III. METODOLOGI PENELITIAN
A. WAKTU DAN TEMPAT PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei sampai November 2012. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium General Microbiology, Fermentation Microbiology South East Asia for Food and
Agricultural Science and Technology SEAFAST Center, Institut Pertanian Bogor.
B. BAHAN DAN ALAT
Kultur yang digunakan pada penelitian ini adalah isolat BAL asal ASI koleksi SEAFAST Center IPB, yaitu Lactobacillus rhamnosus R21. Isolat tersebut memiliki ketahanan terhadap suhu
tinggi dan memiliki kemampuan menghambat E. coli enteropatogenik K.1.1 EPEC K.1.1 Hartanti 2007. Isolat ini juga mampu menghambat pertumbuhan Cronobacter sakazakii YRC3a selama
rekonstitusi susu formula bayi Saputra 2012. Kultur Salmonella yang digunakan adalah Salmonella enterica serovar Typhimurium ATCC 14028 atau lebih sering disebut Salmonella Typhimurium.
Bahan uji yang digunakan adalah susu formula sufor komersial untuk bayi usia 0-6 bulan dengan komposisi nutrisi: karbohidrat 59 g100 g, protein 9.8 g100 g, lemak 24 g100 g, dan
nutrisi lainnya berdasarkan informasi nilai gizi yang tercantum di kemasan produk. Bahan lain yang digunakan meliputi air minum steril, larutan fisiologis NaCl 0.85 steril, akuades steril, serta buffer
pH 4 dan pH 7. Media yang digunakan, yaitu de Man Rogosa Sharp Broth MRSB OXOID CM0359, de Man Rogosa Sharp Agar MRSA OXOID CM0361 dan MERCK 1.10660.0500,
MRSA-Acetic Acid MRSA-AA Fitriyah 2010, Nutrient Broth NB OXOID CM0001, Nutrient Agar NA MERCK 1.05450.0500, Bismuth Sulfite Agar BSA Difco 273300 dan MERCK
1.05418.0500, dan Xylose Lysine Deoxycholate Agar XLDA Difco 278850. Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah pipet mikro Finnpipette berikut tip, vortex
Vortex-Genie 2, Sentrifuse Sorvall, inkubator Incucell MMM-Group, termometer 100
o
C, hot plate Steroglass, pH Meter Eutech pH meter 700, Autoklaf ALP Model-40, laminar flow
Labconco purifier class II biosafety cabinet-delta series, botol susu 25 mL, dan alat analisis mikrobiologi standar lainnya.
C. METODE PENELITIAN
Kategori