E = Error Component 10-20 N = Jumlah individu percobaan sampel dalam semua kelompok dikurang 1
B = Blocking Component dikurang 1 T = Jumlah kelompok terapi dikurang 1
E = N – 0 – T
E = N – 0 – T
≥ 10 = N – 1 – T – 1 ≤ 20 = N – 1 – T – 1
≥ 10 = N – 1 – 3 – 1 ≤ 20 = N – 1 – 3 – 1
≥ 10 = N – 1 – 2 ≤ 20 = N – 1 – 2
≥ 10 = N – 3 ≤ 20 = N – 3
N ≥ 13 N ≤ 23
Jumlah total sampel yang digunakan adalah 15 ekor yang masih dalam rentang jumlah yang dianjurkan 13-23 ekor. Jumlah sampel dilebihkan dari batas
minimal 13 ekor untuk antisipasi jika terjadi kematian hewan selama penelitian berlangsung. Hewan coba dibagi menjadi 3 kelompok yaitu kontrol negatif,
kontrol positif, dan perlakuan. Setiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus jantan strain Sprague dawley.
3.3.1 Kriteria inklusi dan eksklusi 3.3.1.1 Kriteria inklusi
Tikus jantan strain Spraguq dawley yang sehat Berat badan 180-200 gr
Kontrol negatif dengan glukosa darah 200 mgdL Kontrol positif dengan glukosa darah 200 mgdL
3.3.1.2 Kriteria eksklusi
Tikus jantan strain Sprague dawley yang mati selama proses induksi
STZ dan perlakuan.
3.4. Cara Kerja Penelitian
3.4.1. Alat dan Bahan Penelitian
a. Tahap Nekropsi
Kapas, minor set surgeon, papan potong, zipline plastic bag, dan ether untuk anastesi
b. Tahap Fiksasi
Formalin-PBS 10
c. Tahap Dehidrasi
Gelas ukur 1000 ml, 500 ml, beaker Glass 1000 ml, 500 ml, corong kaca, aquadest, alkohol absolut CH
3
CH
2
OH Mallinckrodt Chemicals, alkohol 95, dan toluol.
d. Tahap Clearing
Larutan toluol:alkohol 1:1
e. Tahap Embedding
Hotplate stirer sRS 710 HA, vials stopper tools neck, dan Paraplast Leica Microsystem
f. Tahap Blocking
Cetakan blocking
g. Tahap Pemotongan
Object glass, bunsen, mikrotom geser, korek api gas, waterbath, kulkas, beaker glass 200 ml, putih telur, gliserin, dan es batu.
h. Tahap Pewarnaan
Cover glass, staining jar, mikroskop shimadzu T025A, spatula kaca, timer, xylol, hematoksilin, eosin, balsam Canada, dan H
2
SO
4.
i. Tahap Foto Jaringan
Kotak preparat, kamera preparat, komputer lab, DVD foto, mikroskop Olympus BX41
j. Untuk semua tahap histoteknik
Tissue dan tissue berpori
3.4.2. Adaptasi Hewan Coba
Setelah hewan tiba di laboratorium animal house, hewan coba diadaptasikan selama 14 hari dengan diberi makan dan minum ad libitum.
Bedding dan kandang diganti dengan yang baru setiap 3 hari.
24
