11 Infundasi
Infundasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperatur 90°C selama 15 menit.
Dekoktasi Dekoktasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada
temperatur 90°C selama 30 menit.
2.3 Radikal bebas
Radikal bebas didefenisikan sebagai suatu atom atau molekul yang mempunyai satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada orbital terluarnya,
bersifat sangat reaktif dan tidak stabil Muchtadi, 2013. Untuk mencapai kestabilan, radikal bebas akan bereaksi dengan molekul disekitarnya untuk
memperoleh pasangan elektron dan dapat mengubah suatu molekul menjadi radikal Winarsi, 2011. Reaksi ini akan berlangsung terus menerus dalam tubuh
dan bila tidak dihentikan akan menimbulkan berbagai penyakit seperti kanker, jantung koroner, katarak, serta penyakit degeneratif lainnya Muchtadi, 2013;
Sudiana, 2008. Ada dua sumber terjadinya radikal bebas, eksternal seperti polusi dari
kendaraan bermotor, asap rokok, serta sinar ultraviolet dan internal berasal dari proses respirasi, oksidasi enzimatis, juga fosforilasi oksidatif di mitokondria.
Sehingga meskipun kita menghindari faktor eksternal, radikal bebas secara otomatis tetap dihasilkan dari proses-proses biologik normal dan kebutuhan
antiradikal oleh tubuh merupakan hal utama untuk menghambat atau menghentikan efek negatif radikal bebas Tatang, dkk., 2011.
12 Menurut Kumalaningsih 2006, pembentukan radikal bebas melalui 3
tahapan reaksi, yaitu: -
Tahap inisiasi: tahap awal terbentuknya radikal bebas. -
Tahap propagasi: tahap perpanjangan radikal berantai, dimana terjadi reaksi antara suatu radikal dengan senyawa lain dan menghasilkan radikal baru.
- Tahap terminasi: adalah tahap akhir, terjadinya pengikatan suatu radikal bebas
dengan radikal bebas yang lain sehingga membentuk senyawa non-radikal yang biasanya kurang reaktif dari radikal induknya.
Radikal bebas ini antara lain golongan hidroksil OH
-
, superoksida O
- 2
, nitrogen monooksida NO, nitrogen dioksida NO
2
, peroksidal RO
- 2
, peroksinitrit ONOO
-
, asam hipoklorit HOCl, hydrogen peroksida H
2
O
2
, ozon O
3
, dinitrogen trioksida N
2
O
3
, lipid peroksida LOOH Silalahi, 2006; Pham- Huy, dkk., 2008.
2.4 Antioksidan
Antioksidan merupakan senyawa yang mampu meredam atau menghambat aktivitas senyawa oksidan dalam tubuh dengan cara mendonorkan elektronnya
atau disebut reduktan Winarsi, 2011. Antioksidan dikelompokkan menjadi dua golongan berdasarkan mekanisme kerjanya, yaitu antioksidan primer enzimatis
dan antioksidan sekunder non-enzimatis Hamid, dkk., 2010. Antioksidan primer adalah antioksidan yang berfungsi untuk mencegah
terbentuknya radikal bebas baru karena dapat merubah radikal bebas menjadi kurang reaktif sebelum sempat bereaksi. Antioksidan ini berupa enzim yang
diproduksi oleh tubuh, meliputi: superoksida dismutase, enzim katalase dan glutation peroksidase. Enzim superoksida dismutase berperan dalam mengubah
13 radikal superoksida O2
˙
−
menjadi hidrogen peroksida H
2
O
2
, enzim katalase dan glutation peroksidase akan mengubah hidrogen peroksida H
2
O
2
menjadi air H
2
O Hamid, dkk., 2010. Kerja enzim-enzim ini sangat dipengaruhi oleh mineral-mineral seperti mangan Mn, selenium Se, zink Zn dan tembaga Cu
Kumalaningsih, 2006. Antioksidan sekunder senyawa fenol yang berfungsi untuk menangkap
radikal bebas dan menghentikan reaksi berantai. Antioksidan sekunder juga disebut sebagai antioksidan preventif, dimana pembentukan senyawa oksigen
reaktif dihambat dengan cara pengkelatan metal. Antioksidan ini meliputi: -
Antioksidan vitamin, contoh: vitamin a, c, e. -
Senyawa fitokimia, contoh: flavonoid, katekin, karotenoid, β-karoten. -
Antioksidan sintetik, contoh: BHA butylated hydroxyl anisole, BHT butylated hydroxytoluene, PG propyl gallate, EDTA ethylene diamine
tetraacetic acid, TBHQ tertiary butyl hydroquinone dan NDGA nordihydro guaretic acid Hamid, dkk., 2010.
2.4.1 Vitamin c
Vitamin c atau asam askorbat mempunyai berat molekul 176,13 dengan rumus molekul C
6
H
8
O
6
. Pemerian vitamin c adalah hablur atau serbuk berwarna putih atau agak kekuningan. Pengaruh cahaya lambat laun menyebabkan berwarna
gelap, dalam keadaan kering stabil di udara namun dalam larutan cepat teroksidasi. Vitamin c mudah larut dalam air, agak sukar larut dalam etanol,
praktis tidak larut dalam kloroform, dalam eter dan dalam benzen Depkes RI,
1979.
14 Vitamin c bekerja melindungi bagian tubuh dari radikal bebas yang larut
dalam air dengan mendonorkan elektronnya ke dalam reaksi biokimia intraseluler dan ekstraseluler. Vitamin c mampu bereaksi dengan radikal bebas dan
mengubahnya menjadi radikal askorbil yang kurang reaktif, kemudian membentuk asam monodehidroaskorbat dan atau asam dehidroaskorbat. Bentuk tereduksi ini
dapat diubah kembali menjadi asam askorbat oleh enzim monodehidroaskorbat reduktase dan dehidroaskorbat reduktase Packer, 2002. Rumus bangun vitamin c
dapat dilihat pada Gambar 2.1 di bawah ini:
Gambar 2.1 Rumus bangun vitamin c
2.4.2 Flavonoid
Senyawa flavonoid merupakan salah satu senyawa polifenol terbesar yang mengandung 15 atom karbon dalam inti dasarnya, yang tersusun dalam
konfigurasi C
6
–C
3
–C
6 ,
yaitu dua cincin aromatik yang dihubungkan oleh satuan 3 karbon Markham, 1988. Rumus bangun turunan flavonoid dapat dilihat pada
Gambar 2.2 berikut:
Gambar 2.2
Rumus bangun flavonoid HO-C-
CH
2
O O
O
O H
2
4 5
6 7
3 3’
4’ 5’
6’ 8
2 1
O
15 Flavonoid mencakup banyak pigmen yang terdapat dalam fungus hingga
angiospermae. Umumnya terdapat pada tumbuhan dalam bentuk terikat pada gula sebagai glikosida sehingga untuk
menganalisis flavonoid, lebih baik ekstrak tumbuhan dihidrolisis terlebih dahulu untuk memecah ikatan gula dengan aglikon
Harborne, 1987. Senyawa ini adalah senyawa pereduksi yang dapat menghambat reaksi oksidasi sehingga dapat dijadikan sebagai antioksidan Robinson, 1991.
Senyawa ini berperan sebagai donor hidrogen terhadap radikal bebas karena mengandung gugus hidroksil Silalahi, 2006.
2.4.3 Vitamin e
Vitamin e tokoferol merupakan antioksidan primer yang dapat mencegah terjadinya rentetan reaksi radikal bebas. Bersifat tidak larut dalam air tetapi larut
dalam lemak atau minyak. Vitamin e tokoferol memiliki 8 bentuk, yaitu 4 tokoferol alfa, beta, gamma, dan delta serta 4 tokotrienol. Dari 8 bentuk tersebut
yang bermanfaat bagi aktivitas biologis dalam tubuh adalah alfa yang ditemukan dalam darah dan jaringan tubuh Kumalaningsih, 2006. Rumus bangun
α- tokoferol dapat dilihat pada Gambar 2.3 berikut:
Gambar 2.3 Rumus bangun
α-tokoferol
16
2.5 Spektrofotometer UV-visibel
Menurut Dachriyanus 2004, spektrofotometer UV-Vis adalah pengukuran panjang gelombang dan intensitas sinar ultraviolet dan sinar tampak
yang diabsorbsi oleh sampel. Sinar ultraviolet berada pada panjang gelombang 200-400 nm, sedangkan sinar tampak berada pada panjang gelombang 400-800
nm. Spektrofotometer UV-Vis pada umumnya digunakan untuk: 1.
Menentukan jenis kromofor, ikatan rangkap yang terkonjugasi dan auksokrom dari suatu senyawa organik
2. Menjelaskan informasi dari struktur berdasarkan panjang gelombang
maksimum suatu senyawa 3.
Menganalisis senyawa organik secara kuantitatif. Berdasarkan aspek kuantitatif, suatu berkas radiasi dikenakan pada
cuplikan larutan sampel dan intensitas sinar radiasi yang diteruskan diukur besarnya. Radiasi yang diserap oleh cuplikan kemudian ditentukan dengan
membandingkan intensitas sinar yang diteruskan dengan intensitas sinar yang diserap Gandjar dan Rohman, 2007.
2.6 Metode pemerangkapan radikal bebas DPPH
