Saran Ekstraksi dan identifikasi senyawa bioaktif lintah laut (Discodoris sp.) sebagai antioksidan

Hanani E, Mun’im A, Sekarini R. 2005. Identifikasi Senyawa Antioksidan dalam Spons Callyspongia sp. dari Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian, 23:127 –133. Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia. Padmawinata K, Soediro I, penerjemah. Bandung: ITB. Terjemahan dari: Phytochemical Methods. Harris CA, Henttu P, Parker MG, Sumter JP. 1997. The Estrogenic activity of phthalate esters In Vitro. Environ Health Perspect 1058:802-811. Hawab HM. 2003. Pengantar Biokimia. Edisi pertama. Cetakan pertama. Bayumedia Publishing. Malang. Helper LJ, Deaton BJ, Driskel JA. 1988. Pangan, gizi dan pertanian. Suhardjo, penerjemah. Jakarta: Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi. Terjemahan dari: Food, Nutrition and Agriculture. Higa T, Junichi T, Ikuko I. Ohatani, Musri Musman, Michael C. Roy and Ikuma Kuroda. 2001. Bioactive compounds from coral reef invertebratates. Journal Pure Appl Chem.733:589-593. Holland JS. 2009. Nudibranch si siput tak bercangkang. http:farmasea.blogspot.com [13 Maret 2009]. Houghton PJ, Raman A. 1998. Laboratory Handbook for the Fractionation of Natutal Extracts. London: Chapman and Hall. Huang ZR, Lin YK, Fang YJ. 2009. Biological and pharmacological activities of squalene and related compounds: Potential uses in cosmetic dermatology. Molecules.14:540–554. Hustiany R. 2005. Karakteristik produk olahan kerupuk dan surimi dari daging ikan patin Pangasius sutchi hasil budidaya sebagai sumber protein hewani. Media Gizi Keluarga.292:66-74. Ibrahim M. 2001. Isolasi dan uji aktivitas biologi senyawa steroid dari lintah laut, Discodoris sp. [Tesis]. Program Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Jordi M. 2010. Extruder unknown identification; Case study. Final Report. Jordi Labs LLC. USA. Kasuro P and Schewer PJ. 2002. Natural products from three nudibranchs: Nembrotha kubaryana, Hypselodoris infucata and Chromodoris petechialis. Journal of Molecules.71:1-6. Kaufman PB, Cseke LJ, Warber S, Duke JA, Brielmann HL. 1999. Natural Products from Plants. Boca Raton: CRC. Ketaren S. 1986. Pengantar Teknologi Minyak dan Lemak Pangan. Jakarta: UI Press. Khopkar SM. 1990. Konsep Dasar Kimia Analitik. Saptoraharjo A, penerjemah; Jakarta: UI Press. Terjemahan dari: Basic Concept of Analytical Chemestry. Kim SH, Kim SS, Kwon O, Sohn KH, Kwack SJ, Choi YW, Han SY, Lee MK, Park KL. 2002. Effects of dibutyl phthalate and monobutyl phthalate on cytotoxicity and differentiation in cultured rat embryonic limb bud cells; protection by antioxidants. Jounal of Toxicology and Environmental Health A.656:461-72. Lehninger. 1988. Dasar-dasar Biokimia. Jilid I. Terjemahan. Penerbit Erlangga. Jakarta. Liu W, Guo R. 2006. Interaction of flavonoid, quercetin with organized molecular assemblies of nonionic surfactant. Colloids and Surfaces A: Physicochem. Eng. Aspects. 274:192-199. Markham KR. 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Kosasih Padmawinata, penerjemah. ITB Bandung. Martin RE, Carter CP, Flick GJ, Davis LM. 2000. Bioactive compounds from the sea. Marine and Fresh Water Product Handbook. 641-661. Meloan CE. 1999. Chemical Separation. Principle, Techniques and Expremints. Canada. John Wiley and Sons publication. Miura D, Kida Y, Nojima H. 2007. Camellia oil and its distillate fractions effectively inhibit the spontaneous metastasis of mouse melanoma BL6 cells. FEBS Lett. 58113:2541-2548. Mollo E, Gavagnin M, Carbone M, Castelluccio F, Pozone F, Roussis V, Templados J, Ghiselin MT, Cimino G. 2008. Factors promoting marine invasions:a chemoecological approach. PNAS. 10512:4582-4586. Molyneux P. 2004. The use of the stable free radicals diphenylpicrylhydrazyl DPPH for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci. Technol. 262:211-219. Murata K, Ikehata H, Miyamoto T. 1969. The taste of amino acids, peptides, protein. J. Food Agr. Sci 174:686-687. Naiu AS. 2011. Formulasi minuman fungsional berbahan baku lintah laut. [Tesis]. Sekolah Pascasarjana IPB. Bogor. Nurjanah, Hardjito L, Monintja DR, Bintang M, Agungpriyono DR. 2010. Karakterisasi Lintah Laut Discodoris sp. sebagai antioksidan dan antikolesterol.[Disertasi]. Sekolah Pascasarjana IPB. Bogor. Nur MA, Adijuwana HA. 1989. Teknik Pemisahan dalam Analisis Biologi. Bogor: Pusat Antar Universitas Ilmu Hayat, Institut Pertanian Bogor. Oktay M, Gulcin I, Irfan OK. 2003. Determination of in vitro antioxidant activity of fennel Foeniculum vulgare seed extracts. LWT - Food Science and Technology. 362:263-271. Poedjiadi A. 1994. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta: UI Press. Pranoto T. 2006. Asam Lemak Tak Jenuh-Penurun Resiko Penyakit Jantung Koroner. Fakultas Kesehatan Masyarakat. Universitas Indonesia. Putra SE, Putra JA. 2006. Bioremoval. Metode Alternatif Untuk Menanggulangi Pencemaran Logam Berat. http:www. Chem-is- try.org?sect=artikelext=95. [5 Juli 2010]. Putra SE. 2007. Alkaloid: senyawa organik terbanyak di alam. http:www.chem- is-try.orgartikel_kimiabiokimiaalkaloid_senyawa_organik_terbanyak di_alam. [20 November 2010]. Rohman A, Riyanto R, Diah U. 2006. Aktivitas antioksidan, kandungan fenolik total dan kandungan flavonoid total ekstrak etil asetat buah Mengkudu serta fraksi-fraksinya. Majalah Farmasi Indonesia. 173:136–142. Roswien AP, Bintang M, Kustaman E, Ambarsari L, Safithri M, Hawab M. 2006. Biokimia Umum Jilid 1. Bogor: FMIPA-IPB. Rotella, P. 2002. Healthy Fat-Essential Fatty Acids. Artikel. Veggiecooking.com. Rudman, W.B. 1999. Discodoris sp.. Sea Slug Forum. http: www. Austunus.gov.ausea slugsdisclia.utm. Sanusi SH, Syamsu S, Sadjirun S. 1985. Kandungan dan Dan Distribusi Logam Berat Pada Berbagai Komoditi Ikan Laut yang Disalurkan Lewat TPI Pasar Ikan, Jakarta. Bogor : IPB Press. Sarker SD, Latif Z, Gray AI. 2006. Methods in Biotechnology. Natural Products Isolation. Second edition. Humana Press. Totowa. New Jersey. Sarker SD, Nahar L. 2007. Chemistry for Pharmacy Students. General, Organic and Natural Product Chemistry. Chichester:John Wiley. Sastrohamidjojo H. 1996. Sintesis Bahan Alam. Yogyakarta: Gadjah mada University Press. Schmidt G, Steinhart H. 2001. Impact of extraction solvents on steroid contents determined in beef. Journal of Food chemistry. 76:83–88. Seidel V. 2006. Initial and bulk ekxtraction. Methods in Biotechnology. Natural Products Isolation. Second edition. 20:27-46. Setzer WN. 2008. Non-intercalative triterpenoid inhibitors of topoisomerase II: a molecular docking study. The Open Bioactive Compounds Journal 1:13-17. Shallenberger RS. 1993. Teste Chemistry. London: Blackie Academic Profesional. Sherif SE, Edrada RA, Lin W dan Procksch P. 2008. Methods for isolation, purification and structural elucidation of bioactive secondary metabolites from marine invertebrata. Nature Protocols.312:1820-1831. Siagian A. 2002. Bahan Tambahan Makanan. Sumatera: Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Sumatera Utara. Silva BP, Sousa AC, Silva GM, Mendes TP, Parente JP. 2002. A new bioactive steroidal saponin from Agave attenuata. Z Naturforsch 57C:423-428. Sirait M. 2007. Penuntun Fitokimia dalam Farmasi. Bandung: ITB. Smith RA, Porteous CM, Coulter CV, Murphy MP. 1999. Selective targeting of an antioxidant to mitochondria. European journal of biochemistry, 2633:709-716. Solmons F. 2004. Organic Chemistry. USA:John Willey and Sons. Inc Sorowako. 2008. Nudibranch, sicantik penghias terumbu karang. http:sorowako.net [13 Maret 2010]. Steel RGD dan Torrie JH. 1995. Prinsip dan Prosedur Statistik. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama. Sudarmadji S, Haryono B, Suhardi. 2007. Analisa Bahan Makanan dan Pertanian. Cetakan ketiga. Yogyakarta: Liberty. Tejasari. 2003. Nilai Gizi Pangan. Yogyakarta: Graha Ilmu. Weir GSD. 1992. Proteins as A Source of Flavour. Di dalam Hudson BJF, editor. Biochemistry of Food Proteins. London:Elsevier Applied Science. Wilson dan Gisvold. 1982. Kimia Farmasi dan Medisinal Organik. Fatah AM, penerjemah. Semarang: IKIP Press. Terjemahan dari: Organic Medicinal and Pharmaceutical Chemistry. Winarno FG. 2008. Kimia Pangan dan Gizi. Bogor: M-BRIO Press. Winarsi H. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta: Penerbit KANISIUS. Witjaksono HT. 2005. Komposisi kimia ekstrak dan minyak dari lintah laut Discodoris boholensis.[Tesis]. Bogor: Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Wojnar JM. 2008. Isolation of new secondary metabolites from New Zealand marine invertebrates. [Thesis]. Chemistry Department. Victoria University of Wellington. LAMPIRAN Lampiran 1 Kromatogram standar asam amino pada HPLC Lampiran 2 Kromatogram asam amino daging lintah laut pada HPLC Lampiran 3 K romatogram asam amino jeroan lintah laut pada HPLC Lampiran 4 Contoh perhitungan asam amino glutamat pada daging lintah laut g sampel Bobot 100 x BM FP x C x standar area Luas sampel area Luas amino asam i Konsentras µ x = 130445 100 x 2 , 147 x 10 x 5 x 1376498 534833 amino asam i Konsentras = Konsentrasi asam amino glutamat pada daging lintah laut = 2,192 Lampiran 5 Kromatogram standar asam lemak pada GC Lampiran 6 Kromatogram asam lemak daging lintah laut pada GC Lampiran 7 Kromatogram asam lemak jeroan lintah laut pada GC Lampiran 8 Contoh perhitungan asam lemak lenolenat pada daging lintah laut 100 x pelarut i Konsentras - 100 sampel i Konsentras lemak mgg lemak Asam = 100 x 2551 , 97 100 5739 , lemak mg lemak Asam − = Konsentrasi asam lemak lenolenat pada daging lintah laut = 20,908 Lampiran 9 Hasil analisis sidik ragam aktivitas antioksidan ekstrak kasar lintah laut Perlakuan Ulangan 1 Ulangan 2 Nilai IC50 SD Kloroform daging 515,479 458,987 487,233 39,946 Kloroform jeroan 1327,750 1211,604 1269,677 82,128 Etil asetat daging 4407,455 2519,650 3463,552 1334,879 Etil asetat jeroan 2655,211 2397,000 2526,105 182,582 Etanol daging 452,651 429,586 441,118 16,309 Etanol jeroan 871,955 792,895 832,425 55,904 Tabel Sidik Ragam Sumber keragaan db Jumlah kuadrat Kuadrat tengah Fhit Ftab Perlakuan 5 15.107.987,21 3.021.597,44 A 2 13.463.841,36 6.731.920,68 22,11 5,14 B 1 18.613,08 18.613,08 0,06 5,99 AB 2 1.625.532,78 812.766,39 2,67 5,14 Sisa 6 1.826.971,21 304.495,20 Total 11 16.934.958,42 A : jenis pelarut B : bagian lintah laut AB : interaksi jenis pelarut dengan bagian lintah laut Uji lanjut BNT t hit = 945,788 A B C D E F A 782,444 2976,319 2038,872 46,115 345,192 B 2193,875 1256,428 828,559 437,252 C 937,447 3022,434 2631,127 D 2084,987 1693,680 E 391,307 F Lampiran 10 Hasil analisis sidik ragam aktivitas antioksidan masing-masing fraksi Perlakuan Nilai IC50 SD Ulangan 1 Ulangan 2 rata-rata F1 274.815 267.857 271.336 4.920 F2 250.690 236.774 243.732 9.840 F3 229.697 193.846 211.772 25.350 F4 162.321 174.314 168.318 8.480 F5 162.321 139.516 150.919 16.126 F6 173.846 170.577 172.212 2.312 Tabel sidik ragam Sumber keragaan dB Jumlah kuadrat Kuadrat tengah Fhit Ftab Perlakuan 5 22538,153 4507,630 24.566 4.390 Sisa 6 1100,958 183,493 Total 11 23639,109 Uji lanjut BNT t hit = 23,217 A B C D E F A 27,604 59,564 103,018 120,417 99,124 B 31,960 75,414 92,813 71,520 C 43,454 60,853 39,560 D 17,399 3,894 E 21,293 F Lampiran 11 Kromatogram GC-MS secara umum senyawa pada lintah laut Lampiran 12 Hasil identifikasi senyawa galoksolid lintah laut pada GS-MS Lampiran 13 Hasil identifikasi senyawa dibutil ftalat lintah laut pada GS-MS Lampiran 14 Hasil identifikasi senyawa dioktil ftalat lintah laut pada GS-MS Lampiran 15 Hasil identifikasi senyawa oleilamida lintah laut pada GS-MS Lampiran 16 Hasil identifikasi senyawa erusilamid lintah laut pada GS-MS Lampiran 17 Hasil identifikasi senyawa skualen lintah laut pada GS-MS ABSTRACT HAFILUDDIN . Extraction and Identification of Bioactive Compounds Sea Slug Discodoris sp. as an antioxidant. Supervised by TATI NURHAYATI dan NURJANAH One of the commodities produced from the ocean that have a bioactive compounds is a sea slug Discodoris sp.. That is very interesting to study mainly deals with the nature of both chemical and biochemical characteristics and their use for the field of food and health. The purpose of this study is to determine the nutrient content of sea slug, determine antioxidant activity, and determine the bioactive compounds of sea slug. The experiment was conducted with several stages: sample preparation, extraction bioactive compound, fractionation by TLC and identification of compounds by GC-MS. Sea slug from the island of Madura Pamekasan potential as a source of protein, fat, and minerals. Sea slug has esensial amino acids amount to 5,57 was dominated by leucin of 1,42. Nonesensial amino acids amount to 6,54 wich was dominated by glutamic acid 2,19. Saturated fatty acids amounted to 27.53 of sea slug was dominated by palmitic C16:0 which was 13.36. Unsaturated fatty acids amounted to 34.66, which was dominated by the essential fatty acids linolenic C18:3, n-3 20.91. The highest yield of the crude extract was ethanol of 6,97 and contained alkaloid, steroids, saponin, phenols, carbohydrates and reducing sugar compound. The bioactive compounds in the meat of sea slug with ethanol solvent was galoxolide, dibuthyl phthalate, di-n-octhyl phthalate, oleic acid amide, erucylamide, squalene and has an IC 50 best antioxidant activity in fraction 5 at 150.92 ppm. Key words: antioxidant, bioactive compounds, sea sluge Discodoris sp. 1 PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Lebih dari 70 permukaan bumi ini diliputi oleh lautan dan kehidupan yang asli di bumi ini terdapat dalam laut. Dalam ekosistem laut terdapat coral reef, para ahli mengestimasi bahwa kekayaan biologinya sama banyaknya dengan hutan hujan tropis. Organisme laut jenis sponge, soft coral, moluska tanpa cangkang atau hewan bertubuh lunak tergolong sesil atau bergerak lambat dan umumnya mempunyai pertahanan fisik yang kurang karena tidak memiliki pelindung kulit atau duri, organisme tersebut melakukan mekanisme pertahanan kimia yaitu mensintesis racun yang digunakan untuk melawan predator. Kondisi alam dan iklim Indonesia yang tidak fluktuatif membuat laut di Indonesia memiliki potensi sumberdaya dengan keanekaragaman hayati yang sangat besar. Sumberdaya laut tersebut belum terdayagunakan secara optimal. Pemanfaatan sumberdaya laut selain sebagai sumber pangan, juga berpotensi sebagai sumber senyawa bioaktif yang lebih bernilai ekonomis. Produk alami laut menarik perhatian ilmuwan dari berbagai bidang ilmu, yaitu kimia, farmakologi, biologi dan ekologi. Pemikiran ini didukung dengan fakta bahwa sebelum tahun 1995 terdapat 6.500 produk alami laut telah diisolasi, sedangkan jumlah tersebut sekarang meningkat menjadi lebih dari 19.000 senyawa. Salah satu contoh senyawa baru ditemukan dari laut dan digunakan sebagai obat, yaitu prialt ziconotida sebagai analgesik kuat untuk penyakit yang sudah kronis dan yondelis trabectedin atau E-743 sebagai antitumor Sherif et al. 2008. Salah satu komoditi yang dihasilkan dari laut dan mempunyai senyawa bioaktif adalah lintah laut Discodoris sp.. Senyawa bioaktif lintah laut sangat menarik untuk diteliti terutama berkaitan dengan sifat karakteristik kimia maupun biokimianya serta pemanfaatannya untuk bidang pangan dan kesehatan. Menurut pengalaman empiris, lintah laut telah lama digunakan oleh masyarakat pantai di daerah Pamekasan Madura yang dikenal dengan nama lokal ”kok-okok” karena lintah laut tubuhnya bisa memanjang dan mengkerut apabila disentuh. Lintah laut digunakan sebagai bahan pangan dan obat untuk menyembuhkan penyakit borok payudara bagi orang hamil dan menyusui. Lintah laut juga digunakan sebagai jamu untuk menyembuhkan penyakit punggung dan meningkatkan stamina. Beberapa penelitian tentang lintah laut telah dilakukan, yaitu isolasi senyawa steroid dari lintah laut dan ditemukan 7 jenis senyawa metabolit yang salah satu diantaranya adalah senyawa androgen Ibrahim 2001. Peneliti lain mengungkapkan bahwa lintah laut mengandung asam lemak jenuh dan tidak jenuh serta sterol pada fraksi nonpolar Witjaksono 2005. Hasil uji fitokimia dari ekstrak metanol lintah laut diperoleh kelompok alkaloid, steroid, asam amino, saponin dan fenol berperan sebagai antioksidan dengan rendemen yang terbesar, yaitu 5,12 serta aktivitas antioksidan 89,44 dibandingkan dengan pelarut yang lain Nurjanah et al. 2010. Lintah laut jenis Discodoris sp. telah dimanfaatkan sebagai formulasi minuman fungsional dan mempunyai aktivitas antioksidan Naiu 2010. Beberapa penelitian tentang senyawa bioaktif dari nudibranch masih terbatas pada penemuan senyawa yang belum diketahui aktivitasnya, yaitu Fontana 2001 berhasil mengisolasi senyawa bioaktif dari nudibranch berupa isokuinolin alkaloid, pentasiklik skalaran, furanoseskuiterpenoid. Wojnar 2008 mengisolasi senyawa terpen, makrolid, peptida dari golongan nudibranch. Mollo 2008 berhasil mengisolasi senyawa apigenin, genkwanin, chrisoeriol, syphonosid dari golongan opisthobranchia. Penelitian yang komprehensif tentang kandungan gizi dan komponen bioaktif dari lintah laut jenis Discodoris sp. ini masih sangat kurang, khasiat dan manfaatnya secara empiris perlu dibuktikan, sehingga diperlukan penelitian yang lebih lengkap untuk menentukan komposisi gizi, komponen kimia, ekstraksi dan identifikasi senyawa dari lintah laut.

1.2 Tujuan dan Manfaat Penelitian

Tujuan dari penelitian ini antara lain adalah: 1 Menentukan kandungan gizi lintah laut 2 Menentukan aktivitas antioksidan lintah laut 3 Menentukan senyawa bioaktif lintah laut Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dan pemanfaatan lintah laut dalam bidang pangan maupun dalam bidang kesehatan.

1.3 Hipotesis

Hipotesis yang harus diuji dari penelitian ini adalah pada spesies lintah laut Discodoris sp. di perairan pantai Kabupaten Pamekasan Madura mengandung komponen bioaktif yang berfungsi sebagai antioksidan dan pada bagian daging serta jeroannya memiliki aktivitas antioksidan yang berbeda-beda. 2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Lintah Laut Discodoris sp.

Lintah laut Discodoris sp. merupakan anggota dari kelompok ordo nudibranchia. Kata nudibranch berasal dari Bahasa Latin ”nudus” yang berarti telanjang dan bahasa Yunani ”brankhia” yang berarti insang. Kelompok hewan ini memiliki corak dan warna yang beraneka ragam, namun beberapa jenis dari hewan ini mempunyai kemampuan kamuflase yang handal sehingga cukup sulit untuk ditemukan Sorowako 2008. Menurut Wojnar 2008 lintah laut diklasifikasikan sebagai berikut: kingdom : Animal filum : Molusca kelas : Gastropoda sub kelas : Opistobranchia ordo : Nudibranchia sub ordo : Doridina famili : Dorididae genus : Discodoris sp. Gambar 1 Lintah laut Discodoris sp. Lintah laut Discodoris sp. memiliki tubuh yang berwarna coklat kehitam-hitaman dengan bintik putih dan garis pada bagian atas badannya. Permukaan tubuhnya licin dan tidak dilindungi oleh lapisan pelindung. Insang- insangnya berjumbaian di punggung, selain itu hewan ini memiliki kepala bertentakel yang sangat sensitif terhadap sentuhan, rasa dan bau. Matanya yang kecil hanya bisa melihat sedikit selain membedakan terang dan gelap Sorowako 2008. Daerah penyebaran genus Discodoris secara umum terdapat di daerah tropis dan subtropis, Samudera Hindia dan Pasifik khususnya di zona intertidal atau daerah pasang surut Rudman 1999. Organisme ini hidup dan menempel rapat pada batu-batuan yang berlumpur ataupun berpasir serta menghasilkan lendir mukus untuk mencegah dari kekeringan pada tubuhnya. Pada bagian bawah tubuhnya dapat bergerak dan menempel pada subtrat sehingga gerakannya lambat. Discodoris sp. adalah spesies yang banyak ditemukan di Kepulauan Philipina, Papua New Geunia, Indonesia, Okinawa, Afrika Selatan, dan Australia. Biasanya terdapat di perairan dangkal berpasir serta terumbu karang hingga di dasar laut dalam lebih dari satu kilometer dalamnya, nudibranch berkembang biak baik di perairan hangat maupun dingin dan bahkan di sekeliling cerobong- cerobong vulkanis yang menyembur di laut dalam Holland 2009. Lintah laut termasuk jenis hewan hermaprodit, artinya hewan yang mempunyai alat kelamin ganda yaitu jantan dan betina terdapat dalam satu individu. Ketika organisme ini siap untuk kawin akan bermigrasi ke daerah pantai yang berbatu dan ditumbuhi subur oleh tanaman alga dan rumput laut dan menyemprotkan telur dan sperma sekaligus di sekitar bebatuan tersebut. Telur- telur tesebut akan dibiarkan melayang di sekitar bebatuan dengan maksud agar terhindar dari predator dan telur dibiarkan menetas sendiri Rudman 1999 diacu dalam Witjaksono 2005. Discodoris sp. merupakan hewan herbivora, makanan utamanya adalah plankton, alga alga merah, alga coklat dan alga hijau, rumput laut, sponge. Juvenil akan tumbuh menjadi populasi yang pesat bila mendapatkan makanan yang melimpah disekitar daerah bebatuan yang subur dengan tumbuhan alga dan rumput laut. Nudibranch atau dikenal sebagai lintah laut, merupakan golongan invertebrata laut bertubuh lunak. Nudibranch termasuk dalam golongan moluska tidak memiliki cangkang dan sedikit memiliki mekanisme pertahanan fisik, berpotensi sebagai mangsa bagi hewan predator karnivora. Untuk mengatasi lemahnya pertahanan fisik tersebut, nudibranch melakukan adaptasi terhadap lingkungan melalui perubahan anatomi dan fisiologi. Beberapa opistobranch aktif pada malam hari, mengerutkan tubuhnya ketika diserang, dan mampu berkamuflase secara efektif dengan berbagai warna yang menyerupai habitatnya Grcovik et al. 2005.

2.2 Komponen Bioaktif

Senyawa bioaktif dapat diperoleh dengan cara isolasi, identifikasi, struktur ilusidasi dan mempelajari karakteristik produk kimia yang dihasilkan dari organisme hidup. Sejak jaman Mesopotamia kuno, ketika sejarah menunjukkan kultivasi dari poppy Papaver somniferum untuk diekstraksi sebagai opium, senyawa alam mulai menunjukkan perannya yang penting bagi kehidupan manusia khususnya dalam bidang kedokteran Wojnar 2008. Senyawa metabolit sekunder dikembangkan dalam dunia kedokteran mulai dari sebagai ilmu racun, meliputi antitumor, sitotoksin, antiinflamantori sampai proses metabolismenya di dalam sel Martin et al. 2000. Metabolit sekunder diproduksi oleh organisme hidup yang didefinisikan sebagai senyawa produk alami yang tidak termasuk dalam pertumbuhan, perkembangan, dan reproduksi yang normal pada organisme dan tidak begitu penting dalam hidup. Senyawa yang dihasilkan dari metabolit sekunder tergolong dalam bikokimia yang tidak mengalami perubahan sampai fungsinya diperlukan. Senyawa metabolit sekunder digunakan sebagai alat interaksi antar organisme, dan sering juga digunakan sebagai pertahanan, sistem imun, antifungi, antibakteri dan sitotoksik alami Wojnar 2008. Beberapa senyawa metabolit khususnya struktur dan aktivitas biologisnya telah berhasil diisolasi dari hewan-hewan laut. Senyawa metabolit tersebut mempunyai potensi sebagai obat. Senyawa bioaktif yang menarik diteliti umumnya diisolasi dari spons laut, ubur-ubur, bintang laut, timun laut, terumbu karang, moluska, echinodermata, dan krustasean. Senyawa bioaktif yang telah diisolasi dari hewan laut yaitu steroid, terpenoid, isoprenoid, nonisoprenoid, quinon, dan nitrogen heterosiklik Bhakuni dan Rawat 2005.