhadap daun pacar air.

Pada penelitian ini dilakukan pemeriksaan karakterisasi, skrining fitokimia dan uji aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Staphylococcus

aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa yang dilakukan

secara invitro dengan metode difusi agar menggunakan kertas cakram.

Hasil skrining fitokimia dari simplisia dan ekstrak daun pacar air menunjukkan adanya senyawa flavonoida, steroida dan saponin. Ekstrak daun pacar air mempunyai aktivitas antibakteri. Aktivitas antibakteri dari ekstrak daun pacar air menunjukkan konsentrasi hambat minimum (KHM) pada bakteri Staphylococcus

aureus sebesar 12 mg/ml, pada bakteri Staphylococcus epidermidis sebesar 24 mg/ml

dan pada bakteri Pseudomonas aeruginosa sebesar 24 mg/ml. Sedangkan batas daerah hambat yang efektif dengan diameter 14,5 mm pada konsentrasi 60 mg/ml untuk bakteri Staphylococcus aureus, diameter 14,2 mm pada konsentrasi 60 mg/ml untuk bakteri Staphylococcus epidermidis dan diameter 14,4 mm pada konsentrasi 60 mg/ml untuk bakteri Pseudomonas aeruginosa.

Kata kunci : Skrining, Ekstrak Daun Pacar Air, Antibakteri, Staphylococcus

PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF EXTRACT HENNA WATER LEAVES (Impatiens balsamina L.) WITH RESPECT TO Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis AND

Pseudomonas aeruginosa

Abstract

The leaf of henna water (Impatiens balsamina L.) is one of the plants that need to be developed benefits, traditionally used as a drug wash wounds, menstrual pain, vaginal discharge and infection of the skin. As long as this society are only familiar with this plant as an ornamental plant, and in fact other than that this plant can be used as a medicinal plant. Therefore it needs to do research on henna water leaf.

In this research was conducted at the characteristic, phytochemical screening and examination antibacterial activity of extract the henna leaves water against

Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Pseudomonas aeruginosa

that was conducted as invitro agar diffusion method by using the disc paper.

The result of phytochemical screening of crude drugs and extracts of henna leaves indicate water flavonoida compounds, steroid and saponin. Henna leaf water extract has antibacterial activity. Antibacterial activity of water extract of henna leaves showed a minimum inhibitory concentration (MIC) of the Staphylococcus

aureus bacterium at 12 mg/ml, the Staphylococcus epidermidis bacterium at 24

mg/ml and the Pseudomonas aeruginosa bacterium at 24 mg/ml. While the limit of effective inhibition area with a diameter of 14,5 mm at a concentration of 60 mg/ml for Staphylococcus aureus, 14,2 mm diameter at a concentration of 60 mg/ml for

Staphylococcus epidermidis and a diameter of 14,4 mm at a concentration of 60

mg/ml to Pseudomonas aeruginosa.

Keyword : Screening, Extract Henna Water Leaf, Antibacterial, Staphylococcus

BAB I PENDAHULUAN 1.1Latar Belakang

Obat tradisional merupakan warisan nenek moyang yang telah dikembangkan sejak dahulu kala. Sumber obat tradisional terutama berasal dari bahan alam baik tumbuhan ataupun bahan-bahan mineral. Saat ini Indonesia merupakan salah satu negara penghasil tanaman obat yang potensial, dimana hasil alam yang paling banyak digunakan sebagai bahan obat adalah tumbuhan, yang telah digunakan dalam kurun waktu cukup lama (Djauhariyah, 2004). Masyarakat Indonesia memanfaatkan tumbuhan obat secara tradisional karena efek samping lebih kecil dari obat yang dibuat secara sintesis. Mahalnya obat sintesis membuat masyarakat beralih ke tumbuhan obat. Hal ini menandai adanya peningkatan kesadaran masyarakat untuk kembali ke alam dalam rangka mencapai kesehatan optimal dan untuk mengatasi berbagai penyakit secara alami (Mursito, 2001).

Sesuai Keputusan Menteri Kesehatan No.131/Menkes/SK/II/2004 tentang Sistem Kesehatan Nasional (SKN) yang menyatakan bahwa pengembangan dan peningkatan obat tradisional harus terus dilakukan agar diperoleh obat yang bermutu tinggi, aman, memiliki khasiat yang nyata yang teruji secara ilmiah dimanfaatkan secara luas baik untuk pengobatan sendiri oleh masyarakat maupun digunakan dalam pelayanan kesehatan formal (Depkes RI, 2006).

Salah satu tumbuhan obat adalah pacar air (Impatiens balsamina L.) dari suku Balsaminaceae. Tumbuhan pacar air mempunyai bunga dengan beberapa warna yaitu merah, putih, kuning, jingga dan ungu. Kandungan kimia dari bunga diantaranya antosianin dan kamperol, pada biji mengandung saponin dan fixel oil dan pada

akarnya mengandung sianidin dan monoglikosida (Dalimartha, 2003), serta bagian daunnya mengandung flavonoida, saponin, steroida dan glikosida (Adfa, 2007).

Tumbuhan ini memiliki banyak manfaat dari bagiannya yang dapat digunakan sebagai obat diantaranya biji, daun, bunga dan akarnya. Biji digunakan untuk mengatasi terlambat haid, sulit melahirkan, rasa tersumbat ditenggorokan, bengkak akibat terbentur dan tumor perut. Bunga digunakan untuk mengatasi terlambat haid, dan bengkak karena gumpalan bekuan darah. Daun digunakan untuk mengatasi radang kulit bernanah, bisul dan radang pinggir kuku (cantengan). Akar digunakan untuk mengatasi rematik, leher kaku dan sakit pinggang (Dalimartha, 2003).

Masyarakat Bengkulu telah memanfaatkan daun pacar air segar sebagai obat luka tersayat, bengkak-bengkak, koreng, obat panas dalam dan susah buang air kecil bagi anak-anak (Adfa, 2007). Dalam kehidupan sehari-hari masyarakat kota Medan menggunakan tumbuhan ini dengan melumatkan daun pacar air segar, lalu ditempelkan pada bagian tubuh yang luka atau dengan cara merebus daun pacar air segar secukupnya lalu digunakan air rebusan untuk mencuci luka.

Berdasarkan uraian di atas, maka perlu dilakukan pemeriksaan karakterisasi, skrining fitokimia terhadap simplisia dan ekstrak daun pacar air serta menguji aktivitas antibakteri dari ekstrak daun pacar air terhadap bakteri penyebab penyakit kulit. Adapun mikroba yang digunakan adalah Staphylococcus aureus,

Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa. Staphylococcus aureus

dan Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri gram positif sedangkan

Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri gram negatif. Ketiga bakteri ini dapat

1.2Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang, perumusan masalah penelitian yaitu: a. Apakah karakteristik simplisia daun pacar air dapat diidentifikasi

b. Apakah golongan senyawa kimia yang terdapat pada simplisia dan ekstrak daun pacar air.

c. Apakah ekstrak daun pacar air mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas

aeruginosa.

1.3Hipotesis

Berdasarkan perumusan masalah, maka hipotesis penelitian adalah: a. Simplisia daun pacar air dapat diidentifikasi dengan karakteristik tertentu. b. Golongan senyawa kimia yang terdapat pada simplisia dan ekstrak memiliki

kandungan yang sama yaitu flavonoida, saponin, steroida dan glikosida. c. Ekstrak daun pacar air mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri

Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa.

1.5 Tujuan

Tujuan penelitian ini adalah :

a. Untuk mengetahui karakteristik simplisia daun pacar air.

b. Untuk mengetahui golongan senyawa kimia yang terdapat pada simplisia dan ekstrak daun pacar air.

c. Untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak daun pacar air terhadap Bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Uraian Tumbuhan

Uraian tumbuhan meliputi, morfologi tumbuhan, sistematik tumbuhan, nama daerah, kandungan kimia dan khasiat tumbuhan.

2.1.1 Morfologi tumbuhan

Pacar air merupakan tanaman terna semusim, berakar serabut, berbatang basah, bulat, licin, tegak, tinggi 30-80 cm, bercabang, warnanya hijau kekuningan. Biasa ditanam di halaman sebagai tanaman hias atau tumbuhan liar ditempat yang cukup mendapat air dan sinar matahari. Daun tunggal, bertangkai, bentuk lanset memanjang, panjang 6-15 cm, lebar 2-3 cm, tepi bergerigi tajam, ujung dan pangkal meruncing, pertulangan menyirip, warna hijau muda. Bunga tungal, keluar dari ketiak daun, berkumpul 1-3, warnanya cerah (ada yang merah, orange, ungu, dan putih). Buahnya buah kendaga, berbentuk telur, elips, berambut, warna hijau, bila masak akan pecah membuka menjadi 5 bagian yang terpilin. Bijinya bulat, kecil, hitam. 2.1.2 Sistematika Tumbuhan

Sistematika tumbuhan pacar air adalah sebagai berikut : Divisi : Spermatophyta

Sub divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledoneae Bangsa : Geraniales

Suku : Balsaminaceae

Genus : Impatiens

2.1.3 Nama Daerah

Nama daerah dari tumbuhan pacar air adalah lahine (Nias), paruinai (Jawa) atau pacar banyu, kimbong (Jakarta), bunga taho (Sulawesi), inai anyar (Maluku), pacar foya (Nusa tenggara) (Hariana, 2008).

2.1.4 Kandungan Kimia

Pada bunga diantaranya antosianin dan kamperol, pada biji mengandung saponin dan fixel oil dan pada akarnya mengandung sianidin dan monoglikosida (Dalimartha, 2003), serta bagian daunnya mengandung flavonoida, saponin, steroida dan glikosida (Adfa, 2007).

2.1.5 Khasiat Tumbuhan

Biji digunakan untuk mengatasi terlambat haid, sulit melahirkan, rasa tersumbat ditenggorokan, bengkak akibat terbentur dan tumor perut. Bunga digunakan untuk mengatasi terlambat haid, dan bengkak karena gumpalan bekuan darah. Daun digunakan untuk mengatasi radang kulit bernanah, bisul dan radang pinggir kuku (cantengan). Akar digunakan untuk mengatasi rematik, leher kaku dan sakit pinggang (Dalimartha, 2003).

2.2Kandungan Senyawa Kimia

Senyawa kimia yang terkandung pada tumbuhan Impatiens balsamina L. adalah Flavonoida, Saponin, Steroida dan Glikosida (Adfa, 2001).

2.2.1 Flavonoida

Flavonoida merupakan salah satu golongan fenol alam yang tersebar luas pada tumbuhan hijau dan mengandung 15 atom karbon dalam inti dasarnya, yang tersusun dalam konfigurasi C6-C3-C6 Yaitu dua cincin aromatik yang dihubungkan oleh satuan

Gambar 1. Struktur Flavonoida

Umumnya senyawa flavonoida dalam tumbuhan terikat dengan gula disebut sebagai glikosida dan aglikon flavonoida yang berbeda-beda mungkin saja terdapat pada satu tumbuhan dalam beberapa bentuk kombinasi glikosida. Oleh karena itu dalam menganalisis flavonoida biasanya lebih baik memeriksa aglikon yang telah dihidrolisis dibandingkan dalam bentuk glukosida dengan kerumitan strukturnya. Flavonoida berkhasiat sebagai antioksidan, antibakteri dan inflamasi (Harbone, 1987).

2.2.2Saponin

Senyawa golongan ini banyak terdapat pada tumbuhan tinggi. Keberadaan saponin sangat mudah ditandai dengan pembentukan larutan koloidal dengan air yang apabila dikocok menimbulkan buih yang stabil. Sapponin merupakan senyawa berasa pahit menusuk, menyebabkan bersin dan sering mengakibatkan iritasi terhadap selaput lender (Gunawan & Mulyani, 1995)

Saponin merupakan senyawa aktif permukaan, bersifat seperti sabun dan dapat dideteksi berdasarkan kemampuannya membentuk busa dan menghemolisis, sel darah. Pembentukan busa yang mantap sewaktu mengekstraksi tumbuhan atau pada waktu memekatkan ekstrak tumbuhan merupakan bukti terpercaya akan adanya saponin (Harbone, 1987).

2.2.3 Steroida

Steroid adalah triterpenoid yang kerangka dasarnya system cincin siklopentana perhidrofenantren. Uji yang biasa digunakan adalah reaksi Lieberman Bourchard yang dengan kebanyakan triterpen dan steroid memberikan warna hijau biru (Harbone, 1987).

Gambar 2. Sruktur Steroida

Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari enam satuan isoprene dan secara biosintesis diturunkan dari hidrokarbon C30 asiklik, yaitu

skualena. Senyawa ini berstruktur siklik yang rumit, kebanyakan berupa alcohol, aldehid atau asam karboksilat. Berupa senyawa warna. Berbentuk Kristal. Sering kali bertitik leleh tinggi dan aktif optic (Harbone, 1987).

2.2.4 Glikosida

Glikosida adalah suatu senyawa yang jika dihidrolisis akan menghasilkan bagian gula yang disebut glikon dan bagian bukan gula disebut aglikon. Gula yang dihasilkan biasanya adalah glukosa, ramnosa, dan lain sebagainya. Jika bagian gulanya adalah glukosa maka disebut glukosida, sedangkan jika bagian gulanya selain glukosa disebut glikosida.

Menurut fransworth (1996), Pembagian glikosida berdasarkan atom yang menghubungkan bagian gula dan bagian bukan gula adalah sebagai berikut :

1. O-glikosida : Jika bagian gula dan bukan gula dihubungkan oleh atom O 2. S-glikosida : Jika bagian gula dan bukan gula dihubungkan oleh atom S 3. N-glikosida : Jika bagian gula dan bukan gula dihubungkan oleh atom N 4. C-glikosida : Jika bagian gula dan bukan gula dihubungkan oleh atom C 2.3 Ekstrak

2.3.1 Pengertian

Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Depkes RI, 1995).

Sebagian besar ekstrak dibuat dengan mengekstraksi bahan baku obat secara perkolasi. Seluruh perkolat biasanya dipekatkan dengan cara destilasi dengan pengurangan tekanan, agar bahan utama obat sesedikit mungkin terkena panas (Depkes RI, 1995).

Ekstraksi adalah suatu proses yang dilakukan untuk memperoleh kandungan senyawa kimia dari jaringan tumbuhan maupun hewan. Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair dibuat dengan menyari simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok, di luar pengaruh cahaya matahari langsung, ekstrak kering harus mudah digerus menjadi serbuk. Cairan penyari yang digunakan air, etanol dan campuran air etanol (Depkes RI, 1979).

2.3.2 Metode Ekstraksi

Menurut Depkes RI (2000), beberapa metode ekstraksi: 1. Cara dingin

i. Maserasi, adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar).

ii. Perkolasi, adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna (exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. 2. Cara panas

i. Refluks, adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik.

ii. Soxhlet, adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik.

iii. Digesti, adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50oC.

iv. Infus, adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 96-98oC) selama waktu tertentu (15-20 menit).

v. Dekok, adalah infus pada waktu yang lebih lama dan temperatur sampai titik didih air.

2.4 Uraian bakteri

Nama bakteri berasal dari kata “bakterion” (bahasa yunani) yang berarti tongkat atau batang. Sekarang nama itu dipakai untuk menyebut sekelompok mikroorganisme yang bersel satu, tidak berklorofil, berbiak dengan pembelahan diri, serta demikian kecilnya sehingga hanya dapat dilihat dengan menggunakan mikroskop (Dwijoseputro, 1982).

Ukuran bakteri bervariasi baik penampang maupun panjangnya, tetapi pada umumnya penampang bakteri adalah sekitar 0,7-1,5 µm dan panjangnya sekitar 1-6 µ m (Tim mikrobiologi FK Unibraw, 2003).

Tubuh bakteri yang terdiri dari satu sel mempunyai bentuk yang beranekaragam. Ada yang berbentuk peluru atau bola (kokus), berbentuk batang (basil), berbentuk koma dan spiral (Tjitrosoepomo, 1994).

Berdasarkan perbedaannya didalam menyerap zat warna gram bakteri dibagi atas dua golongan yaitu bakteri gram positif dan bakteri gram negatif. Bakteri gram positif menyerap zat warna pertama yaitu Kristal violet yang menyebabkan berwarna ungu, sedangkan bakteri gram negatif menyerap zat warna kedua yaitu safranin dan menyebabkannya berwarna merah (Dwijoseputro, 1982).

Bakteri gram positif memiliki kandungan peptidoglikan yang tinggi (dapat mencapai 50 %) dibandingkan bakteri gram negatif (sekitar 10 %). Sebaliknya kandungan lipida dinding sel bakteri gram positif rendah sedangkan pada dinding sel bakteri gram negative tinggi yang berkisar 11-22 % (Lay, 1994).

2.4.1 Pertumbuhan Bakteri

Pertumbuhan dan perkembangan bakteri dipengaruhi oleh: 1. Zat makanan (nutrisi)

Sumber zat makanan bagi bakteri diperoleh dari senyawa karbon, nitrogen, sulfur, fosfor, unsur logam (natrium, kalsium, magnesium, mangan, besi, tembaga dan kobalt), vitamin dan air untuk fungsi-fungsi metabolik dan pertumbuhannya.

2. Keasaman dan kebasaan (pH)

Kebanyakan bakteri mempunyai pH optimum pertumbuhan antara 6,5-7,5, namun beberapa spesies dapat tumbuh dalam keadaan sangat asam atau sangat alkali.

3. Temperatur

Proses pertumbuhan bakteri tergantung pada reaksi kimiawi dan laju reaksi kimia yang dipengaruhi oleh temperatur. Berdasarkan ini maka bakteri dapat diklasifikasikan sebagai berikut:

a. Bakteri psikofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur 0-30oC, temperatur optimum adalah 10-20oC.

b. Bakteri mesofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur 5-60oC, temperatur optimum adalah 25-40oC.

c. Bakteri termofil, yaitu bakteri yang dapat hidup pada temperatur 50-100oC, temperatur optimum adalah 55-65oC.

4. Oksigen

Beberapa spesies bakteri dapat hidup dengan adanya oksigen dan sebaliknya spesies lain akan mati. Berdasarkan kebutuhan akan oksigen, bakteri dapat dikelompokkan sebagai berikut:

a. Aerobik yaitu bakteri yang membutuhkan oksigen untuk

pertumbuhannya.

b. Anaerobik yaitu bakteri yang dapat tumbuh tanpa oksigen.

c. Anaerobik fakultatif yaitu bakteri yang dapat tumbuh dengan oksigen ataupun tanpa oksigen.

d. Mikroaerofilik yaitu bakteri yang dapat tumbuh baik dengan adanya sedikit oksigen.

5. Tekanan osmosa

Medium yang baik bagi pertumbuhan bakteri adalah medium isotonis terhadap isi sel bakteri.

6. Kelembaban

Secara umum bakteri tumbuh dan berkembang biak dengan baik pada lingkungan yang lembab. Kebutuhan akan air tergantung dari jenis bakterinya (Pelczar, 1986).

2.4.2 Media Pertumbuhan Bakteri

Pembiakan bakteri dalam laboratorium memerlukan media yang berisi zat hara serta lingkungan pertumbuhan yang sesuai bagi bakteri. Zat hara diperlukan untuk pertumbuhan, sintesis sel, keperluan energi dalam metabolisme dan pergerakan. Lazimnya, media biakan mengandung air, sumber energi, zat hara sebagai sumber karbon, nitrogen, sulfur, fosfat, oksigen dan hidrogen. Dalam bahan

dasar media dapat pula ditambahkan faktor pertumbuhan berupa asam amino dan vitamin. Media biakan dikelompokkan dalam beberapa kategori, yaitu:

1. Bedasarkan asalnya, media dibagi atas:

a. Media sintetik yaitu media yang kandungan dan isi bahan yang ditambahkan diketahui secara terperinci. Contoh: glukosa, kalium fosfat, magnesium fosfat. b. Media non-sintetik yaitu media yang kandungan dan isinya tidak diketahui

secara terperinci dan menggunakan bahan yang terdapat di alam. Contohnya: ekstrak daging, pepton (Lay, 1994).

2. Berdasarkan kegunaannya, dapat dibedakan menjadi: a. Media selektif

Media selektif adalah media biakan yang mengandung paling sedikit satu bahan yang dapat menghambat perkembang biakan mikroorganisme yang tidak diinginkan dan membolehkan perkembang biakan mikroorganisme tertentu yang ingin diisolasi.

b. Media diferensial

Media ini digunakan untuk menyeleksi suatu mikroorganisme dari berbagai jenis dalam suatu lempengan agar.

c. Media diperkaya

Media ini digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme yang diperoleh dari lingkungan alami karena jumlah mikroorganisme yang ada terdapat dalam jumlah sedikit

3. Berdasarkan konsistensinya, dibagi atas : a. Media padat/ solid

c. Media semi padat

Media padat diperoleh dengan menambahkan agar. Agar berasal dari ganggang merah. Agar digunakan sebagai bahan pemadat karena tidak diuraikan oleh mikroorganisme dan membeku pada suhu diatas 450C. Kandungan agar sebagai bahan pemadat dalam media 1,5-2 %.

2.4.3 Fase Pertumbuhan Bakteri

Bakteri mengalami pertumbuhan melalui beberapa fase, yaitu: 1) Fase lag

Pada saat dipindahkan ke media yang baru, bakteri tidak langsung tumbuh dan membelah, meskipun kondisi media sangat mendukung untuk pertumbuhan. Bakteri biasanya akan mengalami masa penyesuaian untuk menyeimbangkan pertumbuhan.

2) Fase log

Selama fase ini, populasi meningkat dua kali pada interval waktu yang teratur. Jumlah koloni bakteri akan terus bertambah seiring lajunya aktivitas metabolisme sel.

3) Fase tetap

Pada fase ini terjadi kompetisi antara bakteri untuk memperoleh nutrisi dari media untuk tetap hidup. Sebagian bakteri mati sedangkan yang lain tumbuh dan membelah sehingga jumlah sel bakteri yang hidup menjadi tetap.

4) Fase kematian

Pada fase ini, sel bakteri akan mati lebih cepat daripada terbentuknya sel baru. Laju kematian mengalami percepatan yang eksponensial (Lee, 1983).

Gambar 3. Grafik pertumbuhan bakteri Keterangan :

a : Lag phase b : Log phase c : Stationary phase d : Death phase

2.4.4 Bakteri Staphylococcus aureus

Sistematika bakteri (Tjitrosoepomo, 1994) : Divisio : Schizophyta

Kelas : Schizomycetes Bangsa : Eubacteriales Suku : Micrococcaceae Marga : Staphylococcus

Jenis : Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus merupakan bakteri gram positif yang bersifat aerob

atau anaerob fakultatif, tes katalase positif dan tahan hidup dalam lingkungan yang mengandung garam dengan konsentrasi tinggi (halofilik), misalnya NaCl 10%. Hasil pewarnaan yang berasal dari pembenihan padat akn memperlihatkan susunan bakteri yang bergerombol seperti buah anggur. Untuk membiakkan bakteri Staphylococcus

aureus diperlukan suhu optimal sekitar 350C dan pH optimal untuk pertumbuhan

Bakteri ini terdapat pada kulit, selaput lendir, bisul dan luka. Dapat menimbulkan penyakit melalui kemampuannya berkembang biak dan menyebar luas dalam jaringan dan melalui pembentukan berbagai zat ekstraseluler seperti enzim dan toksin (Jawetz, dkk, 2001).

2.4.5 Bakteri Staphylococcus Epidermidis

Sistematika bakteri (Tjitrosoepomo, 1994) : Divisio : Eukariota

Kelas : Schizomycetes Bangsa : Eubacteriales Suku : Micrococcaceae Marga : Staphylococcus

Jenis : Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri gram positif, aerob atau

anaerob fakultatif berbentuk bola atau kokus berkelompok tidak teratur, diameter 0,8-1,0 µm tidak membentuk spora dan tidak bergerak, koloni berwarna putih bakteri ini tumbuh cepat pada suhu 370C. Koloni pada pembenihan padat berbentuk bulat halus, menonjol, berkilau, tidak meghasilkan pigmen, berwarna putih porselin sehingga

staphylococcus epidemidis disebut staphylococcus albus, koagulasi-negatif dan tidak meragi manitol (Jawetz et al, 2001).

Staphylococcus epidermidis terdapat pada kulit, selaput lender, bisul dan luka. Dapat menimbulkan penyakit melalui kemampuannya berkembang biak menyebar luas dalam jaringan (Jawetz et al, 2001).

2.4.6 Bakteri Pseudomonas aeruginosa

Sistematika bakteri (Buchanan dan Gibbons, 1974) : Divisio : Protophyta

Kelas : Schizomycetes Bangsa : Pseudomonadales

Suku : Pseudomonadaceae

Marga : Pseudomonas

Jenis : Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri gram negative aerob obligat,

berbentuk batang, bergerak, berukuran sekitar 0,5-8 x 1,5-3,0 µm, terlihat sebagai bakteri tunggal, berpasangan dan kadang-kadang membentuk rantai yang pendek.

Pseudomonas aeruginosa membentuk koloni halus bulat dengan warna floresensi

kehijauan. Bakteri ini menghasilkan piosianin, suatu pigmen kebiru-biruan yang tak berfloresensi, yang berdifusi ke dalam agar. Floresensi dapat dihasilkan bila biakan diinkubasi pada suhu 20-300C dari pada yang dibiakkan pada suhu 35-370C.

Pseudomonas aeruginosa tersebar luas di alm dan biasanya terdapat di

lingkungan yang lembab. Bakteri ini menyebabkan penyakit bila pertahanan tubuh inang abnormal. Dalam jumlah kecil, bakteri ini sering terdapat dalam flora usus normal dan pada kulit manusia serta merupakan pathogen utama dari kelompok Pseudomonas. Bakteri ini menimbulkan infeksi pada luka, meningitis, infeksi saluran kemih, dan infeksi mata (Jawetz et al, 2001).

2.3.7 Pengukuran Aktivitas Antibakteri

Pengukuran aktivitas antibakteri dapat dilakukan dengan metode dilusi (pengenceran) atau dengan metode difusi (jawetz et al, 2001)

a. Metode Dilusi

Metode ini menggunakan antimikroba dengan kadar yang menurun secara bertahap, baik dengan media cair atau padat. Kemudian media diinokulasi bakteri uji dan dieramkan. Tahap akhir dilarutkan antimikroba dengan kadar yang menghambat atau mematikan. Uji kepekaan cara dilusi agar memakan waktu dan penggunaannya dibatasi pada keadaan tertentu saja (Jawetz et al, 2001).

b. Metode Difusi

Metode yang paling sering digunakan adalah metode difusi agar. Cakram kertas saring berisi sejumlah tertentu obat ditempatkan pada permukaan medium padat yang sebelumnya telah diinokulasi bakteri uji pada permukaannya. Setelah inkubasi, diameter zona hambatan sekitar cakram dipergunakan mengukur kekuatan hambatan obat terhadap organisme uji. Metode ini dipengaruhi oleh beberapa faktor fisik dan kimia, selain faktor antara obat dan organisme (misalnya sifat medium dan kemampuan difusi, ukuran molekular dan stabilitas obat). Meskipun demikian, standarisasi faktor-faktor tersebut memungkinkan melakukan uji kepekaan dengan baik (Jawetz et al, 2001).

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN 3.1 Lokasi dan waktu penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Januari-Maret 2011 di Laboratorium Obat Tradisional Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara dan Laboratorium Kesehatan Medan.

3.2 Metode Penelitian

Penelitian dilakukan dengan metode eksperimental dengan tahapan meliputi pengumpulan sampel dan pembuatan simplisia, pemeriksaan karakteristik simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak, dan uji aktivitas antibakteri dari ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan

Pseudomonas aeruginosa. Penentuan aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air

dilakukan dengan metode difusi agar. Prinsip metode ini adalah menggunakan media padat dan cakram kertas, kemudian daya hambat (zona jernih) bakteri ditentukan dengan mengukur diameter daerah hambat pertumbuhan.

3.3 Alat dan Bahan 3.3.1 Alat

Alat- alat yang digunakan adalah seperangkat alat perkolator, Alat-alat gelas, blender (National), oven listrik (Fisher scientific), Neraca kasar (Ohaus), Neraca listrik (Mettler Toledo), rotary evaporator (Haake D), freeze dryer (Modulio), seperangkat alat destilasi, cawan porselin berdasar rata, desikator, aluminium foil, cawan porselin, mikroskop (Olympus), tanur (Ney M 525 Series II), krus porselin, objek glass, deck glass, autoklaf (Webeco), inkubator (Memmert), penangas air,

spatula, lemari pendingin (Toshiba), jarum ose, pinset, kertas cakram, lampu bunsen, lemari pengering, kertas Perkamen, cawan Petri, jangka sorong.

3.3.2 Bahan

Bahan-bahan yang digunakan adalah daun pacar air, bahan-bahan kimia pro analisa, kecuali dinyatakn lain: air suling, asam klorida encer, asam klorida pekat, besi (III) klorida, alfa naftol, bismuth (III) nitrat, timbal (II) asetat, Merkuri (II) klorida, asam sulfat pekat, n-heksan, kalium iodida, iodium, isopropanol, metanol, barium klorida, asam asetat anhidrat, larutan fisiologi NaCl 0,9 %, Serbuk magnesium, amil alkohol, kloralhidrat, toluen, kloroform, Muller Hinton Agar (MHA), Nutrient Agar (NA), Suspensi standar Mc.Farland, biakan bakteri

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 dan Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.

3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi 3.4.1 Larutan pereaksi Mayer

Campurkan 60 ml larutan Raksa (II) Klorida dan 10 ml larutan Kalium Iodida, tambahkan air secukupnya hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.2 Larutan pereaksi Dragendorff

Campur 20 ml larutan Bismuth (III) Nitrat dalam Asam Nitrat lalu tambahkan dengan 50 ml larutan Kalium Iodida diamkan sampai memisah sempurna. Ambil larutan jernih dan encerkan dengan air secukupnya hingga 100 ml (Depkes RI, 1995). 3.4.3 Larutan pereaksi Bouchardat

Sebanyak 4 g Kalium Iodida dilarutkan dalam 20 ml air suling kemudian ditambah 2 g Iodium sambil diaduk sampai larut, lalu cukupkan dengan air suling hingga 100 ml (Depkes RI, 1980).

3.4.4 Larutan pereaksi Lieberman-Bourchard

Campurkan 5 bagian volume Asam Sulfat dengan 50 bagian volume etanol. Tambahkan hati-hati 5 bagian volume Asetat Anhidrat ke dalam campuran tersebut, dinginkan (Depkes RI, 1995).

3.4.5 Larutan pereaksi Molish

Ditimbang sebanyak 3 g Alfa Naftol dilarutkan dalam Asam Nitrat 0,5 N secukupnya hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.6 Larutan pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M

Ditimbang sebanyak 15,17 g Timbal (II) Asetat dilarutkan dalam air hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.7 Larutan peraksi Besi (III) Klorida 1 %

Ditimbang sebanyak 1 g Besi (III) Klorida dilarutkan dalam air suling hingga diperoleh larutan 100 ml kemudian disaring (Depkes RI, 1995).

3.4.8 Larutan pereaksi Asam Sulfat 2 N

Sebanyak 5,5 ml Asam Sulfat pekat diencerkan dengan air suling hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.9 Larutan Pereaksi Asam Klorida 2 N

Sebanyak 17 ml Asam Klorida pekat diencerkan dengan air suling hingga 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4.10 Larutan pereaksi Kloralhidrat

3.5 Penyiapan Bahan Tumbuhan 3.5.1 Identifikasi Tumbuhan

Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Bogoriense Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI. Hasil identifikasi tumbuhan dapat dilihat pada lampiran 1 halaman 42.

3.5.2 Pengumpulan Tumbuhan

Pengumpulan sampel dilakukan secara purposif yaitu tanpa membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Bahan yang digunakan untuk penelitian adalah daun pacar air yang bunganya berwarna ungu, bagian daun yang diambil daun yang tidak terlalu muda dan tidak terlalu tua yaitu daun keempat dari atas dan daun kedua dari bawah. Daun pacar air diambil dari lahan kebun di daerah Pales Raya VII, Medan. Gambar tumbuhan pacar air dan daun pacar air segar dapat dilihat pada lampiran 2 halaman 43.

3.5.3 Pembuatan Simplisia

Pembuatan daun pacar air dilakukan dengan cara daun pacar air yang masih segar dibersihkan dari kotoran yang melekat kemudian dicuci dengan air bersih, ditiriskan dan ditimbang berat basahnya 5,5 kg. Daun pacar air selanjutnya dikeringkan dalam lemari pengering pada suhu 40-600C sampai simplisia rapuh (sekitar satu minggu). Kemudian ditimbang berat kering simplisia yaitu 0,500 kg. Selanjutnya simplisia diserbuk menggunakan blender dan ditimbang beratnya 0,480 kg. Kemudian disimpan dalam wadah plastik yang tertutup rapat. Gambar simplisia daun pacar air dapat dilihat pada lampiran 2 halaman 44.

3.6 Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia

Pemeriksaan karakteristik simplisia yang meliputi pemeriksaan makroskopik, mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari yang larut dalam air, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol, penetapan kadar abu total dan penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam (Depkes RI, 1989).

3.6.1 Pemeriksaan Makroskopik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan terhadap daun pacar air segar dan simplisia daun dengan cara mempehatikan bentuk, bau, warna dan rasa. Hasil pemeriksaan makroskopik dapat dilihat pada lampiran 2 halaman 43 dan 44.

3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopik

Pemeriksaan ini dilakukan terhadap irisan melintang dari daun pacar air segar dan serbuk simplisia. Pemeriksaan mikroskopik untuk irisan melintang tumbuhan segar dilakukan sebagai berikut: dibuat irisan melintang daun pacar air. Hasil irisan tipis diletakkan di atas objek gelas lalu ditetesi larutan kloralhidrat, dipanaskan dengan lampu spiritus, ditutup dengan kaca penutup dan dilihat di bawah mikroskop pada berbagai perbesaran. Hasil pemeriksaan dilihat pada lampiran 3 halaman 45.

Pemeriksaan mikroskopik untuk serbuk simplisia dilakukan sebagai berikut: sejumlah serbuk simplisia diletakkan merata di atas objek gelas yang telah ditetesi larutan kloralhidrat, ditutup dengan kaca penutup dan dilihat di bawah mikroskop pada berbagai perbesaran. Hasil pemeriksaan dilihat pada lampiran 3 halaman 46. 3.6.3 Penetapan Kadar Air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (Destilasi Toluen). Kedalam labu alas bulat di masukkan 200 ml toluena dan 2 ml air suling, destilasi selama 2 jam, biarkan menjadi dingin selama 30 menit dan volume air dalam tabung

penampung dibaca. Selanjutnya ke dalam labu dimasukkan 5 gram serbuk simplisia lalu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluena mendidih, kecepatan tetesan diatur yaitu 2 tetesan per detik sampai sebagian air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes per detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluena. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penampung dibiarkan dingin sampai sama dengan suhu kamar. Setelah air dan toluena memisah sempurna, dibaca volume air dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air di dalam bahan yang diperiksa (WHO, 1992).

3.6.4 Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Air

Sebanyak 5 gram serbuk simplisia yang telah dikeringkan di udara dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml campuran air dan kloroform (2,5 ml kloroform dalam air sampai 1000 ml) dalam labu bersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Disaring, sejumlah 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan dangkal berdasar rata dan telah ditara, sisanya dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar sari larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1989).

3.6.5 Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Etanol

Sebanyak 5 gram serbuk simplisia yang telah dikeringkan di udara dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring, 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara dan sisanya dipanaskan pada suhu 105oC sampai bobot tetap. Kadar

sari larut dalam etanol dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1989).

3.6.6 Penetapan Kadar Abu Total

Sebanyak 2 gram serbuk yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar pada suhu 600oC sampai arang habis. Selanjutnya didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (WHO, 1992).

3.6.7 Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut dalam Asam

Abu yang telah diperoleh dalam penetapan kadar abu total dididihkan dalam 25 ml asam klorida 2 N selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring bebas abu dan dicuci dengan air panas. Residu dan kertas saring dipijar pada suhu 600oC sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (WHO, 1992).

3.7 Skrining fitokimia

Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak daun pacar air meliputi pemeriksaan senyawa golongan glikosida, alkaloida, steroida/triterpenoida, flavonoida, tanin dan saponin.

3.7.1 Pemeriksaan Glikosida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 3 g kemudian disari dengan 30 ml campuran 7 ml bagian etanol 96 % dan 3 bagian volum air suling ditambah dengan 10 ml HCL 2 N. Direfluks selama 30 menit, didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, lalu

didiamkan selama 5 menit dan disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran 3 bagian kloroform dan 2 isopropanol dilakukan berulang sebanyak tiga kali. Kumpulan sari air diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 500C. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Kemudian diambil 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan kedalam tabung reaksi, diuapkan di penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molish. Kemudian secara perlahan ditambahkan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, jika terbentuk cincin ungu pada batas kedua cairan menunjukkan adanya glikosida (Depkes RI, 1989).

3.7.2 Pemeriksaan Alkaloida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida dan 9 ml air suling, dipanaskan air selama 2 menit, didinginkan lalu disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut :

a. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer. b. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Bourchardat. c. Diambil 3 tetes filtrat, lalu ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendroff. Alkaloida dianggap positif jika terjadi endapan atau paling sedikit dua atau tiga dari percobaan diatas (Depkes RI, 1989).

3.7.3 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida

Sebanyak 1 g sampel di maserasi dengan 20 ml n-heksan selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbul warna ungu merah menunjukkan adanya triterpenoida atau warna hijau biru menunjukkan adanya steroida (Farnsworth, 1966).

3.7.4 Pemeriksaan Flavonoida

Sebanyak 10 g sebuk simplisia kemudian ditambahkan 100 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, filtrat yang diperoleh kemudian diambil 5 ml lalu di tambahkan 0,1 g serbuk Mg dan 1 ml HCl pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok, dan dibiarkan memisah. Flavonoida positif jika terjadi warna merah, kuning, jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966).

3.7.5 Pemeriksaan Tanin

Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 ml air suling, disaring lalu filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Diambil 2 ml larutan lalu ditambahkan 1 sampai 2 ttes pereaksi besi (III) klorida. Terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).

3.7.6 Pemeriksaan Saponin

Sebanyak 0,5 g sampel dimasukkan dalam tabung reaksi dan di tambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi 1-10 cm. Ditambahkan 1 tetes larutan asam klorida 2 N, bila buih tidak hilang menunjukkan adanya saponin (Depkes RI, 1989).

3.8 Pembuatan Ekstrak

Pembuatan ekstrak dilakukan dengan cara perkolasi. Prosedur pembuatan ekstrak : sebanyak 300 gram serbuk simplisia dibasahi dengan etanol 96 % dan dibiarkan selama 3 jam. Kemudian dimasukkan ke dalam perkolator. Lalu dituang cairan penyari etanol sampai semua simplisia terendam, mulut tabung perkolator ditutup dengan aluminium foil dan biarkan selama 24 jam, kemudian kran dibuka dan biarkan cairan menetes dengan kecepatan 1 ml per menit, perkolat ditampung,

ditambahkan berulang-ulang cairan penyari secukupnya hingga selalu terdapat selapis cairan penyari diatas simplisia. Perkolasi dihentikan hingga bila 500 mg perkolat yang keluar terakhir diuapkan tidak meninggalkan sisa. Perkolat yang diperoleh dipekatkan dengan alat penguap rotary evaporator pada tekanan rendah dengan suhu tidak lebih dari 500C setelah itu dipekatkan menggunakan freeze dryer hingga diperoleh ekstrak kental (Ditjen POM, 1979). Bagan pembuat ekstrak dapat dilihat pada lampiran 4 halaman 49.

3.9 Sterilisasi Alat

Sterilisasi untuk alat-alat yang digunakan antara lain:

1. Alat–alat yang terbuat dari gelas dibungkus dengan kertas perkamen, disterilkan menggunakan oven pada suhu 1700C selama 1 jam.

2. Alat-alat jenis lainnya seperti kertas cakram, media disterilkan di autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit.

3. Jarum ose dan pinset disterilkan dengan cara dibakar pada lampu bunsen. 4. Sebelum mulai daerah sekitar pengerjaan disemprot dengan etanol 70% dan

dibiarkan selama 15 menit sebelum digunakan.

5. Meja dibersihkan dari debu dan dilap menggunakan desinfektan (Lay, 1994). 3.10 Pembuatan media

3.10.1 Nutrient Agar

Komposisi : Beef extract 3,0 g

Peptone 5,0 g

Agar 15,0 g

Cara pembuatan: Ditimbang sebanyak 23 g serbuk nutrient agar kemudian disuspensikan dalam erlenmeyer dengan air suling yang ditambahkan sedikit demi

sedikit hingga 1000 ml, dipanaskan hingga mendidih sambil sekali-kali diaduk sampai bahan larut sempurna dan jernih. Tutup erlenmeyer dengan kapas yang dilapisi dengan aluminium foil. Disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121oC tekanan 2 atm selama 15 menit.

3.10.2 Muller Hinton Agar (MHA)

Komposisi : Beef infusion from 300 g

Casein hydrolysate 17,5 g

Starch 1,50

Bacto – Agar 17,0 g

pH = 7,4

Cara pembuatan: Ditimbang sebanyak 38 g serbuk MHA kemudian disuspensikan dalam erlenmeyer dengan air suling yang ditambahkan sedikit demi sedikit hingga 1000 ml, dipanaskan hingga mendidih sambil sekali-kali diaduk sampai bahan larut sempurna dan jernih. Tutup erlenmeyer dengan kapas yang dilapisi dengan aluminium foil. Disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121oC tekanan 2 atm selama 15 menit.

3.10.3 Pembuatan Larutan NaCl 0,9%

Komposisi: Natrium Klorida 0,9 g Air suling steril ad 100 ml

Cara pembuatan: Ditimbang sebanyak 0,9 g Natrium klorida lalu dilarutkan dalam air suling steril sedikit demi sedikit dalam labu takar 100 ml sampai larut sempurna. Ditambahkan air suling steril sampai garis tanda, dimasukkan dalam erlenmeyer steril yang bertutup lalu disterilkan pada autoklaf suhu 121oC tekanan 2 atm selama 15 menit.

3.10.4 Pembuatan Suspensi standar Mc.Farland

Suspensi standar yang menunjukkan konsentrasi kekeruhan suspensi bakteri sama dengan 108 CFU/ml.

Komposisi: Larutan asam sulfat 1% 9,5 ml

Larutan barium klorida 1,175% b/v 0,5 ml Cara pembuatan:

Kedua larutan dicampurkan dalam tabung reaksi steril, dikocok sampai homogen dan ditutup. Apabila kekeruhan hasil suspensi bakteri sama dengan kekeruhan suspensi standar berarti konsentrasi bakteri 108 CFU/ml

3.10.5 Pembuatan Media Agar Miring

10 ml media agar yang telah dimasak dimasukkan kedalam tabung reaksi, ditutup dan di bungkus lalu disterilkan di dalam autoklaf selama 15 menit pada suhu 1210C Kemudian tabung yang berisi agar diletakkan pada kemiringan 30-450C. Diperhatikan bahwa agar tidak menyentuh tutup tabung. Agar dibiarkan menjadi dingin dan keras (Lay, 1994).

3.11 Pembuatan stok kultur bakteri

Masing- masing sebanyak satu ose dari biakan murni bakteri Staphylococcus

aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 dan Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 digoreskan dengan metode sinambung pada permukaan

Nutrien Agar miring, ditutup mulut tabung reaksi dengan kapas. Diinkubasi selama 18-24 jam pada suhu 37oC.

3.12 Pembuatan inokulum bakteri

Bakteri hasil inkubasi dengan menggunakan jarum ose steril lalu disuspensikan kedalam tabung yang berisi 10 ml larutan NaCl 0,9% steril, kemudian

dihomogenkan dengan vorteks hingga diperoleh kekeruhan suspensi bakteri yang sama dengan kekeruhan standart Mc. Farland, ini berarti konsentrasi suspensi bakteri adalah 108 CFU/ml. Setelah itu dilakukan pengenceran dengan memipet 0,1 ml biakan bakteri (108 CFU/ml), dimasukkan kedalam tabung steril yang berisi larutan NaCl 0,9% sebanyak 9,9 ml dan dikocok homogen, maka diperoleh suspensi bakteri dengan konsentrasi 106 CFU/ml.

3.13 Pembuatan pengenceran ekstrak

Sebanyak 5 gram ekstrak kental ditimbang seksama dengan neraca analitik, dilarutkan dalam 5 ml etanol 96% dan dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml. Tambahkan etanol 96% hingga garis tanda dan diperoleh konsentrasi ekstrak 500 mg/ml. Selanjutnya larutan tersebut diencerkan kembali dengan etanol 96% hingga didapat ekstrak dengan konsentrasi 400 mg/ml, 300 mg/ml, 200 mg/ml, 100 mg/ml, 90 mg/ml, 80 mg/ml, 70 mg/ml, 60 mg/ml, 50 mg/ml, 40 mg/ml, 30 mg/ml, 28 mg/ml, 26 mg/ml, 24 mg/ml, 22 mg/ml, 20 mg/ml, 18 mg/ml, 16 mg/ml, 14 mg/ml, 12 mg/ml, 10 mg/ml dan 5 mg/ml.

3.14. Uji Aktivitas Antibakteri

Sebanyak 0,1 ml suspensi bakteri konsentrasi 106 CFU/ml dimasukkan ke dalam cawan petri, kemudian ditambahkan 15 ml media MHA cair (45-500C), lalu dihomogenkan dan didiamkan hingga media memadat. Selanjutnya di atas permukaan media diletakkan kertas cakram dengan menggunakan pinset. Sebanyak 0,1 ml larutan ekstrak konsentrasi 500 mg/ml sampai 5 mg/ml masing-masing diteteskan pada kertas cakram. Sebagai kontrol diteteskan 0,1 ml larutan etanol 96%. Ditutup cawan petri dan dibungkus. Didiamkan selama 10-15 menit kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 18-24 jam. Setelah itu diukur diameter hambat pertumbuhan

bakteri pada daerah bening di sekitar kertas cakram dengan menggunakan jangka sorong. Bagan uji aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air dapat dilihat pada lampiran 4 halaman 50.

Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air dapat dilihat pada lampiran 5 halaman 51, dan gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air dapat dilihat pada lampiran 6-8 halaman 52-55.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Berdasarkan Identifikasi tumbuhan yang dilakukan di Herbarium Bogoriense Bidang Botani Pusat Penelitian biologi-LIPI, identitas sampel tumbuhan adalah

Impatiens balsamina L., suku Balsaminaceae.

Hasil pemeriksaan makroskopik terhadap daun segar yaitu berwarna hijau, bentuk memanjang, berurat jelas dengan tepi yang bergerigi pada bagian tepinya, panjang 10-18 cm dan lebar 2-4 cm. Berdaun tipis, berbau langu, tidak berasa dan cepat layu, panjang tangkai daun berkisar 6-15 cm, bulat dan berwarna hijau kemerahan. Pemeriksaan pada simplisia daun pacar air yaitu daun menggulung, berwana hijau kecoklatan, tidak berbau dan tidak berasa.

Hasil pemeriksaan mikroskopik terhadap daun segar menunjukkan adanya epidermis atas, rambut penutup, palisade, berkas pembuluh, jaringan bunga karang, kristal kalsium oksalat bentuk sapu, kolenkim, stomata dan epidermis bawah. Pemeriksaan serbuk simplisia menunjukkan adanya stomata tipe anomositik, rambut penutup, kalsium oksalat bentuk sapu, dan berkas pembuluh xilem berbentuk spiral.

Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia daun pacar air dapat dilihat pada tabel 4.1 dibawah ini.

Tabel 4.1. Hasil Pemeriksaan Karakteristik Serbuk Simplisia

NO Parameter Hasil Penelitian terdahulu

1 Kadar air 7,32% 7,99%

2 Kadar abu total 2,52 % 1,67%

3 Kadar abu yang tidak larut asam 0,22 % 0,29%

4 Kadar sari yang larut dalam air 24,35 % 17,62%

Dari hasil yang diperoleh pada pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia daun pacar air dan dibandingkan dengan penelitian terdahulu. Hasilnya tidak terlalu jauh. Hal ini dapat terjadi karena lingkungan tempat tumbuh berbeda sehingga mengakibatkan perbedaan kadar kandungan senyawa aktif yang dipengaruhi oleh keadaan tanah, cuaca dan tinggi tanah (Depkes RI, 2000). Hasil ini dibandingkan karena Monografi dari serbuk simplisia dari daun pacar air tidak ditemukan di buku Materia Medika Indonesia.

Penetapan kadar air dilakukan untuk mengetahui apakah simplisia memenuhi persyaratan, karena air merupakan media yang baik untuk tumbuhnya kapang. hasil yang diperoleh pada penetapan kadar air 7,32% berarti standarisasi simplisia memenuhi persyaratan Materia Medika Indonesia yakni tidak lebih 10%. Apabila kadar air simplisia lebih besar dari 10 % maka simplisia tersebut akan mudah ditumbuhi kapang pada saat penyimpanan sehingga mutu simplisia akan menurun (Gunawan dan Mulyani, 1995). Penetapan kadar sari larut air dilakukan untuk mengetahui kadar senyawa yang bersifat polar, sedangkan kadar sari larut dalam etanol untuk mengetahui senyawa yang terlarut dalam etanol baik polar maupun non polar. Penetapan kadar abu total dilakukan untuk mengetahui kadar senyawa anorganik dalam simplisia, misalnya Mg, Ca, Na, Pb, sedangkan penetapan kadar abu tidak larut dalam asam untuk mengetahui kadar senyawa yang tidak larut dalam asam, misalnya silika.

Hasil skrining fitokimia dari serbuk simplisia dan ekstrak daun pacar air dapat dilihat pada tabel 4.2 dibawah ini.

Tabel 4.2. Hasil skrining fitokimia dari daun pacar air

No Parameter

Hasil

Simplisia Ekstrak

1 Alkaloida - -

2 Flavonoida + +

3 Tanin - -

4 Saponin + +

5 Glikosida + +

6 Steroida + +

Keterangan :

+ = Memberikan reaksi - = Tidak memberikan reaksi

Berdasarkan hasil pemeriksaan skrining fitokimia dari simplisia dan ekstrak daun pacar air menunjukkan hasil yang sama bahwa mengandung senyawa kimia golongan flavonoida, saponin, steroida dan glikosida.

Menurut Robinson, (1995) seyawa flavonoida, saponin dan triterpenoida merupakan senyawa kimia yang memiliki potensi sebagai antibakteri dan antivirus.

Hasil penyarian 300 g serbuk simplisia daun pacar air dengan menggunakan pelarut etanol, perkolat diuapkan dengan rotary evaporator, kemudian dikeringkan dengan freeze dryer dan ditimbang. Ekstrak kental diperoleh sebanyak 67,33 g. Ekstrak ini kemudian digunakan untuk uji aktivitas antibakteri terhadap bakteri

Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa.

Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pacar air terhadap bakteri

Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa

Tabel 4.3. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri

Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa. No Konsentrasi Ekstrak etanol mg/ml

Diameter hambat pertumbuhan mikroba (mm)* Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Pseudomonas aeruginosa

1 500 23,3 22,8 22,4

2 400 22,3 21,6 20,6

3 300 20,3 20,3 19,2

4 200 19,4 19,3 18,5

5 100 17,6 16,7 17,4

6 90 16,5 16,4 16,6

7 80 15,7 15,3 15,2

8 70 15,2 15,1 15,0

9 60 14,5 14,2 14,4

10 50 12,9 13,4 13,2

11 40 12,3 11,3 11,2

12 30 11,9 10,2 10,4

13 28 11,6 9,0 9,0

14 26 11,5 8,1 7,7

15 24 10,4 6,5 6,6

16 22 10,4 - -

17 20 10,5 - -

18 18 9,2 - -

19 16 8,3 - -

20 14 7,0 - -

21 12 6,6 - -

22 10 - - -

23 5 - - -

24 Blanko - - -

Keterangan :

* = Rata-rata pengukuran 3 x - = Tidak ada hambatan

Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah metode difusi agar dengan menentukan diameter zona hambat, diameter zona hambat yang semakin meningkat pada kenaikan konsentrasi. Hal ini membuktikan bahwa peningkatan konsentrasi terhadap ekstrak daun pacar air memiliki korelasi positif terhadap peningkatan

diameter zona hambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus

epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa. Kepekaan ketiga jenis bakteri tersebut

terhadap ekstrak daun pacar air berbeda-beda. Konsentrasi 500 mg/ml menunjukkan diameter yang lebih besar dibanding konsentrasi yang lebih rendah. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol akan menghasilkan diameter daerah hambat yang semakin besar pula (Dwidjoseputro, 1982).

Berdasarkan data diatas menunjukkan bahwa ekstrak daun pacar air dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus

epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa. Hasil uji aktivitas dari ekstrak tersebut

diperoleh konsentrasi hambat minimum (KHM) bakteri Pseudomonas aeruginosa dan

Staphylococcus epidermidis sebesar 24 mg/ml sedangkan konsentrasi hambat

minimum (KHM) pada bakteri Staphylococcus aureus sebesar 12 mg/ml. Dengan demikian ekstrak daun pacar air lebih kuat dalam menghambat pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus dibandingkan Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus epidermidis. Bakteri Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri gram negatif

sedangkan bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri gram positif.

Hasil penelitian terlihat bahwa ekstrak daun pacar air memberikan nilai daerah hambat yang efektif sama besar terhadap bakteri gram positif dan gram negatif. Walaupun, bakteri gram positif dan gram negatif memiliki komponen dan struktur dinding sel yang berbeda yaitu dinding sel bakteri gram negatif mengandung komponen lipid lebih banyak (11% -22 %) dari pada struktur dinding bakteri gram positif mengandung komponen lipid lebih sedikit (1% - 4%) (Pelczar, 1986). Tetapi, nilai daerah hambat efektif yang diperoleh sama besar, maka senyawa bioaktif yang

terdapat pada ekstrak daun pacar air memiliki kemampuan yang sama untuk merusak dinding sel pada bakteri gram positif dan gram negatif.

Senyawa flavonoida bekerja pada bakteri dengan cara merusak membran sitoplasma. Membran sitoplasma bakteri yang berfungsi mengatur masuknya bahan makanan dan nutrisi, apabila membran sitoplasma rusak maka metabolit penting dalam bakteri akan keluar dan bahan makanan untuk menghasilkan energi tidak dapat masuk sehingga sel bakteri tidak mampu tumbuh dan akhirnya terjadi kematian (Dzen, 2003).

Berdasarkan data diatas dapat dilihat bahwa ekstrak daun pacar air pada konsentrasi 60 mg/ml terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus

epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa memberikan batas daerah hambat yang

efektif masing-masing dengan diameter 14,5 mm, 14,2 mm dan 14,4 mm. Batas daerah hambat dinilai efektif apabila memiliki diameter daya hambat lebih kurang 14 mm sampai 16 mm (Depkes RI, 1995).

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan

Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia daun pacar air diperoleh kadar air 7,32%, kadar sari yang larut dalam air 23,45 %, kadar sari yang larut dalam etanol 13,41 %, kadar abu total 2,52 % dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,22 %.

Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun pacar air menunjukkan adanya kandungan senyawa flavonoida, saponin, steroida dan glikosida. Flavonoida adalah senyawa aktif antibakteri.

Ekstrak daun pacar air mempunyai aktivitas antibakteri. Aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air pada konsentrasi 60 mg/ml terhadap bakteri Staphylococcus

aureus, Staphylococcus epidermidis dan Pseudomonas aeruginosa memberikan batas

daerah hambat yang efektif masing-masing dengan diameter 14,5 mm, 14,2 mm dan 14,4 mm. Konsentrasi hambat minimum (KHM) terhadap bakteri Staphylococcus

aureus adalah 12 mg/ml, terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis adalah 24

mg/ml dan terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa adalah 24 mg/ml. 5.2 Saran

Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk membuat formulasinya dalam pemakaian topikal dan dijadikan sediaan sebagai antibakteri terhadap infeksi pada kulit.

DAFTAR PUSTAKA

Adfa, Morina. (2007). Senyawa Antibakteri Dari Daun Pacar Air (Impatiens Balsamina L.), Jurnal Gradien Vol.4(1).Bengkulu: Jurusan Kimia,

Universitas Bengkulu. Halaman 318-322.

Bustomi, (2010). Skrining Fitokimia Dan Isolasi Senyawa Flavonoid Dari Tumbuhan Pacar Air (Impatiens Balsamina L.). Skripsi tidak diterbitkan Medan: Fakultas Farmasi USU Medan. Halaman 47.

Dalimartha, S. (2003). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid III. Jakarta: Puspa Swara. Halaman 198.

Depkes RI. (1980). Materia Medika Indonesia. Jilid IV. Cetakan Pertama. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan. Halaman 94-98.

Depkes RI. (1989). Materia Medika Indonesia. Jilid V. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan. Halaman 513-520, 536, 539-540,549-552. Depkes RI. (1994). Inventaris Tanaman Obat Indonesia (III). Jakarta: Badan

Penelitian Dan Pengembangan Kesehatan. Halaman 101.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Cetakan Keenam. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan. Halaman 195-199. Depkes RI. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:

Direktorat Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan. Halaman 5, 9-11.

Depkes RI. (2007). Kebijakan Obat Tradisional Nasional. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 6, 9.

Depkes RI. (2006). Kotranas. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 1,8 Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen

Kesehatan RI. Halaman 9.

Djauhariyah. (2004). Gulma Berkhasiat Obat. Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman 57 Dwidjoseputro. (1982). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Penerbit D. Jambatan.

Halaman 38, 134.

Dzen, S.M. (2003). Bakteriologi Medical. Edisi I. Cetakan I. Malang : Bayumedia publishing. Halaman 134.

Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plants.

Gunawan, D Dan Mulyani, S. (1995). Ilmu Obat Alam. Cermin Dunia Kedokteran. Halaman 9-13.

Harbone, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Terbitan Kedua. Penerjemah: Kosasih. Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 49.

Hariana, A. (2008). Tumbuhan Obat dan Khasiat. Jilid II. Jakarta: Penebar Swadaya. Halama 151-153.

Lay, BW. (1994). Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: PT. Raja Grafindo Persada. Halaman 67-71.

Lee, J. (1983). Microbiology. First Edition. USA: The Barnes and Nobel Outline Series. Pages 57-58.

Jawetz E, Melnick GE, and Adelberg CA. (2001). Mikrobiologi Kedokteran. Edisi I. Penerjemah: Bagian Mikrobiologi Kedokteran Universitas Airlangga. Surabaya: Penerbit Salemba Medika. Halaman 211-249.

Markham, K.R. (1988). Cara Mengidentifikasi Flavonoida. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 23-47.

Mursito. (2001). Ramuan Tradisional Untuk Kesehatan Anak. Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman 2.

Pelczar. (1986). Dasar-dasar Mikrobiologi. Penerjemah: Hadieoetomo,R.S., Imas,T., Tjitrosomoso, S., dan Lestari, S. Jakarta: Penerbit UI Press. Halaman 132. Radji, M. (2010). Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan

Kedokteran. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 185, 201.

Robinson, T. (1995). Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Penerjemah: Padmawinata, K. Edisi VI. Bandung: ITB Press. Halama 71.

Tim Mikrobiologi FK Universitas Brawijaya. (2003). Bakteriologi Medik. Cetakan Pertama. Malang: Bayu Media Publishing.

Tjitrosoepomo, G. (1994). Taksonomi Tumbuhan (Schizophyta, Thallophyta,

bryophyte, Pteridophyta). Yogyakara: Gadjah Mada University Press.

Halaman 4-20.

World Health Organization. (1992). Quality Control Methods for Medicinal Plant

Lampiran 2 : Gambar Tumbuhan Pacar air dan Daun Pacar Air

Lampiran 4 : Gambar Mikroskopik Penampang Melintang Daun Segar Pacar Air

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Keterangan : 1.Rambut penutup, 2.Epidermis atas, 3.Jaringan palisade, 4.Kalsium oksalat bentuk sapu, 5.Jaringan bunga karang, 6.Xilem, 7.Floem, 8.Stomata, 9.Kolenkim, 10.Epidermis bawah

Lampiran 5 : Gambar Mikroskopik serbuk simplisia Daun Pacar Air

Keterangan : 1.Rambut penutup, 2.Stomata tipe anomositik, 3.Berkas pembuluh xilem bentuk spiral, 4.Sel epidermis, 5.Kalsium oksalat bentuk sapu, 6.Palisade

Lampiran 6 : Kerangka Percobaan

Dicuci dari pengotor sampai bersih

Ditiriskan dan ditimbang

Dikeringkan di dalam lemari pengering

Dihaluskan

Diperkolasi dengan etanol 96%

Diuapkan dengan alat penguap

rotary evaporator

Di freeze dryer

Gambar 3. Bagan Penelitian

Daun pacar air

Simplisia Simplisia Serbuk Skrining Fitokimia Pembuatan Ekstrak Karakterisasi Ekstrak Kental Uji Aktivitas Antibakteri Daun Pacar Air

− Tanin − Alkaloida − Flavonoida − Saponin − Glikosida − Steroida/Triterpenoida Perkolat Skrining Fitokimia

−Pemeriksaan Makroskopik simplisia

−Pemeriksaan Mikroskopik bahan segar dan serbuk simplisia

−Penetapan Kadar Air

− Penetapan Kadar Sari yang Larut Air

− Penetapan Kadar Sari yang Larut Etanol

− Penetapan Kadar Abu Total

− Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut Asam

Lampiran 6 : (Lanjutan)

Dicuci dengan air hingga bersih Ditiriskan

Ditimbang

Dikeringkan di dalam lemari pengering pada suhu 40-500C

Diblender Ditimbang

Gambar 4. Bagan Pembuatan Simplisia Daun pacar air Segar

Daun pacar air 5,5 kg

Simplisia daun pacar air 500 g

Serbuk Simplisia daun pacar air 480 g

Lampiran 6 : (Lanjutan)

Dibasahi dengan cairan penyari sedikit demi sedikit

Direndam dalam bejana tertutup dengan etanol 96% selama 3 jam

Dimasukkan ke dalam alat perkolator Dituangkan cairan penyari etanol secukupnya sampai semua terendam Ditutup mulut tabung perkolator dengan aluminium foil

Dibiarkan selama 24 jam

Dibuka kran dan dibiarkan tetesan mengalir hingga pelarut tidak lagi meninggalkan sisa bila diuapkan di penangas air

Disaring

Diuapkan dengan rotary evaporator dan dipekatkan dengan freeze dryer

Gambar 5. Bagan Pembuatan Ekstrak Serbuk Simplisia 300 g serbuk simplisia

daun pacar air

Perkolat Ampas

Ekstrak kental 67,33 g

Lampiran 6 : (Lanjutan)

Dituangkan ke cawan petri steril Ditambahkan media 15 ml

Dihomogenkan dengan cara digoyang membentuk angka delapan

Dibiarkan memadat

Dibuat cakram kertas berdiameter 7 mm Ditetesi 0,1 ml ekstrak daun pacar air dengan konsentrasi yang berbeda Pra inkubasi selama 15 menit

Diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam untuk bakteri

Gambar 6. Bagan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Pacar Air 0,1 ml inokulum bakteri

Mikroba pada Media

Diukur daya hambat dengan menggunakan

Lampiran 7 : Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak daun pacar air

Konsentrasi ekstrak etanol mg/ml

Diameter hambatan minimum (mm)

Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Pseudomonas aeruginosa

I II III D* I II III D* I II III D*

500 23,5 23,2 23,4 23,3 22,9 22,8 22,8 22,8 22,6 22,2 22,5 22,4

400 22,7 22,0 22,2 22,3 21,8 21,7 21,4 21,6 20,8 20,4 20,7 20,6

300 20,5 20,1 20,3 20,3 20,5 20,3 20,1 20,3 19,5 19,0 19,1 19,2

200 19,6 19,2 19,4 19,4 19,6 19,4 19,0 19,3 18,7 18,3 18,5 18,5

100 17,8 17,5 17,6 17,6 17,2 16,8 16,3 16,7 17,8 17,1 17,3 17,4

90 16,8 16,3 16,4 16,5 16,6 16,4 16,3 16,4 16,7 16,6 16,5 16,6

80 16,0 15,5 15,8 15,7 15,7 15,3 15,0 15,3 16,1 15,6 15,9 15,8

70 15,4 15,0 15,2 15,2 15,4 15,1 14,8 15,1 15,7 14,5 14,8 15,0

60 14,8 14,3 14,6 14,5 14,5 14,3 14,0 14,2 14,8 14,2 14,3 14,4

50 13,3 12,6 12,9 12,9 13,3 13,0 12,9 13,4 13,4 13,0 13,2 13,2

40 12,5 12,1 12,3 12,3 12,3 11,4 11,2 11,3 11,3 11,2 11,3 11,2

30 12,4 11,6 11,8 11,9 10,6 10,1 10,1 10,2 10,7 10,2 10,3 10,4

28 11,9 11,6 11,4 11,6 9,3 9,5 8,3 9,0 9,2 9,0 8,8 9,0

26 11,7 11,5 11,5 11,5 7,4 8,4 8,4 8,1 8,5 7,6 7,2 7,7

24 10,5 10,3 10,4 10,4 6,4 6,2 7,0 6,5 6,3 6,3 7,2 6,6

22 10,6 10,5 10,3 10,4 - - - -

20 10,7 10,3 10,4 10,5 - - - -

18 9,6 9,2 9,0 9,2 - - - -

16 8,5 8,2 8,4 8,3 - - - -

14 7,2 6,9 6,9 7,0 - - - -

12 6,5 6,6 6,8 6,6 - - - -

10 - - - - - -

5 - - - - - -

Blanko - - - - - -

Lampiran 8 : Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Staphylococcus aureus

60 mg/ml

Staphylococcus aureus

90 mg/ml

100 mg/ml 200 mg/ml

Staphylococcus aureus

500 mg/ml

300 mg/ml

400 mg/ml

70 mg/ml 80 mg/ml

Staphylococcus aureus

60 mg/ml

50 mg/ml

30 mg/ml 40 mg/ml

Lampiran 8 : (Lanjutan)

Staphylococcus aureus

14 mg/ml 12 mg/ml

28 mg/ml 26

mg /ml

24 mg/ml

Staphylococcus aureus

20 mg/ml

18 mg/ml

22 mg/ml

Staphylococcus aureus

Lampiran 9 : Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Staphylococcus epidermidis

500 mg/ml

400 mg/ml 300 mg/ml

200 mg/ml

90 mg_/ ml 90 mg/ml

Staphylococcus epidermidis

40 mg/ml

50 mg_/ ml

30 mg/ml 70 mg/ml

60 mg/ml

80 mg_/ ml

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus epidermidis Staphylococcus epidermidis

500 mg/ml

100 mg/ml

Staphylococcus epidermidis

26 mg/ml 28 mg/ml

Lampiran 10 : Gambar Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ekstrak daun pacar air terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa

200 mg/ml 90 mg

/ml

40 mg/ml 30 mg/ml

500 mg/ml

100 mg/ml

400 mg/ml

500 mg/ml

300 mg/ml

Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa

26 mg_/ ml

50 mg_/ ml

40 mg_/ ml

30 mg_/ ml

90 mg/ml

24 mg_/ ml

28 mg/ml

Pseudomonas aeruginosa

80 mg/ml

60 mg/ml

1. Perhitungan Penetapan Kadar Air Penjenuhan dengan 2 ml akuades Volume penjenuhan = 1,8 ml

Kadar air simplisia = x 100 %

Berat sampel I = 5,0060 g

Volume air = 2,2 ml – 1,8 ml = 0,4 ml

Kadar air =

g ml

0060 , 5

4 , 0

x 100 % = 7,990 %

Berat sampel II = 5,0050 g

Volume air = 2,5 ml – 2,2 ml = 0,3 ml

Kadar air =

g ml

0050 , 5

3 , 0

x 100 % = 5,994 %

Berat sampel III = 5,0060 g

Volume air = 2,9 ml – 2,5 ml = 0,4 ml

Kadar air =

g ml

0060 , 5

4 , 0

x 100 % = 7,990 %

Kadar air rata-rata =

3

% 990 , 7 % 994 , 5 % 990 ,

Lampiran 11 : (Lanjutan)

2. Perhitungan Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Air

Kadar air simplisia = x x 100 %

Berat sampel I = 5,0060 g Berat sari air = 0,2394 g

Kadar sari larut dalam air =

g g

0060 , 5

2394 , 0

x 20 100

x100 % = 23,91 %

Berat sampel II = 5,0040 g Berat sari air = 0,2256 g

Kadar sari larut dalam air =

g g

0040 , 5

2256 , 0

x 20 100

x100 % = 22,54 %

Berat sampel III = 5,0080 g Berat sari air = 0,2666 g

Kadar sari larut dalam air =

g g

0080 , 5

2666 , 0

x 20 100

x 100 % = 26,61 %

Kadar sari rata-rata =

3

% 61 , 26 % 54 , 22 % 91 ,

23 + +

3. Perhitungan Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Etanol

Kadar air simplisia = x x 100 %

Berat sampel I = 5,0020 g Berat sari etanol = 0,1270 g

Kadar sari larut dalam etanol =

g g

0020 , 5

1270 , 0

x 20 100

x 100 % = 12,69 %

Berat sampel II = 5,0030 g Berat sari etanol = 0,1347 g

Kadar sari larut dalam etanol =

g g

0030 , 5

1347 , 0

x 20 100

x 100 % = 13,46 %

Berat sampel III = 5,0040 g Berat sari etanol = 0,1411 g

Kadar sari larut dalam etanol =

g g

0040 , 5

1411 , 0

x 20 100

x 100 % = 14,09 %

Kadar sari rata-rata =

3

% 09 , 14 % 46 , 13 % 69 ,

12 + +

Lampiran 11 : (Lanjutan)

4. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total

Kadar air simplisia = x 100 %

Berat sampel I = 2,0001 g Berat abu = 0,0491 g

Kadar abu total =

g g

0001 , 2

0492 , 0

x 100 % = 2,45 %

Berat sampel II = 2,0002 g Berat abu = 0,0551 g

Kadar abu total =

g g

0002 , 2

0551 , 0

x 100 % = 2,75 %

Berat sampel III = 2,0001 g Berat abu = 0,0475 g

Kadar abu total =

g g

0001 , 2

0475 , 0

x 100 % = 2,37 %

Kadar abu total rata-rata =

3

% 37 , 2 % 75 , 2 % 45 ,

2 + +

5. Perhitungan Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut Asam

Kadar air simplisia = x 100 %

Berat sampel I = 2,0001 g Berat abu = 0,0040 g

Kadar abu tidak larut asam =

g g

0001 , 2

0040 , 0

x 100 % = 0,20 %

Berat sampel II = 2,0002 g Berat abu = 0,0071 g

Kadar abu tidak larut asam =

g g

0002 , 2

0071 , 0

x 100 % = 0,35 %

Berat sampel III = 2,0001 g Berat abu = 0,0025 g

Kadar abu tidak larut asam =

g g

0001 , 2

0025 , 0

x 100 % = 0,12 %

Kadar abu tidak larut asam rata-rata =

3

% 12 , 0 % 35 , 0 % 20 ,

0 + +