Uji Efek Antidiabetes Ekstrak Etanol Ganggang Merah Kappaphycus alvarezii Pada Mencit Jantan Yang Diinduksi Aloksan

Lampiran 3. Bagan Kerja Penelitian

Serbuk simplisia

Ganggang Merah Kappaphycus alvarezii

Simplisia

Dicuci, ditiriskan, dan ditimbang sebagai berat basah

Dikeringkan dalam lemari pengering

Ditimbang berat kering Dihaluskan

Karakterisasi simplisia Skrining Fitokimia Ekstraksi

Perkolat

Ekstrak kental

Hasil

Diperkolasi dengan etanol 96%

Diuapkan dengan rotary evaporator

Dilakukan uji aktivitas antidiabetes terhadap mencit yang diinduksi aloksan

Makroskopik

Mikroskopik

Kadar air

Penetapan kadar sari yang larut dalam air

Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

Penetapan kadar abu total

Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam Pemeriksaan: -Alkaloid -Flavonoid -Glikosida -Saponin -Tanin

-Lampiran 8. Perhitungan Pemeriksaan Karakteristik Serbuk Simplisia Ganggang

Merah Kappaphycus alvarezii

1. Perhitungan Kadar Air Serbuk Simplisia Ganggang Merah Kappaphycus

alvarezii

% Kadar air simplisia = x 100%

(g) sampel berat (ml) air volume

No. Berat sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml)

1. 5,0920 2,25 1,85

2. 5,1800 2,65 2,25

3. 5,0860 3,05 2,65

1. Kadar air = x 100% 5,0920

1,85 -2,25

= 7,85%

2. Kadar air = x 100% 5,1800

2,25 -2,65

= 7,72%

3. Kadar air = x 100%

5,0860 2,65 -3,05

= 7,86%

% Rata-rata kadar air =

3

7,86% 7,72%

7,85% 

2. Perhitungan Kadar Sari Larut dalam Air

% Kadar Sari Larut dalam Air = 100%

20 100 (g) sampel berat (g) sari berat  

No. Berat Sampel (g) Berat Sari (g)

1. 5,0018 0,3000

2. 5,0018 0,3100

3. 5,0018 0,3000

1. Kadar Sari Larut dalam Air = 100%

20 100 5,0018

0,3



 = 29,99%

2. Kadar Sari Larut dalam Air = 100% 20

100 5,0018

0,31



 = 30,99%

3. Kadar Sari Larut dalam Air = 100% 20

100 5,0018

0,3



 = 29,99%

% Rata-rata Kadar Sari Larut Air =

3

29,99% 30,99%

29,99% 

3. Perhitungan Kadar Sari Simplisia Larut dalam Etanol

% Kadar Sari Larut dalam Etanol = 100%

20 100 (g) sampel berat (g) sari berat  

No. Berat Sampel (g) Berat Sari (g)

1. 5,0018 0,1100

2. 5,0018 0,1000

3. 5,0018 0,1000

1. Kadar Sari Larut dalam Etanol = 100% 20

100 5,0018

0,11



 = 11,00%

2. Kadar Sari Larut dalam Etanol = 100% 20

100 5,0018

0,10



 = 10,00%

3. Kadar Sari Larut dalam Etanol = 100% 20

100 5,0018

0,10



 = 10,00%

% Rata-rata Kadar Sari Larut Etanol =

3 % 00 , 10 % 00 , 10 % 00 ,

11  

4. Perhitungan Kadar Abu Total Simplisia

% Kadar Abu Total = 100%

(g) sampel berat (g) abu berat 

No. Berat Sampel (g) Berat Abu (g)

1. 2,0210 0,3743

2. 2,0211 0,3670

3. 2,0148 0,3575

1. Kadar Abu Total = 100% 2,0210

0,3743

 = 18,52%

2. Kadar Abu Total = 100% 2,0211

0,3670

 = 18,16%

3. Kadar Abu Total = 100% 2,0148

0,3575

 = 17,74%

% Rata-rata Kadar Abu Total =

3 % 74 , 17 % 16 , 18 % 52 ,

18  

5. Perhitungan Kadar Abu Simplisia Tidak Larut dalam Asam

% Kadar Abu Tidak Larut dalam Asam = 100%

(g) sampel berat (g) abu berat 

No. Berat Sampel (g) Berat Abu (g)

1. 2,0210 0,0115

2. 2,0211 0,0112

3. 2,0148 0,0108

1. Kadar Abu Tidak Larut dalam Asam = 100%

2,0210 0,0115

 = 0,57%

2. Kadar Abu Tidak Larut dalam Asam = 100% 2,0211

0,0112

 = 0,55%

3. Kadar Abu Tidak Larut dalam Asam = 100% 2,0148

0,0108

 = 0,54%

% Rata-rata Kadar Abu Tidak Larut Asam =

3 % 54 , 0 % 55 , 0 % 57 ,

0  

= 0,55%

Lampiran 9. Contoh Perhitungan Dosis

Tabel Konversi Dosis Antara Jenis Hewan Dengan Manusia (Syamsudin dan Darmono, 2011). Mencit 20 g Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,2 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg Mencit 20 g

1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,2 387,9

Tikus 200 g

0,14 1,0 1,74 3,9 9,2 17,8 56,0

Marmut 400 g

0,08 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5

Kelinci 1,2 kg

0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2

Kera 4 kg

0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1

Anjing 12 kg

0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1

Manusia 70 kg

0,0026 0,018 0,031 0,07 0,16 0,32 1,0

1. Perhitungan Dosis Ekstrak Etanol Ganggang Merah (EEGM)

Kappaphycus alvarezii

Contoh perhitungan dosis EEGM yang akan diberikan pada mencit

- Dosis suspensi EEGM yang akan dibuat adalah 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb.

- Cara pembuatan suspensi EEGM:

Timbang 100 mg, 200 mg, dan 400 mg EEGM, masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspensi Na-CMC 0,5%.

- Berapa volume suspensi EEGM yang akan diberikan pada mencit ? - Mis : BB mencit = 20 g

Jumlah EEGM dosis 100 mg/kg bb =

Volume larutan yang diberikan =

Jumlah EEGM dosis 200 mg/kg bb =

Volume larutan yang diberikan =

Jumlah EEGM dosis 400 mg/kg bb =

Volume larutan yang diberikan =

2. Perhitungan Dosis Metformin

- Tiap tablet metformin mengandung 500 mg metformin-HCl - Dosis maksimum untuk manusia dewasa = 500 mg – 3000 mg

- Konversi dosis manusia (70 kg) ke dosis untuk hewan uji mencit dikali 0,0026

- Dosis metformin untuk mencit (20 g) = (500 mg – 3000 mg) x 0,0026 = 1,3 mg – 7,8 mg

- Metformin – HCl yang digunakan = 1,3 mg untuk mencit 20 g

- Dosis metformin yang diberikan (mg/kg bb) = 1,3 mg / 20 g = 65

mg/kg bb (dikalikan 50 agar mencapai 1 kg), atau

= maka x =

= 65 mg - Maka dosis metformin adalah 65 mg/kg bb Menurut FI edisi III, keseragaman bobot = 20 tablet

- Maka diambil 20 tablet metformin, digerus dan ditimbang berat totalnya = 11.035 mg

- Berat bahan aktif metformin-HCl dalam 20 tablet gmetformin adalah 500 mg x 20 tab = 10.000 mg.

- Maka, serbuk tablet metformin yang ditimbang untuk digunakan :

, X = 71,73 mg (mengandung zat aktif metformin setara 65 mg).

- Cara pembuatan suspensi metformin :

Timbang 72 mg serbuk tablet metformin dilarutkan dalam 10,0 ml larutan suspensi Na-CMC 0,5%.

- Berapa volume suspensi metformin yang akan diberikan pada mencit ? - Mis : BB mencit = 20 g

Jumlah metformin dosis 65 mg/kg bb =

x 20 g = 1,3 mg Volume larutan yang diberikan

Atau dengan cara:

- Tiap tablet metformin mengandung 500 mg metformin dilarutkan dalam 100 ml larutan suspensi Na-CMC 0,5%.

- Maka kadar suspensi metformin = 500 mg / 100 ml = 5 mg/ml = 0,5% Contoh perhitungan dosis metformin 65 mg/kg bb untuk mencit 20 g.

- 65 mg/kg bb = 65 mg / 1000 g x 20 g = 1,3 mg

- Maka volume larutan yang diberikan adalah = 1,3 mg / 5 mg x 1 ml = 0,26 ml.

3. Perhitungan Larutan Aloksan untuk Penginduksi Diabetes Secara Intraperitoneal (i.p)

Contoh perhitungan dosis Aloksan:

- Dosis pemberian secara i.p (intraperitoneal) = 2-3 kali dosis i.v

- Dalam penelitian ini dosis yang digunakan adalah 150 mg/kg bb secara i.p

- Konsentrasi aloksan yang dibuat adalah 1,5 % ( 150 mg dalam 10 ml infus NaCl 0,9%) = 15 mg/ml

- Jumlah aloksan dosis 150 mg/kg bb =

- Volume larutan yang diberikan =

Lampiran 10. Data Kadar Glukosa Darah (KGD) Mencit

Kelompok Mencit KGD Normal

KGD Diabetes

Hari ke-

3 6 9 12 15

CMC-Na 0,5%

1 93 482 451 432 400 396 307

2 103 504 470 458 422 389 362

3 83 600 593 559 492 408 395

4 108 575 504 462 411 396 382

5 110 594 575 508 482 400 376

Rata-rata 99,4 551 518,6 483,8 441,4 397,8 364,4 EEGM

100 mg/KgBB

1 86 331 274 229 185 137 109

2 71 457 326 247 170 126 110

3 86 353 331 324 247 144 105

4 69 442 414 363 276 163 103

5 104 392 292 216 180 126 108

Rata-rata 83,2 395 327,4 275,8 211,6 139,2 107 EEGM

200 mg/KgBB

1 87 600 540 442 358 277 108

2 96 463 403 374 285 195 90

3 110 414 364 294 247 182 91

4 81 600 530 452 396 293 108

5 102 477 400 329 281 180 103

Rata-rata 95,2 510,8 447,4 378,2 313,4 225,4 100 EEGM

400 mg/KgBB

1 81 572 444 353 236 136 95

2 86 446 414 342 266 163 90

3 81 417 376 253 215 145 91

4 91 530 463 352 277 182 104

5 102 600 575 470 396 266 111

Rata-rata 88,2 513 454,4 354 278 178,4 98,2

Metformin 65 mg/KgBB

1 73 600 417 376 232 180 68

2 86 464 383 253 182 112 73

3 75 460 353 233 150 123 69

4 102 512 400 266 145 126 90

5 106 477 396 277 180 125 90

Lampiran 11. Data Persentase Penurunan KGD Mencit Diabetes (%)

Kelompok Mencit Hari ke-

3 6 9 12 15

CMC-Na 0,5%

1 6,43 10,37 17,01 17,84 36,31

2 6,75 9,13 16,27 22,82 28,17

3 1,17 6,83 18,0 32,0 34,17

4 12,35 19,65 28,52 31,13 33,57

5 3,20 14,48 18,86 32,66 36,70

Rata-rata 5,98 12,09 19,73 27,29 33,78

EEGM 100 mg/KgBB

1 17,22 30,82 44,11 58,61 67,07

2 28,67 45,95 62,80 72,43 75,93

3 6,23 8,22 30,03 59,21 70,25

4 6,33 17,87 37,56 63,12 76,70

5 25,51 44,90 54,08 67,86 72,45

Rata-rata 16,79 29,56 45,72 64, 25 72,48

EEGM 200 mg/KgBB

1 10,00 26,33 40,33 53,83 82,00

2 12,96 19,22 38,44 57,88 80,56

3 12,08 28,99 40,34 56,04 78,02

4 11,67 24,67 34,00 51,17 82,00

5 16,15 31,03 41,09 62,26 78,41

Rata-rata 12,57 26,05 38,84 56,24 80,20

EEGM 400 mg/KgBB

1 22,38 38,29 58,74 76,22 83,39

2 7,17 23,32 40,36 63,45 79,82

3 9,83 39,33 48,44 65,23 78,18

4 12,64 33,58 47,74 65,66 80,38

5 4,17 21,67 34,00 55,67 81,50

Rata-rata 11,24 31,24 45,86 65,25 80,65

Metformin 65 mg/KgBB

1 30,50 37,33 61,33 70,00 88,67

2 17,46 45,47 60,78 75,86 84,27

3 23,26 49,35 67,39 73,26 85,00

4 21,88 48,05 71,68 75,39 82,42

5 16,98 41,93 62,26 73,79 81,13

Lampiran 12. Hasil Analisis Data Statistik

1. Analisis Deskriptif

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

PKGD3 CMC-Na 5 5,9781 4,24982 1,90058 ,7013 11,2550 1,17 12,35

EEGM 100 5 16,7926 10,46450 4,67987 3,7992 29,7860 6,23 28,67

EEGM 200 5 12,5691 2,26816 1,01435 9,7528 15,3854 10,00 16,14

EEGM 400 5 11,2386 6,97406 3,11889 2,5791 19,8980 4,17 22,38

Metformin 5 22,0148 5,46999 2,44625 15,2229 28,8067 16,98 30,50

Total 25 13,7186 8,09679 1,61936 10,3764 17,0608 1,17 30,50 PKGD6 CMC-Na 5 12,0928 5,05589 2,26106 5,8151 18,3705 6,83 19,65 EEGM 100 5 29,5508 16,56576 7,40843 8,9817 50,1199 8,22 45,95 EEGM 200 5 26,0470 4,52768 2,02484 20,4252 31,6689 19,22 31,03 EEGM 400 5 31,2370 8,29126 3,70796 20,9421 41,5320 21,67 39,33 Metformin 5 44,4262 4,87278 2,17917 38,3758 50,4765 37,33 49,35 Total 25 28,6708 13,44500 2,68900 23,1210 34,2206 6,83 49,35 PKGD9 CMC-Na 5 19,7318 5,01025 2,24065 13,5108 25,9529 16,27 28,52 EEGM 100 5 45,7152 13,01095 5,81867 29,5600 61,8705 30,03 62,80 EEGM 200 5 38,8413 2,87747 1,28684 35,2685 42,4142 34,00 41,09 EEGM 400 5 45,8554 9,31439 4,16552 34,2901 57,4208 34,00 58,74 Metformin 5 64,6889 4,70705 2,10506 58,8443 70,5334 60,78 71,68 Total 25 42,9665 16,41832 3,28366 36,1894 49,7437 16,27 71,68 PKGD12 CMC-Na 5 27,2900 6,61497 2,95831 19,0765 35,5036 17,84 32,66 EEGM 100 5 64,2451 5,88256 2,63076 56,9409 71,5492 58,61 72,43 EEGM 200 5 56,2372 4,20007 1,87833 51,0222 61,4523 51,17 62,26 EEGM 400 5 65,2463 7,34272 3,28377 56,1291 74,3635 55,67 76,22 Metformin 5 73,6616 2,31393 1,03482 70,7885 76,5348 70,00 75,86 Total 25 57,3361 17,10884 3,42177 50,2739 64,3982 17,84 76,22 PKGD15 CMC-Na 5 33,7828 3,41066 1,52529 29,5479 38,0177 28,17 36,70

EEGM 100 5 72,4800 3,99717 1,78759 67,5169 77,4432 67,07 76,70

EEGM 200 5 80,1975 1,90931 ,85387 77,8268 82,5682 78,02 82,00

EEGM 400 5 80,6534 1,94387 ,86932 78,2398 83,0670 78,18 83,39

Metformin 5 84,2976 2,87758 1,28689 80,7246 87,8706 81,13 88,67

2. Uji Anova

ANOVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

PKGD3 Between Groups 728,314 4 182,079 4,309 ,011

Within Groups 845,079 20 42,254

Total 1573,393 24

PKGD6 Between Groups 2686,529 4 671,632 8,132 ,000 Within Groups 1651,901 20 82,595

Total 4338,430 24

PKGD9 Between Groups 5223,144 4 1305,786 20,954 ,000 Within Groups 1246,326 20 62,316

Total 6469,470 24

PKGD12 Between Groups 6404,008 4 1601,002 51,554 ,000 Within Groups 621,091 20 31,055

Total 7025,099 24

PKGD15 Between Groups 8696,723 4 2174,181 250,976 ,000

Within Groups 173,258 20 8,663

Total 8869,982 24

3. Uji Homogenitas

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.

PKGD3 2,860 4 20 ,050

PKGD6 5,226 4 20 ,005

PKGD9 3,198 4 20 ,035

PKGD12 1,278 4 20 ,312

4. Uji Post Hoc Tukey HSD Tukey HSD Dependent Variable (I) Kelompok Perlakuan (J) Kelompok Perlakuan Mean Difference (I-J) Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound dimension1 PKGD3

CMC-Na EEGM 100 -10,81448 4,11115 ,102 -23,1166 1,4876

EEGM 200 -6,59095 4,11115 ,512 -18,8931 5,7112

EEGM 400 -5,26042 4,11115 ,706 -17,5625 7,0417

Metformin -16,03664* 4,11115 ,007 -28,3387 -3,7345 EEGM 100 CMC-Na 10,81448 4,11115 ,102 -1,4876 23,1166

EEGM 200 4,22352 4,11115 ,840 -8,0786 16,5256

EEGM 400 5,55405 4,11115 ,664 -6,7481 17,8562

Metformin -5,22216 4,11115 ,712 -17,5243 7,0799

EEGM 200 CMC-Na 6,59095 4,11115 ,512 -5,7112 18,8931

EEGM 100 -4,22352 4,11115 ,840 -16,5256 8,0786

EEGM 400 1,33053 4,11115 ,997 -10,9716 13,6326

Metformin -9,44568 4,11115 ,187 -21,7478 2,8564

EEGM 400 CMC-Na 5,26042 4,11115 ,706 -7,0417 17,5625

EEGM 100 -5,55405 4,11115 ,664 -17,8562 6,7481

EEGM 200 -1,33053 4,11115 ,997 -13,6326 10,9716

Metformin -10,77622 4,11115 ,104 -23,0783 1,5259

Metformin CMC-Na 16,03664* 4,11115 ,007 3,7345 28,3387 EEGM 100 5,22216 4,11115 ,712 -7,0799 17,5243

EEGM 200 9,44568 4,11115 ,187 -2,8564 21,7478

EEGM 400 10,77622 4,11115 ,104 -1,5259 23,0783

PKGD6 CMC-Na EEGM 100 -17,45802* 5,74787 ,046 -34,6578 -,2582 EEGM 200 -13,95423 5,74787 ,149 -31,1540 3,2455

EEGM 400 -19,14423* 5,74787 ,025 -36,3440 -1,9444 Metformin -32,33337* 5,74787 ,000 -49,5332 -15,1336 EEGM 100 CMC-Na 17,45802* 5,74787 ,046 ,2582 34,6578 EEGM 200 3,50378 5,74787 ,972 -13,6960 20,7036

EEGM 400 -1,68622 5,74787 ,998 -18,8860 15,5136

EEGM 200 CMC-Na 13,95423 5,74787 ,149 -3,2455 31,1540

EEGM 100 -3,50378 5,74787 ,972 -20,7036 13,6960

EEGM 400 -5,19000 5,74787 ,892 -22,3898 12,0098

Metformin -18,37913* 5,74787 ,033 -35,5789 -1,1794 EEGM 400 CMC-Na 19,14423* 5,74787 ,025 1,9444 36,3440 EEGM 100 1,68622 5,74787 ,998 -15,5136 18,8860

EEGM 200 5,19000 5,74787 ,892 -12,0098 22,3898

Metformin -13,18914 5,74787 ,188 -30,3889 4,0106

Metformin CMC-Na 32,33337* 5,74787 ,000 15,1336 49,5332 EEGM 100 14,87535 5,74787 ,111 -2,3244 32,0751

EEGM 200 18,37913* 5,74787 ,033 1,1794 35,5789 EEGM 400 13,18914 5,74787 ,188 -4,0106 30,3889

PKGD9 CMC-Na EEGM 100 -25,98338* 4,99265 ,000 -40,9233 -11,0435 EEGM 200 -19,10946* 4,99265 ,008 -34,0493 -4,1696 EEGM 400 -26,12357* 4,99265 ,000 -41,0634 -11,1837 Metformin -44,95702* 4,99265 ,000 -59,8969 -30,0171 EEGM 100 CMC-Na 25,98338* 4,99265 ,000 11,0435 40,9233 EEGM 200 6,87392 4,99265 ,649 -8,0660 21,8138

EEGM 400 -,14019 4,99265 1,00 -15,0801 14,7997

Metformin -18,97364* 4,99265 ,009 -33,9135 -4,0338 EEGM 200 CMC-Na 19,10946* 4,99265 ,008 4,1696 34,0493 EEGM 100 -6,87392 4,99265 ,649 -21,8138 8,0660

EEGM 400 -7,01411 4,99265 ,632 -21,9540 7,9258

Metformin -25,84755* 4,99265 ,000 -40,7874 -10,9077 EEGM 400 CMC-Na 26,12357* 4,99265 ,000 11,1837 41,0634 EEGM 100 ,14019 4,99265 1,00 -14,7997 15,0801

EEGM 200 7,01411 4,99265 ,632 -7,9258 21,9540

Metformin -18,83345* 4,99265 ,009 -33,7733 -3,8936 Metformin CMC-Na 44,95702* 4,99265 ,000 30,0171 59,8969 EEGM 100 18,97364* 4,99265 ,009 4,0338 33,9135 EEGM 200 25,84755* 4,99265 ,000 10,9077 40,7874 EEGM 400 18,83345* 4,99265 ,009 3,8936 33,7733 PKGD12 CMC-Na EEGM 100 -36,95502* 3,52446 ,000 -47,5015 -26,4085 EEGM 200 -28,94720* 3,52446 ,000 -39,4937 -18,4007 EEGM 400 -37,95628* 3,52446 ,000 -48,5028 -27,4098 Metformin -46,37159* 3,52446 ,000 -56,9181 -35,8251

EEGM 100 CMC-Na 36,95502* 3,52446 ,000 26,4085 47,5015 EEGM 200 8,00782 3,52446 ,195 -2,5387 18,5543

EEGM 400 -1,00126 3,52446 ,998 -11,5478 9,5453

Metformin -9,41657 3,52446 ,094 -19,9631 1,1299

EEGM 200 CMC-Na 28,94720* 3,52446 ,000 18,4007 39,4937 EEGM 100 -8,00782 3,52446 ,195 -18,5543 2,5387

EEGM 400 -9,00908 3,52446 ,118 -19,5556 1,5374

Metformin -17,42439* 3,52446 ,001 -27,9709 -6,8779 EEGM 400 CMC-Na 37,95628* 3,52446 ,000 27,4098 48,5028 EEGM 100 1,00126 3,52446 ,998 -9,5453 11,5478

EEGM 200 9,00908 3,52446 ,118 -1,5374 19,5556

Metformin -8,41531 3,52446 ,160 -18,9618 2,1312

Metformin CMC-Na 46,37159* 3,52446 ,000 35,8251 56,9181 EEGM 100 9,41657 3,52446 ,094 -1,1299 19,9631

EEGM 200 17,42439* 3,52446 ,001 6,8779 27,9709 EEGM 400 8,41531 3,52446 ,160 -2,1312 18,9618

PKGD15 CMC-Na EEGM 100 -38,69727* 1,86150 ,000 -44,2676 -33,1270 EEGM 200 -46,41474* 1,86150 ,000 -51,9850 -40,8445 EEGM 400 -46,87063* 1,86150 ,000 -52,4409 -41,3003 Metformin -50,51480* 1,86150 ,000 -56,0851 -44,9445 EEGM 100 CMC-Na 38,69727* 1,86150 ,000 33,1270 44,2676 EEGM 200 -7,71747* 1,86150 ,004 -13,2878 -2,1472 EEGM 400 -8,17336* 1,86150 ,002 -13,7437 -2,6031 Metformin -11,81752* 1,86150 ,000 -17,3878 -6,2472 EEGM 200 CMC-Na 46,41474* 1,86150 ,000 40,8445 51,9850 EEGM 100 7,71747* 1,86150 ,004 2,1472 13,2878 EEGM 400 -,45589 1,86150 ,999 -6,0262 5,1144

Metformin -4,10005 1,86150 ,219 -9,6703 1,4702

EEGM 400 CMC-Na 46,87063* 1,86150 ,000 41,3003 52,4409 EEGM 100 8,17336* 1,86150 ,002 2,6031 13,7437 EEGM 200 ,45589 1,86150 ,999 -5,1144 6,0262

Metformin -3,64416 1,86150 ,321 -9,2145 1,9261

Metformin CMC-Na 50,51480* 1,86150 ,000 44,9445 56,0851 EEGM 100 11,81752* 1,86150 ,000 6,2472 17,3878 EEGM 200 4,10005 1,86150 ,219 -1,4702 9,6703

EEGM 400 3,64416 1,86150 ,321 -1,9261 9,2145

DAFTAR PUSTAKA

Anggadiredja, T., Zatnika, A., Purwoto, H., dan Istini, S. (2010). Rumput Laut. Jakarta: Penerbit Penebar Swadaya. Halaman 14-19.

Aslan, L.M. (1998). Budidaya Rumput Laut. Yogyakarta: Penerbit Kanisius. Halaman 97.

Chattopadhyay, R. R. (2009). a Comparative Evaluation of Some Blood Sugar Lowering Agents of Plant Origin. Journal of Ethnopharmacology. 67(3):367–372.

Dalimartha, S., dan Adrian. (2012). Makanan Herbal Untuk Penderita Diabetes Mellitus. Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman 5-14, 80-91.

Depkes RI. (1985). Cara Pembuatan Simplisia. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 10.

Depkes RI. (1986). Sediaan Galenik. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan. Halaman 8-27.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 297-326, 333-340.

Ditjen POM RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 33.

Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plants. Journal of Pharmaceutical Sciences. 55(3). Halaman 263-264.

Frode, T.S., dan Medeiros, Y.S. (2008). Animal Models to Test Drugs With Potential Antidiabetic Activity. Journal of Ethnopharmacology. 115(2). Halaman 173-183.

Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 147, 259.

Hardoko. (2007). Studi Penurunan Glukosa Darah Diabet Dengan Konsumsi Rumput Laut Kappaphycus alvarezii. Journal of Fisheries Sciences. IX (1). Halaman 116-124.

Indriani. (1991). Budidaya Pengolahan dan Pemasaran Rumput Laut. Cetakan Pertama. Jakarta: Swadaya. Halaman 1, 8.

Kustarini, I., Dewi, S., dan Pawitra, I. (2012). Efek Ekstrak Etanol Morinda Citrifolia L. (Mengkudu) Terhadap Kadar Gula Darah, Jumlah Neutrofil,

dan Fibronektin Glomerulus Tikus Diabetes Mellitus. Media Medika Indonesiana. 46(3):178-180.

Nugroho, A.E. (2006). Hewan Percobaan Diabetes Mellitus : Patologi dan Mekanisme Aksi Diabetogenik. Biodiversitas. Volume 7. Nomor 4. Halaman 378-382.

Robinson, T. (1995). Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi VI. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 191-193.

Shanmugam, M., dan Mody, K. H. (2000). Heparinoid-active Sulphated Polisaccharides from Marine Algae as Potential Blood Anticoagulant Agents. Central Salt and Marine Chemicals Research Institute. No. 364002.

Sharo, N. M., Rachmawati N., A. Nasichuddin., Ahmad H. (2013). Uji Toksisitas dan Identifikasi Senyawa Ekstrak Alga Merah (Eucheuma Cottonii) Terhadap Larva Udang Artemia Salina Leach. Alchemy. Vol. 2 No. 3. Halaman 170–177.

Suharmiati. (2003). Pengujian Bioaktivitas Anti Diabetes Mellitus Tumbuhan Obat. Cermin Dunia Kedokteran. No. 140. Surabaya: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 10.

Suhartono, E., Setiawan, B., Edyson., dan Ramlah. (2005). Uji Aktivitas Antioksidan Jus Buah Mengkudu (Morinda Citrifolia) dan Perannya Sebagai Inhibitor Advanced Glycation End Products (Ages) Akibat Reaksi Glikosilasi. Berkala Ilmu Kedokteran. 37:1-6.

Suherman, S.K., dan Nafrialdi. (2012). Insulin dan Antidiabetik Oral. Dalam buku Farmakologi dan Terapi. Edisi Kelima. Cetak Ulang dengan Edisi Tambahan. Jakarta: Badan Penerbit FK UI. Halaman 481-495.

Suyono, S. (1999). Masalah Diabetes di Indonesia. Dalam: Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Editor Suyono, S. Jilid Pertama. Edisi Ketiga. Jakarta: Penerbit FK UI. Halaman 571-585.

Syamsudin., dan Darmono. (2011). Buku Ajar Farmakologi Eksperimental. Jakarta: UI Press. Halaman 3, 21, 24, 31.

Szkudelski, T. (2001). The Mechanism of Alloxan and Streptozotocin Action in Cell of the Rat Pancreas. Physiological Research. 50: 536-546.

Triplitt, C. L., Charles A. R., dan William L. I. (2008). Diabetes Mellitus. dalam

Pharmacotherapy: a Pathophysiologic Approach. Edisi VII. New York: The McGraw-Hill. Halaman 1209-1211.

Winarno, F.G. (1996). Teknologi Pengolahan Rumput Laut. Jakarta: Pustaka Sinar Harapan. Halaman 112.

World Health Organization. (1992). Quality Control Methods For Medicinal Plant Materials. WHO/PHARM/92.559. Geneva: Halaman 26-27.

World Health Organization. (1998). Quality Control Methods For Medicinal Plant Materials. Switzerland: Geneva. Halaman 31-33.

World Health Organization. (1999). Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus and its Complications. Report of a WHO Consultation Part 1 Zastrow, V. M., dan Bourne, R. H. (2001). Reseptor dan Farmakodinamika Obat.

Dalam Bertram G. Katzung (Editor). Farmakologi Dasar dan Klinik. Edisi Pertama. Jakarta: Salemba Medika. Halaman 53.

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental yang meliputi pengumpulan sampel, identifikasi sampel, pengolahan sampel, pemeriksaan karakteristik simplisia, skrining fitokimia simplisia, pembuatan ekstrak etanol ganggang merah Kappaphycus alvarezii, penyiapan hewan percobaan, dan pengujian efek ekstrak etanol ganggang merah Kappaphycus alvarezii terhadap penurunan kadar glukosa darah (KGD) pada mencit jantan dengan metode induksi aloksan. Data hasil penelitian dianalisis dengan one way ANOVA (Analysis of variance) dan dilanjutkan dengan uji Tukey HSD untuk melihat perbedaan nyata antar perlakuan menggunakan program SPSS (Statistical Product and Service Solution) versi 19.0. Penelitian dilakukan di Laboratorium Fitokimia dan Laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara pada bulan Desember 2015 sampai dengan April 2016.

3.1 Alat dan Bahan

3.1.1 Alat

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi lemari pengering, blender (National), oven (Memmert), tanur, rotary evaporator, desikator, mikroskop, neraca hewan (GW-1500), neraca listrik (Mettler Toledo), penangas air, Glucometer (EasyTouch®GCU) dan Glucotest strip (EasyTouch®GCU strip test), aluminium foil, kertas saring, kertas whatmann No. 1, oral sonde, spuit, gunting, spatula, alat-alat gelas dan alat laboraorium lainnya.

3.1.2 Bahan

Bahan tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini adalah ganggang merah Kappaphycus alvarezii. Bahan kimia yang digunakan berkualitas pro analisa kecuali dinyatakan lain adalah kloral hidrat, etanol 70%, pereaksi Bouchardat, Dragendorff, Mayer, besi (III) klorida, Molisch, timbal (II) asetat, asam sulfat pekat, asam klorida pekat, metanol, kloroform-isopropanol, Liebermann-Burchard, n-heksan, asam asetat anhidrida, natrium hidroksida, kloroform, serbuk magnesium, serbuk seng, aloksan (Sigma Aldrich), larutan fisiologis NaCl 0,9%, Na-CMC (natrium carboxy methyl cellulose), tablet glibenklamid (Merck), tablet metformin dan air suling (teknis).

3.2 Prosedur Pembuatan Simplisia

3.2.1 Pengumpulan Sampel

Pengumpulan sampel tumbuhan dilakukan secara purposif tanpa membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Sampel diambil dari distributor rumput laut daerah Medan dimana sampel yang diperoleh berasal dari perairan Sulawesi Tenggara.

3.2.2 Identifikasi Sampel

Identifikasi sampel tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii dilakukan oleh Alfia Rahmi (2016) di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia Pusat Penelitian Oseanografi – LIPI Jakarta. Hasil identifikasi sampel dapat dilihat pada Lampiran 1, halaman 53.

3.2.3 Pembuatan Simplisia

Bahan ganggang merah Kappaphycus alvarezii dikumpulkan, sortasi basah, dicuci bersih di bawah air mengalir, ditiriskan, dan ditimbang beratnya.

Ganggang merah Kappaphycus alvarezii selanjutnya dikeringkan di lemari pengering hingga kering, sortasi kering, kemudian ditimbang beratnya, dan disimpan dalam wadah plastik yang tertutup rapat.

3.3Pembuatan Pereaksi

3.3.1 Pereaksi besi (III) klorida 1%

Sebanyak 1 g besi (III) klorida ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air secukupnya hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.2 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M

Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling bebas karbon dioksida sebanyak 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.3 Pereaksi natrium hidroksida 2 N

Sebanyak 8 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dengan air suling sebanyak 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.4 Pereaksi asam klorida 2 N

Sebanyak 17 ml larutan asam klorida pekat ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.5 Pereaksi asam sulfat 2 N

Sebanyak 5,5 ml larutan asam sulfat pekat ditambahkan air suling sampai 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.6 Pereaksi kloralhidrat

Sebanyak 50 g kristal kloralhidrat ditimbang lalu dilarutkan dalam 20 ml air suling (Depkes RI, 1995).

3.3.7 Pereaksi Mayer

Sebanyak 1,4 g raksa (II) klorida ditimbang kemudian dilarutkan ke dalam air suling hingga 60 ml, pada wadah lain ditimbang sebanyak 5 g kalium iodida kemudian dilarutkan ke dalam 10 ml air suling. Larutan pertama dan kedua dicampurkan kemudian ditambahkan dengan air suling hingga diperoleh larutan sebanyak 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.8 Pereaksi Mollish

Sebanyak 3 g α-naftol ditimbang, dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.9 Pereaksi Dragendorff

Sebanyak 0,8 g bismut (III) nitrat ditimbang, dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat, pada wadah lain ditimbang sebanyak 27,2 g kalium iodida, dilarutkan dalam 50 ml air suling, kemudian kedua larutan dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan yang jernih diambil dan diencerkan dengan air suling hingga volume larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.10 Pereaksi Bouchardat

Sebanyak 4 g kalium iodida ditimbang, dilarutkan dalam air suling secukupnya, lalu ditambahkan 2 g iodium kemudian ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.11 Pereaksi Liebermann-Burchard

Sebanyak 5 bagian volume asam sulfat pekat dicampurkan dengan 50 bagian volume etanol 96%. Kemudian ditambahkan dengan hati-hati 5 bagian volume asam asetat anhidrida ke dalam campuran tersebut dan dinginkan (Depkes RI, 1995).

3.4 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia

Pemeriksaan karakteristik simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik, mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol, penetapan kadar abu total, dan penetapan kadar abu tidak larut asam (Depkes RI, 1977; WHO, 1992). Bagan kerja penelitian dapat dilihat pada Lampiran 3, halaman 55.

3.4.1 Pemeriksaan Makroskopik dan Organoleptik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan mengamati bentuk, tekstur dan ukuran serta pemeriksaan organoleptik dengan mengamati warna, rasa dan bau dari tumbuhan segar, simplisia dan serbuk simplisia ganggang merah.

3.4.2 Pemeriksaan Mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia ganggang merah. Serbuk ditaburkan di atas kaca objek yang telah ditetesi kloralhidrat, ditutup dengan kaca penutup kemudian diamati di bawah mikroskop.

3.4.3 Penetapan kadar air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen). Alat terdiri dari labu alas bulat 500 ml, pendingin, tabung penyambung, tabung penerima 5 ml berskala 0,05 ml, alat penampung dan pemanas listrik.

a. Penjenuhan toluen

Sebanyak 200 ml toluen dan 2 ml air suling dimasukkan ke dalam labu alas bulat, dipasang alat penampung dan pendingin, kemudian didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.

b. Penetapan kadar air simplisia

Sebanyak 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama dimasukkan ke dalam labu berisi toluen yang telah dijenuhkan, kemudian labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit, setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes per detik sampai sebagian besar air terdestilasi. Kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik, setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar, setelah air dan toluen memisah sempurna, lalu volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO, 1998).

3.4.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dengan 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1 liter) dalam labu bersumbat, dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, kemudian disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105ºC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).

3.4.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% di dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, setelah itu disaring cepat untuk menghindari penguapan etanol. Sejumlah 20 ml filtrat diuapkan dalam cawan

penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara sampai kering. Sisa yang diperoleh dipanaskan pada suhu 105 ºC sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam etanol 96% dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).

3.4.6 Penetapan kadar abu total

Sebanyak 2 g serbuk simplisia yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan ke dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pijaran dilakukan pada suhu 600 ºC selama 3 jam kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).

3.4.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam

Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu total dididihkan dalam asam klorida encer sebanyak 25 ml selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring bebas abu, dicuci dengan air panas, lalu dipijar sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).

3.5 Skrining Fitokimia Simplisia

Skrining fitokimia serbuk simplisia ganggang merah Kappaphycus alvarezii meliputi pemeriksaan senyawa golongan flavonoid, alkaloid, saponin, tannin, glikosida, dan steroid/triterpenoid.

3.5.1 Pemeriksaan Flavonoid

Sebanyak 10g serbuk simplisia ditambah air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas. Ke dalam 5 ml filtrate ditambahkan 0,1g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 1 ml amil alcohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah kekuningan atau jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966).

3.5.2 Pemeriksaan Alkaloid

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat yang diperoleh dipakai untuk uji alkaloida: diambil 3 tabung reaksi, lalu ke dalamnya dimasukkan 0,5ml filtrat. Pada masing-masing tabung reaksi :

1. Ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer 2. Ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat 3. Ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff

Alkaloida positif jika terjadi endapan atau kekeruhan pada paling sedikit dua dari tiga percobaan di atas (Depkes RI, 1995).

3.5.3 Pemeriksaan Saponin

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5g dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Jika terbentuk busa setinggi 1-10cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2N menunjukkan adanya saponin (Depkes RI, 1995).

3.5.4 Pemeriksaan Tanin

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 1g, dididihkan selama 2 menit dalam 100 ml air suling lalu didinginkan dan disaring. Pada filtrat ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) kolrida 1%. Jika terjadi warna biru kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).

3.5.5 Pemeriksaan Glikosida

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 2g, lalu disari dengan 20 ml campuran etanol 95% dengan air (7:2) dan 10 ml asam klorida 2N, direfluks selama 2 jam, didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:2), dilakukan berulang kali sebanyak 2 kali. Sari air dikumpulkan dan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 500C. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa digunakan untuk percobaan berikut: 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan dalam tabung reaksi dan diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molisch. Kemudian secara perlahan-lahan ditambahkan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuknya cincin berwarna ungu pada batas kedua cairan menunjukkan glikosida (Depkes RI, 1995).

3.5.6 Pemeriksaan Steroid/Triterpenoid

Sebanyak 1g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 ml n-heksan selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan beberapa tetes pereaksi Liebermann-Burchard. Terbentuk warna biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroid sedangkan warna merah, merah muda atau ungu menunjukkan adanya triterpenoid (Harborne, 1987).

3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Ganggang Merah (EEGM)

Pembuatan ekstrak etanol ganggang merah dilakukan dengan cara perkolasi. Dibasahi 100 g serbuk simplisia dengan etanol 96% dan dibiarkan selama 3 jam. Pindahkan massa sedikit demi sedikit ke dalam perkolator, tuangi dengan cairan penyari etanol sampai semua simplisia terendam dan terdapat selapis cairan penyari diatasnya, mulut tabung perkolator ditutup dengan aluminium foil dan dibiarkan selama 24 jam, kemudian kran dibuka. Biarkan cairan menetes dengan kecepatan 1 ml per menit, perkolat ditampung. Perkolasi dihentikan jika 500 mg perkolat yang keluar terakhir diuapkan, tidak meninggalkan sisa. Kemudian dipekatkan dengan alat penguap vakum putar hingga diperoleh ekstrak kental (Ditjen POM RI, 1979).

3.7 Penyiapan Hewan Percobaan

Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian adalah mencit putih jantan dengan berat badan 25-35g sebanyak 25 ekor, dikelompokkan dalam 5 kelompok, setiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit. Sebelum pengujian, terlebih dahulu mencit diaklimatisasi selama 2 minggu dalam kandang yang baik untuk menyesuaikan dengan lingkungannya.

3.8 Pengujian Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah

3.8.1 Pembuatan Suspensi Na-CMC 0,5% b/v

Sebanyak 0,5 g Na-CMC ditaburkan dalam lumpang yang berisi air suling panas. Didiamkan selama 15 menit lalu digerus hingga diperoleh massa yang transparan, lalu digerus sampai homogen, diencerkan dengan air suling,

dihomogenkan dan dimasukkan ke labu tentukur 100 ml, dicukupkan volumenya dengan air suling hingga 100 ml.

3.8.2 Pembuatan Suspensi Metformin

Dosis metformin untuk manusia adalah 500 mg, maka dosis untuk mencit (BB = 20 g) dikonversikan 0,0026 (maka, 500 mg x 0,0026 = 1,3 mg). Dosis per kg berat badan = 1000 g/20 g x 1,3 mg = 65 mg/kg bb. Timbang serbuk tablet metformin setara dengan 65 mg, dimasukkan ke dalam lumpang lalu ditambahkan suspensi Na-CMC 0,5% b/v sedikit demi sedikit sambil digerus sampai homogen, volume dicukupkan hingga 10 ml. Perhitungan dosis suspensi metformin dapat dilihat pada Lampiran 9, halaman 66.

3.8.3 Pembuatan Suspensi EEGM (Ekstrak Etanol Ganggang Merah)

Suspensi ekstrak ganggang merah dibuat 3 variasi dosis yakni dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb. Sejumlah 100 mg, 200 mg, dan 400 mg ekstrak ganggang merah ditimbang dan dimasukkan ke dalam lumpang dan ditambahkan suspensi Na-CMC 0,5% sedikit demi sedikit sambil digerus sampai homogen hingga 10 ml. Perhitungan dosis ekstrak ganggang merah (EEGM) dapat dilihat pada Lampiran 9, halaman 65.

3.8.4 Pembuatan Larutan Aloksan 150 mg/kg bb

Aloksan monohidrat ditimbang sebanyak 150 mg, dilarutkan dalam larutan fisiologis NaCl 0,9% b/v dalam labu tentukur 10 ml. Larutan selalu dibuat baru setiap pengujian. Perhitungan aloksan dapat dilihat pada Lampiran 9, halaman 67.

3.8.5 Penggunaan Blood Glucose Test Meter “EasyTouch®GCU”

Kadar glukosa darah diukur dengan alat glucometer menggunakan tes strip yang bekerja secara enzimatis. Alat yang digunakan untuk mengukur kadar

glukosa darah adalah glucometer EasyTouch®GCU. Glucometer ini secara otomatis akan hidup ketika tes strip dimasukkan dan akan mati setelah beberapa menit tes strip dicabut. Tes strip EasyTouch®GCU dimasukkan ke alat EasyTouch®GCU sehingga glucometer ini akan hidup secara otomatis, kemudian dicocokkan kode nomor yang muncul pada layar dengan yang ada pada vial tes strip EasyTouch®GCU. Tes strip yang dimasukkan pada glucometer pada bagian layar akan tertera angka sesuai dengan kode vial tes strip, kemudian pada layar monitor glucometer muncul tanda siap untuk diteteskan darah. Caranya dengan menyentuh 1 tetes darah yang keluar ke tes strip dan ditarik sendirinya melalui aksi kapiler. Ketika wadah terisi penuh oleh darah, alat mulai mengukur kadar glukosa darah.

3.8.6 Pengukuran Kadar Glukosa Darah (KGD)

Sebelum percobaan dilakukan, diukur KGD mencit dimana KGD yang diukur adalah KGD puasa yaitu mencit dipuasakan (tidak diberi makan tetapi diberi minum) selama 18 jam sebelum percobaan (Frode dan Medeiros, 2008). Masing – masing hewan ditimbang berat badan dan diberi tanda pada ekor. Kemudian diukur kadar glukosa darah mencit dengan cara mengambil darah mencit melalui pembuluh darah vena ekor. Darah disentuhkan pada strip test yang telah terpasang pada alat glucometer. Angka yang tampil pada layar dicatat sebagai kadar glukosa darah dalam satuan mg/dL.

3.8.7 Uji Pendahuluan dan Orientasi Dosis

Uji pendahuluan dan orientasi dosis dilakukan dengan metode tes toleransi glukosa oral (TTGO) yaitu pemberian glukosa 50% dengan dosis 3 g/kg bb. Mencit yang telah dipuasakan ditimbang berat badannya, ditentukan KGD puasa,

kemudian mencit dikelompokkan secara acak menjadi 8 kelompok yang terdiri dari 2 ekor mencit yaitu :

Kelompok I : suspensi Na-CMC 0,5%

Kelompok II : suspensi EEGM dosis 100 mg/kg bb Kelompok III : suspensi EEGM dosis 200 mg/kg bb Kelompok IV : suspensi EEGM dosis 250 mg/kg bb Kelompok V : suspensi EEGM dosis 300 mg/kg bb Kelompok VI : suspensi EEGM dosis 400 mg/kg bb Kelompok VII : suspensi EEGM dosis 500 mg/kg bb Kelompok VIII : suspensi glibenklamid dosis 0,65 mg/kg bb

Tiga puluh menit kemudian diberi larutan glukosa 50% dosis 3 g/kg bb sebagai loading dose, lalu pada menit ke- 30, 60, 90, dan 120 diukur KGD masing-masing mencit menggunakan alat glucometer.

3.8.8 Pengujian Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Ganggang Merah (EEGM) dengan Metode Induksi Aloksan

Mencit yang telah dipuasakan ditimbang berat badannya, ditentukan KGD puasa, kemudian masing-masing mencit diinduksi dengan aloksan dosis 150 mg/kg BB secara intraperitoneal. Mencit diberi makan dan minum seperti biasa, diamati tingkah laku mencit dan bobot badan, dan diukur kadar glukosa darahnya pada hari ke-3 hingga hari ke-7 menunjukkan kenaikan kadar glukosa darah mencit. Mencit dianggap menderita diabetes apabila KGD puasa 200 mg/dl dan telah dapat digunakan untuk pengujian (Suharmiati, 2003). Selanjutnya disebut sebagai mencit diabetes.

Mencit diabetes dikelompokkan secara acak menjadi 5 kelompok yang terdiri dari 5 ekor mencit yaitu :

Kelompok I : suspensi Na-CMC 0,5%

Kelompok II : suspensi EEGM dosis 100 mg/kg bb Kelompok III : suspensi EEGM dosis 200 mg/kg bb Kelompok IV : suspensi EEGM dosis 400 mg/kg bb Kelompok V : suspensi metformin dosis 65 mg/kg bb

Kelima kelompok diberi perlakuan selama 2 minggu berturut-turut, pengukuran kadar glukosa darah diukur pada hari ke-0, 3, 6, 9, 12, dan 15 menggunakan alat ukur glucometer.

Selanjutnya dihitung persen penurunan KGD dengan rumus:

Keterangan: a = KGD setelah diinduksi aloksan

b = KGD pada waktu pengamatan hari ke-t

3.8.9 Analisis Data

Data hasil penelitian dianalisis dengan menggunakan program SPSS. Data dianalisis dengan menggunakan metode Kolmogorov Smirnov untuk menentukan homogenitas dan normalitasnya. Kemudian dilanjutkan menggunakan metode One Way ANOVA untuk menentukan perbedaan rata-rata di antara kelompok. Jika terdapat perbedaan, dilanjutkan dengan menggunakan uji Post Hoc Tukey HSD untuk melihat perbedaan nyata antar perlakuan.

% Penurunan KGD = ௔−௕

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Pusat Penelitian Oseanografi, sampel yang diperoleh adalah tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii, famili Areschougiaceae, dapat dilihat pada Lampiran 1, halaman 53.

4.2 Hasil Karakterisasi

4.2.1 Hasil pemeriksaan makroskopik

Hasil pemeriksaan makroskopik terhadap tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii diperoleh bentuk talus silindris dengan permukaan licin, berwarna merah kecoklatan karena bersifat adaptasi kromatik, yaitu memiliki penyesuaian antara proporsi pigmen dengan berbagai kualitas pencahayaan dan dapat menimbulkan berbagai warna pada talus seperti: merah tua, merah muda, pirang, coklat, kuning dan hijau. Keadaan warna tidak selalu dapat digunakan dalam menentukan kelasnya. Perubahan warna sering terjadi hanya karena faktor lingkungan yang berubah. Kejadian ini merupakan proses modifikasi yaitu perubahan bentuk dan sifat luar (fenotipe) yang tidak kekal sebagai pengaruh lingkungan antara lain iklim dan oseanografi yang relatif cukup besar. Mempunyai tipe percabangan dichotomous. Ditumbuhi nodulus (tonjolan-tonjolan) dan duri (Aslan, 1998). Dapat dilihat pada Lampiran 4, halaman 56.

Hasil pemeriksaan makroskopik terhadap serbuk simplisia tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii diperoleh serbuk kasar, dengan

organoleptik warna coklat serta memiliki rasa dan bau yang khas. Gambar serbuk simplisia dapat dilihat pada Lampiran 5, halaman 57.

4.2.2 Hasil pemeriksaan mikroskopik

Hasil pemeriksaan mikroskopik pada serbuk simplisia tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii terlihat adanya sel-sel parenkim berbentuk poligonal tidak beraturan, yang berisi pigmen berwarna merah dan terdapat pula sel-sel propagule yang merupakan sel yang berperan untuk perkembangbiakan atau propagation. Dapat dilihat pada Lampiran 6, halaman 58.

Uraian mikroskopik mencakup pengamatan terhadap bagian simplisia dan fragmen pengenal dari serbuk simplisia (Depkes RI, 1995).

Serbuk simplisia ganggang merah memiliki fragmen pengenal berupa sel-sel parenkim berbentuk poligonal tidak beraturan, yang berisi pigmen berwarna merah dan terdapat pula sel-sel propagule.

4.2.3 Hasil pemeriksaan karakteristik

Hasil pemeriksaan karakteristik dari serbuk simplisia tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvareziidapat diliat pada Tabel 4.1 berikut:

Tabel 4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia ganggang merah

No. Karakteristik Hasil Pemeriksaan (%)

1. Kadar Air 7,81

2. Kadar sari larut dalam air 30,32

3. Kadar sari larut dalam etanol 10,33

4. Kadar abu total 18,14

5. Kadar abu tidak larut dalam asam 0,55

Monografi simplisia tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii tidak tercantum dalam Materia Medika Indonesia (MMI), sehingga tidak ada acuan dalam menentukan parameternya.

Tabel 4.1 menunjukkan kadar air pada simplisia tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii sebesar 7,81%, kadar tersebut memenuhi persyaratan umum yaitu lebih kecil dari 10%. Kadar air yang lebih besar dari 10% dapat menjadi media pertumbuhan kapang dan jasad renik lainnya (Depkes RI, 1985).

Penetapan kadar sari yang larut dalam air menyatakan jumlah zat yang tersari dalam pelarut air seperti glikosida, gula, gom, protein, enzim, zat warna dan asam-asam organik, sedangkan penetapan kadar sari yang larut dalam etanol menyatakan jumlah zat yang tersari dalam pelarut etanol seperti glikosida, antrakinon, steroid, flavonoid, klorofil, saponin, tanin dan yang larut dalam jumlah sedikit yaitu lemak (Depkes RI, 1995).

Penetapan kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam bertujuan untuk memberikan jaminan bahwa simplisia tidak mengandung logam berat tertentu melebihi nilai yang ditetapkan karena dapat berbahaya (toksik) bagi kesehatan. Penetapan kadar abu total menyatakan jumlah kandungan senyawa anorganik dalam simplisia misalnya Mg, Ca, Na, Zn dan K. Kadar abu tidak larut dalam asam untuk mengetahui kadar senyawa anorganik yang tidak larut dalam asam misalnya silikat. Abu total terbagi dua yaitu abu fisiologis dan abu non fisiologis. Abu fisiologis adalah abu yang berasal dari jaringan tumbuhan itu sendiri sedangkan abu non fisiologis adalah sisa setelah pembakaran yang berasal dari bahan-bahan luar yang terdapat pada permukaan simplisia (WHO, 1998).

Kadar abu total simplisia tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii diperoleh sebesar 18,14%, tingginya kadar abu pada simplisia tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii disebabkan karena tumbuhan ganggang

merah Kappaphycus alvarezii mengandung mineral kalium, natrium, kalsium, dan magnesium (Hardoko, 2007).

Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam menyatakan jumlah silika pada simplisia, diperoleh dengan cara melarutkan abu total dalam asam klorida (WHO, 1998). Perhitungan pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia tumbuhan ganggang merah Kappaphycus alvarezii dapat dilihat pada Lampiran 8, halaman 60.

4.3 Hasil Skrining Fitokimia

Hasil skrining fitokimia terhadap serbuk simplisia diperoleh simplisia tidak mengandung alkaloid, penambahan pereaksi Mayer, Bourchardat maupun Dragendroff tidak terbentuk endapan; mengandung glikosida, penambahan pereaksi Molish dan asam sulfat pekat membentuk cincin ungu; mengandung saponin, terbentuknya busa lebih besar dari 1 cm yang stabil dengan pengocokkan dengan air panas dan tidak hilang pada penambahan HCl 2 N (Depkes RI, 1995); tidak mengandung flavonoid, tidak terbentuknya warna jingga pada lapisan amil alkohol; tidak mengandung tanin, penambahan FeCl3 tidak memberikan warna

hijau (Fransworth, 1966); mengandung steroid, penambahan pereaksi Liebermann-Burchad membentuk warna hijau (Robinson, 1995). Hasil skrining fitokimia simplisia dapat dilihat pada Tabel 4.2 berikut:

Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia simplisia ganggang merah

No. Pemeriksaan Hasil

1. Alkaloid -

2. Flavonoid -

3. Glikosida +

5. Saponin +

6. Tanin -

Keterangan: (+) Positif : mengandung golongan senyawa () Negatif : tidak mengandung golongan senyawa

4.4 Ekstraksi

Hasil ekstraksi 100 g simplisia dengan cara perkolasi menggunakan pelarut etanol 96%, bertujuan untuk mengekstraksi senyawa yang terdapat pada simplisia ganggang merah, baik bersifat polar maupun non polar, diperoleh ekstrak etanol ganggang merah sebanyak 41,756 g ( % rendemen : berat ekstrak / berat simplisia x 100% = 41,756 g / 100 g x 100% = 41,756%).

4.5 Pengujian Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Ganggang Merah (EEGM)

4.5.1 Uji Pendahuluan dan Orientasi Dosis

Mencit uji dikelompokkan secara acak menjadi 8 kelompok perlakuan yang terdiri dari 2 ekor mencit dan diberi perlakuan secara oral yaitu kelompok kontrol yang diberi suspensi Na-CMC 0,5%, kelompok uji dengan 5 variasi dosis perlakuan yaitu suspensi EEGM dosis 100 mg/kg bb, EEGM dosis 200 mg/kg bb, EEGM dosis 250 mg/kg bb, EEGM dosis 300 mg/kg bb, EEGM dosis 400 mg/kg bb, EEGM dosis 500 mg/kg bb, dan suspensi glibenklamid dosis 0,65 mg/kg bb.

Sebelum pengujian dilakukan, mencit dipuasakan (tidak diberi makan tetapi tetap diberi minum) selama 18 jam, lalu ditimbang berat badan mencit masing-masing dan diberi tanda pada ekor. Kemudian masing-masing mencit diukur KGD puasa mencit menggunakan alat glucometer EasyTouch®GCU untuk mengetahui KGD awal. Mencit diberi perlakuan kemudian setelah tiga puluh menit kemudian diberi larutan glukosa 50% dosis 3 g/kg bb sebagai loading dose,

lalu pada menit ke- 30, 60, 90, dan 120 diukur KGD masing-masing mencit menggunakan alat glucometer.

Berdasarkan hasil uji pendahuluan menggunakan metode toleransi glukosa yang telah dilakukan dengan pemberian ekstrak etanol ganggang merah (EEGM) Kappaphycus alvarezii per oral dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, 250 mg/kg bb, 300 mg/kg bb, 400 mg/kg bb, dan 500 mg/kg bb, penurunan kadar glukosa darah sudah terlihat pada semua dosis. Pada dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb menunjukkan penurunan kadar glukosa yang lebih cepat dibandingkan dengan yang lainnya. Dengan demikian, berdasarkan hasil uji pendahuluan yang telah dilakukan maka ditetapkan dosis untuk penelitian selanjutnya digunakan dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb.

4.5.2 Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Ganggang Merah (EEGM) dengan Metode Induksi Aloksan

Mencit uji dikelompokkan secara acak menjadi 5 kelompok perlakuan yang terdiri dari 5 ekor mencit dan diberi perlakuan secara oral yaitu kelompok kontrol yang diberi suspensi Na-CMC 0,5%, kelompok uji dengan 3 variasi dosis perlakuan yaitu suspensi EEGM dosis 100 mg/kg bb, EEGM dosis 200 mg/kg bb, EEGM dosis 400 mg/kg bb, dan suspensi metformin 65 mg/kg bb.

Sebelum pengujian dilakukan, mencit dipuasakan (tidak diberi makan tetapi tetap diberi minum) selama 18 jam, lalu ditimbang berat badan mencit masing-masing dan diberi tanda pada ekor. Kemudian masing-masing mencit diukur KGD puasa mencit menggunakan alat glucometer EasyTouch®GCU untuk mengetahui KGD awal. Hasil pengukuran KGD mencit rata-rata setelah puasa

selama 18 jam, sebelum mencit diinduksi aloksan dosis 150 mg/kg bb ditunjukkan pada Tabel 4.3.

Tabel 4.3 Hasil pengukuran KGD puasa mencit rata-rata sebelum diinduksi

aloksan 150 mg/kg bb

Kel. Kelompok Perlakuan Rata-rata KGD puasa (mg/dL) ± SEM

1. Na-CMC 0,5% 99,4 ± 5,05

2. EEGM 100 mg/kg bb 83,2 ± 6,32

3. EEGM 200 mg/kg bb 95,2 ± 5,17

4. EEGM 400 mg/kg bb 88,2 ± 3,92

5. Metformin 65 mg/kg bb 88,4 ± 6,77

Hasil tes homogenitas diperoleh nilai signifikan (0,619) pada α = 0,05 yang menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang signifikan di antara kelompok kontrol, kelompok uji dan kelompok pembanding. Hal ini menunjukkan bahwa hewan coba yang digunakan dalam kondisi fisiologis yang homogen, yakni dalam kadar glukosa darah normal sehingga dapat digunakan sebagai hewan uji.

Mencit diinduksi dengan aloksan dosis 150 mg/kg bb secara intraperitoneal, diamati tingkah laku dan bobot badan, serta diukur KGD pada hari ke-3 hingga hari berikutnya sampai menunjukkan kenaikan KGD dan mencit mulai dapat digunakan dalam pengujian. Mencit yang telah memiliki KGD ≥ 200 mg/dL disebut mencit diabetes. Hasil rata-rata dari peningkatan KGD ditunjukkan pada Tabel 4.4

Tabel 4.4 Hasil pengukuran KGD mencit rata-rata setelah diinduksi aloksan

dosis 150 mg/kg bb

Kel. Kelompok Perlakuan Rata-rata KGD diabetes (mg/dL) ± SEM

1. Na-CMC 0,5% 551,0 ± 24,29

2. EEGM 100 mg/kg bb 395,0 ± 24,42

3. EEGM 200 mg/kg bb 510,8 ± 37,89

4. EEGM 400 mg/kg bb 513,0 ± 35,39

5. Metformin 65 mg/kg bb 513,0 ± 35,39

Berdasarkan Tabel 4.4 terlihat bahwa pemberian aloksan dosis 150 mg/kg

mg/dL. Hal ini menunjukkan bahwa mencit yang digunakan untuk percobaan

dalam keadaan hiperglikemia. Hasil tes homogenitas diperoleh p = 0,387 pada α =

0,05 yang menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang signifikan di antara kelompok kontrol, kelompok uji, dan kelompok pembanding. Hal ini menunjukkan bahwa hewan coba yang digunakan dalam kondisi fisiologis yang homogen, yakni mencit sudah dalam kondisi diabetes sehingga dapat digunakan sebagai hewan uji. Pemberian perlakuan dimulai setelah mencit positif diabetes (hari ke-1), setiap hari diberi sediaan uji selama 2 minggu, dan dilakukan pen gukuran KGD pada hari ke-3, 6, 9, 12, dan 15.

Data KGD (mg/dL) pada masing-masing mencit pada semua kelompok perlakuan dilakukan perhitungan persen penurunan KGD antar individu, kemudian dianalisis secara statistik menggunakan ANOVA lalu dilanjutkan uji Post Hoc Tukey HSD untuk melihat perbedaan nyata antar perlakuan. Hasil persentase penurunan KGD rata-rata mencit setelah perlakuan mulai terlihat pada hari ke-3. Hasil pengukuran penurunan KGD hari ke-3 dapat dilihat pada Tabel 4.5.

Tabel 4.5 Hasil persentase penurunan KGD rata-rata mencit hari ke-3 setelah

perlakuan Kelompok Uji

% penurunan KGD rata-rata setelah perlakuan (mg/dL) ± SEM

hari ke-3 p

Kontrol Na-CMC 0,5% 5,98 ± 1,90 -

0,007#

EEGM 100 mg/kg bb 16,79 ± 4,68 0,102

0,712

EEGM 200 mg/kg bb 12,57 ± 1,01 0,512

0,187

EEGM 400 mg/kg bb 11,24 ± 3,12 0,706

0,104 Metformin 65 mg/kg bb 22,02 ± 2,45 0,007*

Keterangan :

* berbeda signifikan dengan kelompok kontrol Na-CMC # berbeda signifikan dengan kelompok pembanding metformin

Berdasarkan Tabel 4.5 dapat dilihat bahwa seluruh kelompok pemberian induksi aloksan mengalami penurunan KGD. Hasil penurunan yang didapat dari semua kelompok mencit yang diberi perlakuan EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb sudah menunjukkan penurunan KGD pada hari ke-3 namun belum menunjukkan efek perbedaan yang nyata menurut statistik jika dibandingkan dengan kelompok Na-CMC dan Metformin. Tetapi kelompok pembanding Metformin menunjukkan efek perbedaan yang nyata menurut statistik jika dibandingkan dengan kelompok Na-CMC.

Pada hari ke-6 terjadi penurunan KGD dari kelompok yang diberikan EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb dan metformin dosis 65 mg/kg bb. Hasil pengukuran penurunan KGD hari ke-6 dapat dilihat pada Tabel 4.6.

Tabel 4.6 Hasil persentase penurunan KGD rata-rata mencit hari ke-6 setelah

perlakuan Kelompok Uji

% penurunan KGD rata-rata setelah perlakuan (mg/dL) ± SEM

hari ke-6 p

Kontrol Na-CMC 0,5% 12,09 ± 2,26 -

0,000#

EEGM 100 mg/kg bb 29,55 ± 7,41 0,046*

0,111

EEGM 200 mg/kg bb 26,05 ± 2,02 0,149

0,033#

EEGM 400 mg/kg bb 31,24 ± 3,71 0,025*

0,188 Metformin 65 mg/kg bb 44,43 ± 2,18 0,000*

- Keterangan :

* berbeda signifikan dengan kelompok kontrol Na-CMC # berbeda signifikan dengan kelompok pembanding metformin

Berdasarkan Tabel 4.6 persentase penurunan rata-rata setiap kelompok pemberian EEGM dosis dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb, serta metformin 65 mg/kg bb mengalami peningkatan dibandingkan pada hari ke-3. Pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb, 400 mg/kg bb, dan Metformin memiliki nilai signifikan < 0,05 jika dibandingkan dengan kelompok hewan coba yang diberikan Na-CMC. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb, 400 mg/kg bb, dan metformin memberikan efek berbeda nyata menurut statistik jika dibandingkan dengan kelompok kontrol Na-CMC. Sedangkan kelompok pemberian EEGM dosis 200 mg/kg bb belum menunjukkan efek berbeda yang nyata menurut statistik jika dibandingkan dengan kelompok kontrol Na-CMC. Pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb memiliki nilai signifikan > 0,05 jika dibandingkan dengan kelompok pembanding metformin. Hal ini menyatakan bahwa pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb belum memberikan efek berbeda nyata menurut statistik jika dibandingkan dengan kelompok pembanding metformin. Sedangkan pemberian EEGM dosis 200 mg/kg bb memberikan efek penurunan KGD yang sama seperti kontrol Na-CMC menurut statistik dengan memiliki nilai signifikan > 0,05 yang berarti tidak terdapat perbedaan yang nyata dengan kontrol Na-CMC.

Pada hari ke-9 terjadi peningkatan penurunan KGD mencit bila dibandingkan dengan KGD hari ke-6 pada kelompok pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, 400 mg/kg bb dan metformin 65 mg/kg bb. Hasil penurunan KGD dapat dilihat pada Tabel 4.7.

Tabel 4.7 Hasil persentase penurunan KGD rata-rata mencit hari ke-9 setelah

perlakuan Kelompok Uji

% penurunan KGD rata-rata setelah perlakuan (mg/dL) ± SEM

hari ke-9 p

Kontrol Na-CMC 0,5% 19,73 ± 2,24 -

0,000#

EEGM 100 mg/kg bb 45,72 ± 5,82 0,000*

0,009#

EEGM 200 mg/kg bb 38,84 ± 1,29 0,008*

0,000#

EEGM 400 mg/kg bb 45,86 ± 4,17 0,000*

0,009#

Metformin 65 mg/kg bb 64,69 ± 2,11 0,000*

- Keterangan :

* berbeda signifikan dengan kelompok kontrol Na-CMC # berbeda signifikan dengan kelompok pembanding metformin

Pada tabel 4.7 dapat dilihat bahwa pada hari ke-9 terjadi penurunan KGD pada kelompok yang diberikan Na-CMC, tapi penurunan yang terjadi hanya sedikit 19,73%. Sedangkan untuk kelompok hewan percobaan yang diberikan EEGM dosis 200 mg/kg bb terjadi penurunan sebesar 38,84% lebih kecil dibandingkan penurunan KGD pada kelompok hewan coba yang diberi EEGM dosis 100 mg/kg bb, 400 mg/kg bb dan metformin yaitu 45,72%, 45,86%, dan 64,69%. Sedangkan untuk kelompok pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb terjadi penurunan yang relatif sama. Berdasarkan nilai signifikannya, terdapat perbedaan yang nyata antara kelompok pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan EEGM dosis 400 mg/kg bb serta metformin dengan kelompok hewan coba yang diberi Na-CMC. Apabila dibandingkan dengan kelompok metformin 65 mg/kg bb hewan coba yang diberikan EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb terdapat perbedaan yang nyata.

Pada hari ke-12 juga terjadi peningkatan penurunan KGD pada seluruh kelompok perlakuan jika dibandingkan pada hari ke-9. Data persentase penurunan KGD mencit perlakuan hari ke-12 dapat dilihat pada Tabel 4.8.

Tabel 4.8 Hasil persentase penurunan KGD rata-rata mencit hari ke-12 setelah

perlakuan Kelompok Uji

% penurunan KGD rata-rata setelah perlakuan (mg/dL) ± SEM

hari ke-12 p

Kontrol Na-CMC 0,5% 27,29 ± 2,96 -

0,000#

EEGM 100 mg/kg bb 64,25 ± 2,63 0,000*

0,094

EEGM 200 mg/kg bb 56,24 ± 1,88 0,000*

0,001#

EEGM 400 mg/kg bb 65,25 ± 3,28 0,000*

0,160

Metformin 65 mg/kg bb 73,66 ± 1,03 0,000*

- Keterangan :

* berbeda signifikan dengan kelompok kontrol Na-CMC # berbeda signifikan dengan kelompok pembanding metformin

Berdasarkan Tabel 4.8 kelompok hewan coba yang diberikan EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, 400 mg/kg bb dan metformin 65 mg/kg bb mempunyai nilai signifikan < 0,05 jika dibandingkan dengan kelompok hewan coba yang diberikan Na-CMC. Hal ini menyatakan bahwa persen penurunan KGD pada kelompok perlakuan yang diberikan EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, 400 mg/kg bb, dan metformin 65 mg/kg bb berbeda nyata jika dibandingkan dengan kelompok Na-CMC. Kelompok hewan coba yang diberikan Na-CMC juga mengalami penurunan KGD. Pada kelompok hewan coba yang diberikan EEGM dosis 100 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb mempunyai nilai signifikan > 0,05 jika dibandingkan dengan kelompok hewan coba yang diberi metformin. Hal ini menyatakan bahwa tidak terdapat perbedaan yang nyata antara kelompok EEGM

dosis 100 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb dengan kelompok metformin. Sedangkan kelompok EEGM dosis 200 mg/kg bb mempunyai nilai signifikan < 0,05 jika dibandingkan dengan kelompok metformin. Hal ini menyatakan bahwa kelompok EEGM dosis 200 mg/kg bb terdapat perbedaan yang nyata jika dibandingkan dengan kelompok metformin.

Pada hari ke-15 terjadi peningkatan persentase penurunan KGD. Persentase penurunan KGD yang berturut-turut dari besar ke kecil adalah kontrol Na-CMC, EEGM dosis 100 mg/kg bb, EEGM dosis 200 mg/kg bb, EEGM dosis 400 mg/kg bb, dan metformin 65 mg/kg bb. Data persentase penurunan KGD pada hari ke-15 dapat dilihat pada Tabel 4.9.

Tabel 4.9 Hasil persentase penurunan KGD rata-rata mencit hari ke-15 setelah

perlakuan Kelompok Uji

% penurunan KGD rata-rata setelah perlakuan (mg/dL) ± SEM

hari ke-15 p

Kontrol Na-CMC 0,5% 33,78 ± 1,53 -

0,000#

EEGM 100 mg/kg bb 72,48 ± 1,79 0,000*

0,000#

EEGM 200 mg/kg bb 80,20 ± 0,85 0,000*

0,219

EEGM 400 mg/kg bb 80,65 ± 0,87 0,000*

0,321

Metformin 65 mg/kg bb 84,30 ± 1,29 0,000*

- Keterangan :

* berbeda signifikan dengan kelompok kontrol Na-CMC # berbeda signifikan dengan kelompok pembanding metformin

Berdasarkan Tabel 4.9 terdapat perbedaan yang nyata persentase penurunan KGD antara kelompok hewan coba yang diberi EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, 400 mg/kg bb dan metformin 65 mg/kg bb jika dibandingkan dengan kelompok hewan coba yang diberi Na-CMC. Hal ini

ditunjukkan dengan nilai signifikan < 0,05. Apabila dibandingkan antara kelompok hewan coba yang diberi EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb dengan kelompok hewan coba yang diberi metformin 65 mg/kg bb, kelompok hewan coba yang diberi EEGM dosis 100 mg/kg bb terdapat perbedaan yang nyata dengan kelompok hewan coba yang diberi metformin (nilai signifikan < 0,05). Sedangkan kelompok hewan coba yang diberi EEGM dosis 200 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb tidak terdapat perbedaan yang nyata jika dibandingkan dengan kelompok hewan coba yang diberi metformin dosis 65 mg/kg bb. Hal ini menyatakan bahwa kerja EEGM dosis 200 mg/kg bb dan dosis 400 mg/kg bb dalam menurunkan KGD mencit yang diinduksi aloksan efektifitasnya menyerupai metformin dosis 65 mg/kg bb. Jika dilihat dari nilai persentase penurunan KGD kelompok hewan coba yang diberikan metformin dosis 65 mg/kg bb tetap memiliki nilai penurunan KGD yang lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok hewan coba yang diberikan EEGM dosis 200 mg/kg bb dan EEGM dosis 400 mg/kg bb.

Berdasarkan hasil di atas dapat disimpulkan bahwa pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb telah dapat menurunkan KGD mencit yang diinduksi aloksan. Pemberian EEGM dosis 100 mg/kg bb dan EEGM dosis 400 mg/kg bb mengalami penurunan KGD yang tidak berbeda signifikan pada hari ke-3, 6, 9, dan 12, namun pada hari ke-15 EEGM dosis 200 mg/kg bb dan EEGM dosis 400 mg/kg bb mengalami penurunan KGD yang tidak berbeda signifikan dengan metformin. Peningkatan dosis obat seharusnya menigkatkan respon yang sebanding dengan dosis yang ditingkatkan, namun dengan peningkatan dosis respon akhirnya menurun karena sudah tercapainya

dosis yang sudah tidak dapat meningkatkan respon lagi (Zastrow dan Bourne, 2001).

Penurunan KGD dengan pemberian EEGM disebabkan adanya senyawa bioaktif yang terkandung dalam EEGM yang dapat menghambat terjadinya

oksidasi sel pankreas akibat induksi aloksan sehingga kerusakan lanjut dapat

diminimalkan. Ekstrak etanol ganggang merah mengandung fitosterol yang berfungsi sebagai antioksidan dan mampu menahan laju absorbsi glukosa darah dari saluran cerna menuju pembuluh darah sehingga mampu menahan laju peningkatan kadar glukosa darah (Suhartono., dkk, 2005). Data persentase penurunan kadar glukosa darah dari hewan coba selama perlakuan dapat dilihat pada Gambar 4.1.

Gambar 4.1 Grafik Persentase Penurunan Rata-rata KGD Mencit Setelah

Perlakuan 0

10 20 30 40 50 60 70 80 90

Hari Ke-3 Hari Ke-6 Hari ke-9 Hari Ke-12 Hari Ke-15

P

er

sent

a

se

P

enurun

a

n

K

G

D

(%)

Waktu Pengamatan

kontrol Na-CMC 0,5% EEGM 100 mg/kg bb EEGM 200 mg/kg bb EEGM 400 mg/kg bb Metformin 65 mg/kg bb

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa :

a. Golongan senyawa yang terdapat pada simplisia ganggang merah Kappaphycus alvarezii selain karagenan adalah adanya glikosida, saponin, dan steroid/triterpenoid.

b. Karakteristik simplisia ganggang merah Kappaphycus alvarezii yang diperoleh adalah kadar air 7,81%, kadar sari larut dalam air 30,32%, kadar sari larut dalam etanol 10,33%, kadar abu total 18,14%, dan kadar abu tidak larut dalam asam 0,55%, karakteristik yang diperoleh dapat dijadikan sebagai informasi dan acuan pada penelitian selanjutnya.

c. Ekstrak Etanol Ganggang Merah (EEGM) Kappaphycus alvarezii dosis 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb, dan 400 mg/kg bb dapat menurunkan kadar glukosa darah mencit yang diinduksi aloksan dengan masing-masing persentase penurunan yaitu 72,48%, 80,20%, dan 80,65% dan menunjukkan perbedaan signifikan terhadap Na-CMC 0,5% dengan nilai signifikan 0,000.

5.2 Saran

Disarankan peneliti selanjutnya mengevaluasi keamanan dan efikasi penggunaan ganggang merah Kappaphycus alvarezii sebagai obat antidiabetes oral.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan

Rumput laut atau Algae termasuk tumbuhan bertalus karena mempunyai struktur kerangka tubuh (morfologi) yang tidak berdaun, berbatang, dan berakar semuanya terdiri dari talus saja. Rumput laut umumnya terdapat di daerah tertentu dengan persyaratan khusus, kebanyakan tumbuh di daerah pasang surut (intertidal) atau pada daerah yang selalu terendam air (subtidal) melekat pada substrat didasar perairan yang berupa karang batu mati, karang batu hidup, batu gamping atau cangkang moluska. Umumnya tumbuh dengan baik di daerah pantai terumbu, karena di tempat inilah beberapa persyaratan untuk pertumbuhannya banyak terpenuhi, diantaranya factor kedalaman perairan, cahaya, substrat, dan gerakan air. Habitat khas adalah daerah yang memperoleh aliran air laut yang tetap, lebih menyukai variasi suhu harian yang rendah dan substrat batu karang mati. Rumput laut tumbuh berkelompok dengan jenis rumput laut lainnya (Aslan, 1998).

Algae atau ganggang terdiri dari empat kelas, yaitu Rhodophyceae (ganggang merah), Phaeophyceae (ganggang coklat), Chlorophyceae (ganggang hijau), dan Cyanophyceae (ganggang hijau-biru). Rumput laut Kappaphycus alvarezii merupakan jenis ganggang yang bersifat makroskopik dan tergolong dalam kelas Rhodophyceae (Indriani, 1991).

2.1.1 Sistematika Tumbuhan

Berdasarkan hasil identifikasi LIPI, taksonomi rumput laut Kappaphycus alvarezii diklasifikasikan sebagai berikut:

Filum/Divisio : Rhodophyta Kelas/Class : Rhodophyceae Bangsa/Ordo : Gigartinales Suku/Famili : Areschougiaceae Marga/Genus : Kappaphycus

Jenis/Spesies : Kappaphycus alvarezii

2.1.2 Nama Daerah

Nama daerah (dagang) yang lebih dikenal untuk Kappaphycus alvarezii yaitu Eucheuma cottonii dan Eucheuma alvarezii (Anggadiredja, dkk., 2010).

2.1.3 Morfologi Tumbuhan

Ciri-ciri Kappaphycus alvarezii yaitu memiliki talus bentuk silindris, permukaan licin, berwarna cokelat kemerahan karena bersifat adaptasi kromatik, yaitu memiliki penyesuaian antara proporsi pigmen dengan berbagai kualitas pencahayaan dan dapat menimbulkan berbagai warna pada talus seperti: merah tua, merah muda, pirang, coklat, kuning dan hijau. Keadaan warna tidak selalu dapat digunakan dalam menentukan kelasnya. Perubahan warna sering terjadi hanya karena faktor lingkungan yang berubah. Kejadian ini merupakan proses modifikasi yaitu perubahan bentuk dan sifat luar (fenotipe) yang tidak kekal sebagai pengaruh lingkungan antara lain iklim dan oseanografi yang relatif cukup besar (Aslan, 1998). Percabangan talus berujung runcing atau tumpul, ditumbuhi nodulus (tonjolan-tonjolan) dan duri untuk melindungi gametangia. Percabangan bersifat alternates (berseling), tidak teratur serta dapat bersifat dichotomus (percabangan dua-dua) atau trichotomus (sistem percabangan tiga-tiga) (Anggadiredja, dkk., 2010).

2.1.4 Kandungan Kimia

Jenis rumput laut yang termasuk dalam kelas Rhodophyceae (alga merah) mengandung pigmen antara lain klorofil a, klorofil d, α dan karoten, lutein, zeaxanthin, fikosianin dan fikoeritrin. Fikoeritrin merupakan suatu pigmen dominan yang menyebabkan warna merah pada alga merah. Selain itu, zat yang utama dihasilkan Kappaphycus alvarezii adalah karagenan (Winarno, 1996).

2.1.5 Khasiat Tumbuhan

Zat yang utama dihasilkan Kappaphycus alvarezii adalah karagenan (Winarno, 1996). Karagenan merupakan senyawa polisakarida yang dihasilkan dari alga merah memiliki sifat antidiabetes, antikolesterol, antimikroba dan aktivitas biologis lainnya. Selain karagenan yang merupakan metabolit primer rumput laut Kappaphycus alvarezii diperkirakan senyawa metabolit sekundernya juga dapat menghasilkan aktivitas antidiabetes.

Senyawa metabolit sekunder tersebut adalah senyawa steroid. Beberapa turunan steroid yang penting ialah steroid alkohol atau sterol. Steroid yang ditemukan dalam jaringan tumbuhan disebut fitosterol. Beberapa senyawa ini jika terdapat dalam tumbuhan akan dapat berperan menjadi pelindung (Sharo., dkk, 2013). Sterol juga berfungsi sebagai antioksidan yang mampu menahan laju absorbsi glukosa darah dari saluran cerna menuju pembuluh darah sehingga mampu menahan laju peningkatan kadar glukosa darah. Dengan mencegah peningkatan kadar glukosa darah juga dapat mencegah peningkatan radikal bebas (Suhartono., dkk, 2005).

2.2 Ekstraksi dan Metode Ekstraksi

2.2.1 Ekstraksi

Ekstraksi adalah suatu proses pemisahan kandungan senyawa kimia dari jaringan tumbuhan maupun hewan. Sebelum ekstraksi dilakukan biasanya bahan dikeringkan terlebih dahulu kemudian dihaluskan pada derajat kehalusan tertentu (Harborne, 1987).

2.2.2 Metode Ekstraksi

1. Cara Dingin a. Maserasi

Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana. Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif, zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam sel dengan yang di luar sel, maka larutan yang terpekat di desak ke luar. Peristiwa tersebut berulang sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam sel. Keuntungan maserasi adalah cara pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana dan mudah diusahakan (Depkes RI, 1986).

b. Perkolasi

Perkolasi adalah cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi. Alat yang digunakan untuk perkolasi disebut perkolator, cairan yang digunakan untuk menyari disebut cairan penyari atau menstrum, larutan zat aktif yang keluar dari perkolator disebut sari atau perkolat, sedang sisa setelah dilakukannya penyarian disebut ampas atau

sisa perkolasi. Cara perkolasi lebih baik dibandingkan dengan cara maserasi karena:

1) Aliran cairan penyari menyebabkan adanya pergantian larutan yang terjadi dengan larutan yang konsentrasinya lebih rendah, sehingga meningkatkan derajat perbedaan konsentrasi.

2) Ruangan di antara butir-butir serbuk simplisia membentuk saluran tempat mengalir cairan penyari. Karena kecilnya saluran kapiler tersebut, maka kecepatan pelarut cukup untuk mengurangi lapisan batas, sehingga dapat meningkatkan konsentrasi (Depkes RI, 1986).

2. Cara Panas a. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna.

b. Soxhletasi

Soxhletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat soxhlet yang sampelnya dibungkus dengan kertas saring sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Depkes RI, 1986).

c. Digesti

Digesti adalah cara maserasi dengan menggunakan pemanasan lemah, yaitu pada suhu 400 – 500 C. Cara maserasi ini hanya dapat dilakukan untuk simplisia yang zat aktifnya tahan terhadap pemanasan (Depkes RI, 1986).

d. Infundasi

Infundasi adalah proses penyarian yang umumnya digunakan untuk menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Infus adalah sediaan cair yang dibuat dengan menyari simplisia dengan air pada suhu 900 C selama 15 menit (Depkes RI, 1986).

e. Dekoktasi

Dekoktasi adalah infundasi pada waktu yang lebih lama (≥ 30 menit) dan temperatur sampai titik didih air (Depkes RI, 1986).

2.3 Pengaturan Kadar Glukosa Dalam Darah

Kadar glukosa darah sangat dipengaruhi fungsi hepar, pankreas, adenohipofisis, dan adrenal. Kecuali itu, faktor imunologik dan genetik dapat berpengaruh pada kadar glukosa darah.

a. Hepar

Glukosa yang berasal dari absorpsi makanan di intestin dialirkan ke hepar melalui vena porta, sebagian glukosa akan disimpan sebagai glikogen. Pada saat ini kadar glukosa di vena porta lebih tinggi daripada di vena hepatika. Setelah absorpsi selesai glikogen hepar dipecah lagi menjadi glukosa, sehingga kadar glukosa di vena hepatika lebih tinggi daripada di vena porta. Jadi, hepar berperan sebagai glukostat. Pada keadaan normal glikogen di hepar cukup untuk mempertahankan kadar glukosa dalam beberapa hari, tetapi bila fungsi hepar terganggu akan mudah terjadi hipoglikemia atau hiperglikemia.

3.3.4 Pereaksi Asam Klorida 2 N ... 21

3.3.5 Pereaksi Asam Sulfat 2 N ... 21

3.3.6 Pereaksi Kloralhidrat ... 21

3.3.7 Pereaksi Mayer ... 22

3.3.8 Pereaksi Molish ... 22

3.3.9 Pereaksi Dragendorff ... 22

3.3.10 Pereaksi Bouchardat ... 22

3.3.11 Pereaksi Liebermann-Burchard ... 22

3.4 Pemeriksaan Karakteristik ... 23

3.4.1 Pemeriksaan Makroskopik Dan Organoleptik ... 23

3.4.2 Pemeriksaan Mikroskopik ... 23

3.4.3 Penetapan Kadar Air ... 23

3.4.4 Penetapan Kadar Sari Yang Larut Dalam Air ... 24

3.4.5 Penetapan Kadar Sari Yang Larut Dalam Etanol ... 24

3.4.6 Penetapan Kadar Abu Total ... 25

3.4.7 Penetapan Kadar Abu Yang Tidak Larut Dalam Asam .... 25

3.5 Skrining Fitokimia ... 25

3.5.1 Pemeriksaan Flavonoid ... 26

3.5.2 Pemeriksaan Alkaloid ... 26

3.5.3 Pemeriksaan Saponin ... 26

3.5.4 Pemeriksaan Tanin ... 27

3.5.5 Pemeriksaan Glikosida ... 27

3.5.6 Pemeriksaan Steroid/Triterpenoid ... 27

3.7 Penyiapan Hewan Percobaan ... 28

3.8 Pengujian Efek Penurunan KGD ... 28

3.8.1 Pembuatan Suspensi Na-CMC 0,5% b/v ... 28

3.8.2 Pembuatan Suspensi Metformin ... 29

3.8.3 Pembuatan Suspensi EEGM ... 29

3.8.4 Pembuatan Larutan Aloksan 150 mg/kg bb ... 29

3.8.5 Penggunaan Blood Glucose Test Meter ... 29

3.8.6 Pengukuran KGD ... 30

3.8.7 Uji Pendahuluan dan Orientasi Dosis ... 30

3.8.8 Pengujian Aktivitas Antidiabetes EEGM Metode Induksi Aloksan ... 31

3.8.9 Analisis Data ... 32

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 33

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 33

4.2 Hasil Karakterisasi ... 33

4.2.1 Hasil Pemeriksaan Makroskopik ... 33

4.2.2 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik ... ... 34

4.2.3 Hasil Pemeriksaan Karakteristik ... 34

4.3 Hasil Skrining Fitokimia ... 36

4.4 Ekstraksi ... 37

5.1 Kesimpulan ... 49

5.2 Saran ... ... 49

DAFTAR PUSTAKA ... 50

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1 Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia Ganggang Merah... 34 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia Ganggang Merah... 36 4.3 Hasil Pengukuran KGD Puasa Rata-rata Mencit Sebelum Induksi

Aloksan ... 39 4.4 Hasil Pengukuran KGD Puasa Rata-rata Mencit Setelah Induksi

Aloksan ... 39 4.5 Hasil Persentase Penurunan KGD Rata-rata Mencit Hari Ke-3

Setelah Perlakuan... 40 4.6 Hasil Persentase Penurunan KGD Rata-rata Mencit Hari Ke-6

Setelah Perlakuan... 41 4.7 Hasil Persentase Penurunan KGD Rata-rata Mencit Hari Ke-9

Setelah Perlakuan... 43 4.8 Hasil Persentase Penurunan KGD Rata-rata Mencit Hari Ke-12

Setelah Perlakuan... 44 4.9 Hasil Persentase Penurunan KGD Rata-rata Mencit Hari Ke-15

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1 Skema Kerangka Pikir Penelitian ... 6 4.1 Grafik Persentase Penurunan Kadar Gula Darah Mencit Setelah Perlakuan Metode Induksi Aloksan ... 48

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Surat Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 53

2 Surat Rekomendasi Persetujuan Etik Penelitian ... 54

3 Bagan Kerja Penelitian ... 55

4 Gambar Ganggang Merah Kappaphycus alvarezii Segar ... 56

5 Gambar Simplisia dan Serbuk Kasar Ganggang Merah Kappaphycus alvarezii... 57

6 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Serbuk Simplisia Ganggang Merah Kappaphycus alvarezii ... 58

7 Gambar Alat Glukometer dan Salah Satu Hasil KGD Mencit (Puasa dan Diabetes)... 59

8 Perhitungan Pemeriksaan Karakteristik Serbuk Simplisia Ganggang Merah Kappaphycus alvarezii ... 60

9 Contoh Perhitungan Dosis ... 65

10 Data KGD Mencit ... 69

11 Data Persentase Penurunan KGD Mencit ... 70