20
BAB III METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan metode eksperimental. Uji sitotoksik fraksi etilasetat dilakukan dengan metode Brine Shrimp Lethality Test
denganmenggunakan larva Artemia salina Leach. Parameter yang diukur adalah nilai LC
50
Lethal Concentration
50
. Tahapan penelitian meliputi penyiapan bahan tumbuhan, pemeriksaan karakteristik daun bangun-bangun, pembuatan simplisia,
pembuatan ekstrak, analisis KLT, pembuatan fraksinasi dengan metode KCV pengujian efek sitotoksik fraksi etilasetat daun bangun-bangun Plectranthus
amboinicus Lour. mengggunakan larva udang Artemia salina Leach. Penelitian
ini dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
3.1 Alat
Alat – alat yang digunakan pada penelitian ini meliputi alat-alat gelas laboratorium, bejana maserasi, blender Philip, bola karet, desikator,
kromatografi lapis tipis bejana pengembang, lampu UV 254 dan 366 szimathsu, lampu 5 watt Hannochs, lampu bunsen, lemari pengering, mikroskop Boeco,
mortir dan stamfer, neraca listrik Mettler Toledo, oven Memmert, penangas air, rotary evaporator Boeco, seperangkat alat penetapan kadar air Stuart,
seperangkat alat destilasi, spatula, statif, Vacumm Liquid Chromatography gelas sinter dan vakum,wadah penetasan telur Artemia salina Leach.
Universitas Sumatera Utara
21
3.2 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun bangun- bangun Plectranthus amboinicus Lour., telur Artemia salina Leach, garam tidak
beriodium, Na-CMC Natrium-Carboxy Methyl Cellulose dan air suling. Bahan kimia yang digunakan kecuali dinyatakan lain berkualitas pro analisa yaitu
etilasetat destilasi, n-heksana destilasi,etilasetat, n-heksana, kloralhidrat dan toluen.
3.3 Penyiapan Bahan Tanaman
Penyiapan bahan tanaman meliputi pengambilan bahan dan identifikasi daun bangun-bangun Plectranthus amboinicus Lour Spreng.
3.3.1 Pengambilan Bahan Tanaman
Pengambilan bahan tanaman dilakukan secara purposif yaitu tanpa membandingkan dengan tanaman yang sama dari daerah lain. Bahan tanaman
yang digunakan adalah daun bangun-bangun yang berwarna hijau dan masih segar, yang diperoleh dari Kecamatan Beringin, Pematang Siantar, Provinsi
Sumatera Utara.
3.3.2 Identifikasi Tanaman
Identifikasi tanaman dilakukan di Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia LIPI Bogor.
3.4 Hewan Percobaan
Hewan percobaan yang digunakan pada penelitian ini adalah larva udang salina
Leach nauplii. Telur Artemia salina Leach diperoleh dari penjual ikan- ikan hias yang berada di Jl. M. H. Thamrin. No. 71 B Medan Sumatera Utara.
Universitas Sumatera Utara
22
3.5 Pembuatan Pereaksi Larutan Kloralhidrat:
Sebanyak 50 g kloralhidrat ditimbang, dilarutkan
dalam 20 ml air suling Depkes RI., 1995.
3.6 Pemeriksaan Karakteristik Daun Bangun-Bangun
Kategori