Analisis Kandungan Mineral Kalsium, Magnesium, Kalium dan Natrium Pada Biji Kakao (Theobroma cacao Linn.) Non Fermentasi dan Fermentasi Secara Spektrofotometri Serapan Atom

Biji Kakao Non Fermentasi Dan Biji Kakao Fermentasi

Tanaman Kakao (Theobroma cacao Linn.)

Buah kakao yang sedang difermentasi

Biji kakao sebelum penjemuran Biji kakao setelah fermentasi 5 hari

Biji kakao non fermentasi hasil pengeringan

Dibelah menjadi dua

Dikeringkan di bawah sinar matahari selama 7 hari Dikupas kulit arinya

Dihaluskan dengan blender

Ditimbang ± 25 gram di dalam krus porselen Diarangkan di atas hot plate

Diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100°C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500°C dengan interval 25°C setiap 5 menit

Dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan hingga dingin di dalam tanur hingga suhu ± 27°C

Ditambahkan 5 ml HNO3 (1:1)

Diuapkan pada hot plate sampai kering

Dimasukkan kembali dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit

Dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin dalam tanur hingga suhu ± 27oC

Buah Kakao

Sampel yang telah dihaluskan

Sampel yang telah mengarang

Sampel yang telah mengabu

Dimasukkan daging buah ke dalam kotak fermentasi Ditutup dengan daun pisang, biarkan selama 5 hari Dicuci secara hati-hati

Dikeringkan di bawah sinar matahari selama 7 hari Dikupas kulit arinya

Dihaluskan dengan blender

Ditimbang ± 25 gram di dalam krus porselen Diarangkan di atas hot plate

Diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100°C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500°C dengan interval 25°C setiap 5 menit

Dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan hingga dingin di dalam tanur hingga suhu ± 27°C

Ditambahkan 5 ml HNO3 (1:1)

Diuapkan pada hot plate sampai kering

Dimasukkan kembali dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500oC dengan interval 25oC setiap 5 menit

Dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin dalam tanur hingga suhu ± 27oC

Buah Kakao

Sampel yang telah dihaluskan

Sampel yang telah mengarang

Sampel yang telah mengabu

Hasil

Dilarutkan dalam 5 ml HNO3 (1:1)

Dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml Dibilas krus porselen sebanyak tiga kali dengan akuademineralisata

Dicukupkan dengan akuademineralisata hingga garis tanda Disaring dengan kertas saring Whatman No.42

Dibuang 5 ml filtrat pertama untuk menjenuhkan kertas saring

Dimasukkan ke dalam botol

Dilakukan analisis kuantitatif dengan spektrofotometer

serapan atom pada 422,7 nm untuk kadar kalsium, 285,2 nm untuk kadar magnesium, 766,5 nm untuk

kadar kalium, dan 589,0 nm untuk kadar natrium dengan

nyala udara-asetilen. Sampel hasil destruksi

Filtrat

Larutan sampel

Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan Koefisien Korelasi (r) No Konsentrasi ( g/ml)

(X)

Absorbansi (Y)

1. _{0,0000 -0,0002}

2. _{2,0000 0,0812}

3. _{4,0000 0,1472}

4. _{6,0000 0,2121}

5. _{8,0000 0,2879}

6. _{10,0000 0,3552}

No X Y XY X² Y²

1 0,0000 -0,0002 0,0000 0,0000 0,00000004

2 2,0000 0,0812 0,1624 4,0000 0,00659344

3 4,0000 0,1472 0,5888 16,0000 0,02166784

4 6,0000 0,2121 1,2726 36,0000 0,04498641

5 8,0000 0,2879 2,3032 64,0000 0,08288641

6 10,0000 0,3552 3,5520 100,0000 0,12616704

∑X = 30,0000

∑Y = 1,0834

∑XY= 7,8790

∑X²= 220,0000

∑Y² = 0,28230118

X = 5 Y= 0,1806

Y = aX + b b = Y – a X

= 0,1806 – (0,0352 x 5) = 0,0046

Lanjutan Lampiran 6

r =

√( – )

r = –

√( )( )

√

√

r = r = 0,9995199544 r = 0,9995

Atom, Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan Koefisien Korelasi (r)

No Konsentrasi ( g/ml) (X)

Absorbansi (Y)

1. _{0,0000 -0,0003}

2. _{0,2000 0,1137}

3. _{0,4000 0,2369}

4. _{0,6000 0,3391}

5. _{0,8000 0,4497}

6. _{1,0000 0,5665}

No X Y XY X² Y²

1 0,0000 -0,0003 0,0000 0,0000 0,00000009

2 0,2000 0,1137 0,0227 0,0400 0,01292769

3 _{0,4000 0,2369 0,0948 0,1600 0,05612161}

4 _{0,6000 0,3391 0,2035 0,3600 0,11498881}

5 0,8000 0,4497 0,3598 0,6400 0,20223009

6 1,0000 0,5665 0,5665 1,0000 0,32092225

∑ X = 3,0000

∑ Y = 1,7056

∑ XY = 1,2473

∑ X² = 2,2000

∑ Y² = 0,70719054

X = 0,5 Y = 0,2843

_{² ²}

Y = a X + b b = Y – a X

= 0,2843 – (0,5636 x 0,5) = 0,0025

r =

√( – )

r =

–

√( )( )

_√

√

r =

r = 0,9998364369 r = 0,9998

Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan Koefisien Korelasi (r) No Konsentrasi ( g/ml)

(X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 -0,0020

2. 2,0000 0,0853

3. 4,0000 0,1711

4. 6,0000 0,2437

5. 8,0000 0,3267

6. 10,0000 0,4036

No X Y XY X² Y²

1 0,0000 -0,0020 0,0000 0,0000 0,00000400

2 2,0000 0,0853 0,1706 4,0000 0,00727609

3 _{4,0000 0,1711 0,6844 16,0000 0,02927521}

4 6,0000 0,2437 1,4622 36,0000 0,05938969

5 8,0000 0,3267 2,6136 64,0000 0,10673289

6 _{10,0000 0,4036 4,0360 100,0000 0,16289296}

∑ X = 30,0000

∑ Y = 1,2284

∑ XY = 8,9668

∑ X² = 220,0000

∑ Y² = 0,36557084

X = 5 Y = 0,2047

Y = a X + b b = Y – a X

= 0,2047 – (0,0404 x 5) = 0,0027

r =

√( – )

r =

–

√( )( )

√

√

r = 0,9996333934 r = 0,9996

Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan Koefisien Korelasi (r) No Konsentrasi ( g/ml)

(X)

Absorbansi (Y)

1. _{0,0000 -0,0001}

2. _{0,2000 0,0265}

3. _{0,4000 0,0489}

4. _{0,6000 0,0715}

5. _{0,8000 0,0932}

6. _{1,0000 0,1186}

No _{X Y XY X² Y²}

1 0,0000 -0,0001 0,0000 0,0000 0,00000001

2 _{0,2000 0,0265 0,0053 0,0400 0,00070225}

3 0,4000 0,0489 0,0195 0,1600 0,00239121

4 0,6000 0,0715 0,0429 0,3600 0,00511225

5 0,8000 0,0932 0,0745 0,6400 0,00868624

6 _{1,0000 0,1186 0,1186 1,0000 0,01406596}

∑ X = 3,0000

∑ Y = 0,3586

∑ XY = 0,2608

∑ X² = 2,2000

∑ Y² = 0,03095792

X = 0,5 Y = 0,0598

_{² ²}

Y = a X + b b = Y – a X

= 0,0598 – (0,1164 x 0,5) = 0,0016

r =

√( – )

– [ ]

√( ) ( )

√

√

r = 0,999542489 r = 0,9995

Dalam Sampel

1. Hasil analisis kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0379 0,1111 3,0255 30,2092

2 25,0379 0,1113 3,0312 30,2661

3 25,0379 0,1115 3,0369 30,3230

4 25,0392 0,1117 3,0426 30,3784

5 25,0377 0,1111 3,0255 30,2094

6 25,0378 0,1111 3,0255 30,2093

2. Hasil analisis kadar kalsium dalam biji kakao fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,1215 3,3210 33,2089

2 25,0009 0,1213 3,3153 33,1518

3 25,0008 0,1218 3,3295 33,2939

4 25,0009 0,1216 3,3238 33,2368

5 25,0006 0,1215 3,3210 33,2092

6 25,0008 0,1217 3,3267 33,2659

3. Hasil analisis kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0379 0,2323 0,4077 154,6914

2 25,0379 0,2322 0,4075 154,6156

3 25,0379 0,2324 0,4079 154,7674

4 25,0392 0,2324 0,4079 154,7593

5 25,0377 0,2323 0,4077 154,6927

4. Hasil analisis kadar magnesium dalam biji kakao fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,2614 0,4593 174,5284

2 25,0009 0,2616 0,4597 174,6797

3 25,0008 0,2619 0,4602 174,8704

4 25,0009 0,2617 0,4599 174,7557

5 25,0006 0,2617 0,4599 174,7578

6 25,0008 0,2615 0,4595 174,6044

5. Hasil analisis kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0379 0,0845 2,0247 606,4905

2 25,0379 0,0848 2,0321 608,7072

3 25,0379 0,0849 2,0346 609,4561

4 25,0392 0,0846 2,0272 607,2079

5 25,0377 0,0845 2,0247 606,4954

6 25,0378 0,0847 2,0297 607,9907

6. Hasil analisis kadar kalium dalam biji kakao fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,0959 2,3069 692,0478

2 25,0009 0,0959 2,3069 692,0451

3 25,0008 0,09577 2,3019 690,5479

4 25,0009 0,0956 2,2995 689,8252

5 25,0006 0,0960 2,3094 692,8034

7. Hasil analisis kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0379 0,0406 0,3350 6,6898

2 25,0379 0,0408 0,3367 6,7238

3 25,0379 0,0406 0,3350 6,6899

4 25,0392 0,0404 0,3333 6,6556

5 25,0377 0,0405 0,3341 6,6719

6 25,0378 0,0407 0,3359 6,7079

8. Hasil analisis kadar natrium dalam biji kakao fermentasi Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (Y)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,0434 0,3591 7,1817

2 25,0009 0,0435 0,3599 7,1977

3 25,0008 0,0435 0,3599 7,1978

4 25,0009 0,0438 0,3625 7,2497

5 25,0006 0,0437 0,3616 7,2318

6 25,0008 0,0434 0,3591 7,1817

Natrium Pada Sampel

1. Perhitungan kadar kalsium pada biji kakao non fermentasi a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0379 gram

Absorbansi (Y) = 0,1111

Persamaan regresi: Y = 0,0352 X + 0,0046

X =

= 3,0255 g/ml

Konsentrasi kalsium = 3,0255 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 302,0920 g/g = 30,2092 mg/100 g

2. Perhitungan kadar kalsium pada biji kakao fermentasi a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0008 gram

Absorbansi (Y) = 0,1215

Persamaan regresi: Y = 0,0352 X + 0,0046

X =

= 3,3210 g/ml

Konsentrasi kalsium = 3,3210 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 332,0894 g/g = 33,2089 mg/100 g

3. Perhitungan kadar magnesium pada biji kakao non fermentasi a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0379 gram

Absorbansi (Y) = 0,2323

Persamaan regresi: Y = 0,5636 X + 0,0025

X =

= 0,4077 g/ml

Konsentrasi magnesium = 0,4077 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 1546,9148 g/g = 154,6914 mg/100 g

4. Perhitungan kadar magnesium pada biji kakao fermentasi a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0008 gram

Absorbansi (Y) = 0,2614

Persamaan regresi: Y = 0,5636 X + 0,0025

X =

= 0,4593 g/ml

Konsentrasi magnesium = 0,4593 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 1745,2842 g/g = 174,5284 mg/100 g

5. Perhitungan kadar kalium pada biji kakao non fermentasi a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0379 gram

Absorbansi (Y) = 0,0845

Persamaan regresi: Y = 0,0404 X + 0,0027

X =

= 2,0247 g/ml

Konsentrasi kalium = 2,0247 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 6064,9056 g/g

= 606,4905 mg/100 g

6. Perhitungan kadar kalium pada biji kakao fermentasi a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0008 gram

Absorbansi (Y) = 0,0959

Persamaan regresi: Y = 0,0404 X + 0,0027

X =

= 2,3069 g/ml

Konsentrasi kalium = 2,3069 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 6920,4785 g/g

7. Perhitungan kadar natrium pada biji kakao non fermentasi a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0379 gram

Absorbansi (Y) = 0,0406

Persamaan regresi: Y = 0,1164 X + 0,0016

X =

= 0,3350 g/ml

Konsentrasi natrium = 0,3350 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 66,8986 g/g

= 6,6898 mg/100 g

8. Perhitungan kadar natrium pada biji kakao fermentasi a. Berat sampel yang ditimbang = 25,0008 gram

Absorbansi (Y) = 0,0434

Persamaan regresi: Y = 0,1164 X + 0,0016

X =

= 0,3591 g/ml

Konsentrasi natrium = 0,3591 g/ml

Kadar ( g/g) =

=

= 71,8177 g/g

Natrium Dalam Sampel

1. Perhitungan statistik kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g)

(Xi - Xi) (mg/100g)

(Xi - Xi)² (mg/100g)

1 30,2092 -0,0567 0,0032

2 30,2661 0,0002 0,0000

3 30,3230 0,0571 0,0033

4 30,3784 0,1125 0,0127

5 30,2094 -0,0565 0,0032

6 30,2093 -0,0566 0,0032

∑ Xi = 181,5954 ∑ (Xi - Xi)² = 0,0256

Xi = 30,2659

√

=

√

√

= 0,0716 mg/100g

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 1,9418

t hitung 2 = | | √

= 0,0068

t hitung 3 = | |

t hitung 4 = | |

√ = 3,8527

t hitung 5 = | |

√ = 1,9349

t hitung 6 = | |

√ = 1,9384

Dari hasil perhitungan diatas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi: µ = Xi ± (t (α / 2, dk) x SD / √

= 30,2659 mg/100g ± (4,0321 x 0,0716 mg/100g / √ = (30,2659 ± 0,1177) mg/100g

2. Perhitungan statistik kadar kalsium dalam biji kakao fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g)

(Xi - Xi) (mg/100g)

(Xi - Xi)² (mg/100g)

1 33,2089 -0,0189 0,0004

2 33,1518 -0,0760 0,0058

3 33,2939 0,0661 0,0044

4 33,2368 0,0090 0,0000

5 33,2092 -0,0186 0,0003

6 33,2659 0,0381 0,0015

∑ Xi = 199,3665 _{∑ (Xi - Xi)² = 0,0124}

Xi= 33,2278

√

=

√

√

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 0,9310

t hitung 2 = | | √

= 3,7438

t hitung 3 = | |

√ = 3,2562

t hitung 4 = | |

√ = 0,4433

t hitung 5 = | |

√ = 0,9163

t hitung 6 = | |

√ = 1,8768

Dari hasil perhitungan di atas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar kalsium dalam biji kakao fermentasi:

µ = Xi ± (t _{(α / 2, dk)} x SD / √

= 33,2278 mg/100g ± (4,0321 x 0,0498 mg/100g / √ = (33,2278 ± 0,0818) mg/100g

3. Perhitungan statistik kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g) _(mg/100g) (Xi - Xi) _(mg/100g) (Xi - Xi)²

1 154,6914 -0,0307 0,0009

2 154,6156 -0,1065 0,0113

3 154,7674 0,0453 0,0021

4 154,7593 0,0372 0,0014

5 154,6927 -0,0294 0,0009

6 154,8059 0,0838 0,0070

∑ Xi = 928,3323 _{∑ (Xi - Xi)² = 0,0236}

Xi= 154,7221

√

=

√

√

= 0,0687 mg/100g

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 1,0964

t hitung 2 = | - | √

= 3,8036

t hitung 3 = | |

t hitung 4 = | |

√ = 1,3286

t hitung 5 = | |

√ = 1,0500

t hitung 6 = | |

√ = 2,9929

Dari hasil perhitungan di atas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi: µ = Xi ± (t _{(α / 2, dk)} x SD / √

= 154,7221 mg/100g ± (4,0321 x 0,0687 mg/100g / √ = (154,7221 ± 0,1129) mg/100g

4. Perhitungan statistik kadar magnesium dalam biji kakao fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g) _(mg/100g) (Xi - Xi) _(mg/100g) (Xi - Xi)²

1 174,5284 -0,1710 0,0292

2 174,6797 -0,0197 0,0004

3 174,8704 0,1710 0,0292

4 174,7557 0,0563 0,0032

5 174,7578 0,0584 0,0034

6 174,6044 -0,0950 0,0090

∑ Xi = 1048,1964 _{∑ (Xi - Xi)² = 0,0744}

Xi= 174,6994

√

√

√

=

_{0,1220 mg/100g}

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 3,4337

t hitung 2 = | | √

= 0,3956

t hitung 3 = | |

√ = 3,4337

t hitung 4 = | |

√ = 1,1305

t hitung 5 = | |

√ = 1,1727

t hitung 6 = | |

√ = 1,9076

Dari hasil perhitungan di atas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar magnesium dalam biji kakao fermentasi:

µ = Xi ± (t (α / 2, dk) x SD / √

= 174,6994 mg/100g ± (4,0321 x 0,1220 mg/100g / √ = (174,6994 ± 0,2008) mg/100g

5. Perhitungan statistik kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g) _(mg/100g) (Xi - Xi) _(mg/100g) (Xi - Xi)²

1 606,4905 -1,2341 1,5230

2 608,7072 0,9826 0,9655

3 609,4561 1,7315 2,9981

4 607,2079 -0,5167 0,2670

5 606,4954 -1,2292 1,5109

6 607,9907 0,2661 0,0708

∑ Xi = 3646,3478 _{∑ (Xi - Xi)² = 7,3353}

Xi = 607,7246

√

√

√

= 1,2112 mg/100g

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 2,4957

t hitung 2 = | | √

t hitung 3 = | |

√ = 3,5015

t hitung 4 = | |

√ = 1,0449

t hitung 5 = | |

√ = 2,4857

t hitung 6 = | |

√ = 0,5381

Dari hasil perhitungan di atas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi:

µ = Xi ± (t (α / 2, dk) x SD / √

= 607,7246 mg/100g ± (4,0321 x 1,2112 mg/100g / √ = (607,7246 ± 1,9939) mg/100g

6. Perhitungan statistik kadar kalium dalam biji kakao fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g)

(Xi - Xi) (mg/100g)

(Xi - Xi)² (mg/100g)

1 692,0478 0,6199 0,3843

2 692,0451 0,6172 0,3809

3 690,5479 -0,8800 0,7744

4 689,8252 -1,6027 2,5686

5 692,8034 1,3755 1,8920

6 691,2979 -0,1300 0,0169

∑ Xi = 4148,5673 _{∑ (Xi - Xi)² = 6,0171}

√

√

√

_{= 1,1020 mg/100g}

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 1,3779

t hitung 2 = | | √

= 1,3719

t hitung 3 = | |

√ = 1,9560

t hitung 4 = | |

√ = 3,5623

t hitung 5 = | |

√ = 3,0573

t hitung 6 = | |

√ = 0,2890

Dari hasil perhitungan di atas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar kalium dalam biji kakao fermentasi: µ = Xi ± (t _{(α / 2, dk)} x SD / √

= 691,4279 mg/100g ± (4,0321 x 1,1020 mg/100g / √ = (691,4279 ± 1,8140) mg/100g

7. Perhitungan statistik kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g) _(mg/100g) (Xi - Xi) _(mg/100g) (Xi - Xi)²

1 6,6898 0,0001 0,0000

2 6,7238 0,0340 0,0012

3 6,6899 0,0001 0,0000

4 6,6556 -0,0342 0,0012

5 6,6719 -0,0179 0,0003

6 6,7079 0,0181 0,0003

∑ Xi = 40,1389 _{∑ (Xi - Xi)² = 0,0030}

Xi= 6,6898

√

√

_√

= 0,0245 mg/100g

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 0,0100

t hitung 2 = | | √

= 3,4000

t hitung 3 = | |

√ = 0,0100

t hitung 4 = | |

√ = 3,4600

t hitung 5 = | |

√ = 1,7000

t hitung 6 = | |

√ = 1,7200

Dari hasil perhitungan di atas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi:

µ = Xi ± (t _{(α / 2, dk)} x SD / √

= 6,6898 mg/100g ± (4,0321 x 0,0245 mg/100g / √ = (6,6898 ± 0,0403) mg/100g

8. Perhitungan statistik kadar natrium dalam biji kakao fermentasi

No Xi

Kadar (mg/100g) _(mg/100g) (Xi - Xi) _(mg/100g) (Xi - Xi)²

1 7,1817 -0,0250 0,0006

2 7,1977 -0,0090 0,0000

3 7,1978 -0,0089 0,0000

4 7,2497 0,0430 0,0018

5 7,2318 0,0251 0,0006

6 7,1817 -0,0250 0,0006

∑ Xi = 43,2404 _{∑ (Xi - Xi)² = 0,0036}

Xi = 7,2067

√

√

√

=

_{0,0268 mg/100g}

Pada interval kepercayaan 99% dengan nilai α= 0,01 dk=5 diperoleh nilai t tabel =

α/ 2, dk = 4,0321.

Data diterima jika t hitung < t tabel

t hitung = | | √

t hitung 1 = | | √

= 2,2936

t hitung 2 = | | √

t hitung 3 = | |

√ = 0,8165

t hitung 4 = | |

√ = 3,9450

t hitung 5 = | |

√ = 2,3028

t hitung 6 = | |

√ = 2,2936

Dari hasil perhitungan di atas di dapat semua t hitung < t tabel, maka semua data tersebut diterima.

Kadar natrium dalam biji kakao fermentasi:

µ = Xi ± (t (α / 2, dk) x SD / √

= 7,2067 mg/100g ± (4,0321 x 0,0268 mg/100g / √ = (7,2067 ± 0,0439) mg/100g

Natrium Pada Biji Kakao Non Fermentasi Menjadi Biji Kakao Fermentasi

1. Kalsium

Kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi adalah: 30,2659 mg/100g Kadar kalsium dalam biji kakao fermentasi adalah: 33,2278 mg/100g Persentase peningkatan kadar:

x 100%

= 9,7863% 2. Magnesium

Kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi adalah: 154,7221 mg/100g Kadar magnesium dalam biji kakao fermentasi adalah: 174,6994 mg/100g Persentase peningkatan kadar:

x 100%

= 12,9117% 3. Kalium

Kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi adalah: 607,7246 mg/100g Kadar kalium dalam biji kakao fermentasi adalah: 6921,4279 mg/100g Persentase peningkatan kadar:

x 100%

= 13,7732%

4. Natrium

Kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi adalah: 6,6898 mg/100g Kadar natrium dalam biji kakao fermentasi adalah: 7,2067 mg/100g Persentase peningkatan kadar:

x 100%

Kalium Dan Natrium Pada Sampel

1. Pengujian beda nilai rata-rata kadar kalsium pada sampel

No Fermentasi Non Fermentasi

1. X1 = 33,2278 X2 = 30,2659 2. S1 = 0,0498 S2 = 0,0716

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 99% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

- H0: σ1= σ2 H1: σ1≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,01/2, (m,n)) → (F 0,005, (5,5)) adalah = 14,94

- Daerah kritis penolakan: hanya jika F0 ≥ 14,94 F0 =

F0 =

F0 = 0,4838

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga disimpulkan bahwa σ1 = σ2. Berarti tidak terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi.

- Kemudian dilanjutkan dengan uji beda rata–rata menggunakan distribusi t,

- Simpangan bakunya adalah:

Sp =

√

=

√

=

√

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 1%

t 0,01/2 t 0,005 = ± 3,1693 untuk df = 6 + 6 - 2 = 10

- Daerah kritis penerimaan: - 3,1693 ≤ t0≤ 3,1693

- Daerah kritis penolakan: t0 < -3,1693 dan t0 > 3,1693

t0 =

√

= √

=

_{= 83,1994}

Karena t0 = 83,1994 > 3,1693 maka hipotesis H0 ditolak. Berarti terdapat

perbedaan yang signifikan rata-rata kadar kalsium dalam biji kakao non fermentasi dan biji kako fermentasi.

2. Pengujian beda nilai rata-rata kadar magnesium pada sampel

No Fermentasi Non Fermentasi

1. X1 = 174,6994 X2 = 154,7221 2. S1 = 0,1220 S2 = 0,0687

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 99% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

- H0: σ1= σ2 H1: σ1≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,01/2, (m,n)) → (F 0,005, (5,5)) adalah = 14,94

F0 =

F0 =

F0 = 3,1536

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga disimpulkan bahwa σ1 = σ2. Berarti tidak terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi.

- Kemudian dilanjutkan dengan uji beda rata–rata menggunakan distribusi t,

- Simpangan bakunya adalah:

Sp =

√

√

=

√

= 0,0990

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 1%

t 0,01/2 t 0,005 = ± 3,1693 untuk df = 6 + 6 - 2 = 10

- Daerah kritis penerimaan: - 3,1693 ≤ t0≤ 3,1693

t0 =

√

= √

=

= 349,2535

Karena t0 = 349,2535 > 3,1693 maka hipotesis H0 ditolak. Berarti terdapat

perbedaan yang signifikan rata-rata kadar magnesium dalam biji kakao non fermentasi dan biji kako fermentasi.

3. Pengujian beda nilai rata-rata kadar kalium pada sampel

No Non Fermentasi Fermentasi

1. X1 = 691,4279 X2 = 607,7426 2. S1 = 1,1020 S2 = 1,2112

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 99% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

- H0: σ1= σ2 H1: σ1≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,01/2, (m,n)) → (F 0,005, (5,5)) adalah = 14,94

- Daerah kritis penolakan: hanya jika F0 ≥ 14,94 F0 =

F0 =

F0 = 0,8278

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga disimpulkan bahwa σ1 = σ2. Berarti tidak terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi.

- Simpangan bakunya adalah:

Sp =

√

√

=

√

= 1,1579

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 1%

t 0,01/2 t 0,005 = ± 3,1693 untuk df = 6 + 6 - 2 = 10

- Daerah kritis penerimaan: - 3,1693 ≤ t0≤ 3,1693

- Daerah kritis penolakan: t0 < -3,1693 dan t0 > 3,1693

t0 =

√

= √

=

_{= 125,1919}

Karena t0 = 125,1919 > 3,1693 maka hipotesis H0 ditolak. Berarti terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar kalium dalam biji kakao non fermentasi dan biji kako fermentasi.

4. Pengujian beda nilai rata-rata kadar natrium pada sampel

No Fermentasi Non Fermentasi

1. X1 = 7,2067 X2 = 6,6898 2. S1 = 0,0268 S2 = 0,0245

Dilakukan uji F dengan taraf kepercayaan 99% untuk mengetahui apakah variasi kedua populasi sama (σ1 = σ2) atau berbeda (σ1 ≠ σ2).

- H0: σ1= σ2 H1: σ1≠ σ2

- Nilai kritis F yang diperbolehkan dari tabel (F 0,01/2, (m,n)) → (F 0,005, (5,5)) adalah = 14,94

- Daerah kritis penolakan: hanya jika F0 ≥ 14,94 F0 =

F0 = 1,1966

- Dari hasil uji ini menunjukkan H0 diterima dan H1 ditolak sehingga disimpulkan bahwa σ1 = σ2. Berarti tidak terdapat perbedaan yang signifikan rata-rata kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi.

- Kemudian dilanjutkan dengan uji beda rata–rata menggunakan distribusi t,

- Simpangan bakunya adalah:

Sp =

√

√

=

√

= 0,0257

- H0 : µ1 = µ 2 H1 : µ1≠ µ 2

- Dengan menggunakan taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 1%

t 0,01/2 t 0,005 = ± 3,1693 untuk df = 6 + 6 - 2 = 10

- Daerah kritis penerimaan: - 3,1693 ≤ t0≤ 3,1693

- Daerah kritis penolakan: t0 < -3,1693 dan t0 > 3,1693

t0 =

√

= √

=

_{= 34,9257}

Karena t0 = 34,9257 > 3,1693 maka hipotesis H0 ditolak. Berarti terdapat

perbedaan yang signifikan rata-rata kadar natrium dalam biji kakao non fermentasi dan biji kako fermentasi.

Sebelum Dan Sesudah Penambahan Masing-Masing Larutan Baku Pada Biji Kakao

1. Hasil analisis kadar kalsium (Ca) sebelum ditambahkan larutan baku Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,1215 3,3210 33,2089

2 25,0009 0,1213 3,3153 33,1518

3 25,0008 0,1218 3,3295 33,2939

4 25,0009 0,1216 3,3238 33,2368

5 25,0006 0,1215 3,3210 33,2092

6 25,0008 0,1217 3,3267 33,2659

∑ 150,0048 199,3665

Rata-rata 25,0008 33,2278

2. Hasil analisis kadar kalsium (Ca) setelah ditambahkan larutan baku Sampel Berat Sampel

(g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0015 0,1333 3,6562 36,5598

2 25,0019 0,1335 3,6619 36,6162

3 25,0017 0,1330 3,6477 36,4745

4 25,0010 0,1332 3,6534 36,5325

5 25,0015 0,1334 3,6591 36,5888

6 25,0018 0,1330 3,6477 36,4744

∑ 150,0104 219,2462

Rata-rata 25,0017 36,5410

3. Hasil analisis kadar magnesium (Mg) sebelum ditambahkan larutan baku

Sampel Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,2614 0,4593 174,5284

2 25,0009 0,2616 0,4597 174,6797

3 25,0008 0,2619 0,4602 174,8704

4 25,0009 0,2617 0,4599 174,7557

5 25,0006 0,2617 0,4599 174,7578

6 25,0008 0,2615 0,4595 174,6044

∑ 150,0048 1048,1964

4. Hasil analisis kadar magnesium (Mg) setelah ditambahkan larutan baku

Sampel Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0015 0,2856 0,5023 190,8625

2 25,0019 0,2858 0,5027 191,0115

3 25,0017 0,2859 0,5028 191,0510

4 25,0010 0,2857 0,5025 190,9424

5 25,0015 0,2860 0,5030 191,1285

6 25,0018 0,2858 0,5027 191,0122

∑ 150,0104 1146,0081

Rata-rata 25,0017 191,0014

5. Hasil analisis kadar kalium (K) sebelum ditambahkan larutan baku

Sampel Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,0959 2,3069 692,0478

2 25,0009 0,0959 2,3069 692,0451

3 25,0008 0,0957 2,3019 690,5479

4 25,0009 0,0956 2,2995 689,8252

5 25,0006 0,0960 2,3094 692,8034

6 25,0008 0,0958 2,3044 691,2979

∑ 150,0048 4148,5673

Rata-rata 25,0008 691,4279

6. Hasil analisis kadar kalium (K) setelah ditambahkan larutan baku

Sampel Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0015 0,1010 2,4332 729,9162

2 25,0019 0,1007 2,4257 727,6547

3 25,0017 0,1009 2,4307 729,1604

4 25,0010 0,1006 2,4233 726,9609

5 25,0015 0,1008 2,4282 728,4163

6 25,0018 0,1008 2,4282 728,4076

∑ 150,0104 4370,5161

7. Hasil analisis kadar natrium (Na) sebelum ditambahkan larutan baku

Sampel Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0008 0,0434 0,3591 7,1817

2 25,0009 0,0435 0,3599 7,1977

3 25,0008 0,0435 0,3599 7,1978

4 25,0009 0,0438 0,3625 7,2497

5 25,0006 0,0437 0,3616 7,2318

6 25,0008 0,0434 0,3591 7,1817

∑ 150,0048 43,2404

Rata-rata 25,0008 7,2067

8. Hasil analisis kadar natrium (Na) setelah ditambahkan larutan baku

Sampel Berat Sampel (g)

Absorbansi (A)

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar (mg/100g)

1 25,0015 0,0482 0,4003 8,0055

2 25,0019 0,0484 0,4021 8,0414

3 25,0017 0,0481 0,3995 7,9895

4 25,0010 0,0483 0,4012 8,0237

5 25,0015 0,0485 0,4029 8,0575

6 25,0018 0,0483 0,4012 8,0234

∑ 150,0104 48,1410

Perolehan Kembali Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Pada Biji Kakao

1. Kalsium

Berat sampel = 25 gram

Kadar rata–rata kalsium pada biji kakao (X) = 33,2278 mg/100 g C*A = 10 % x X

=

x 33,2278 mg/100 g = 3,32278 mg/100 g = 33,2278 g/g

V

=

= = 0,8 ml

2. Magnesium

Berat sampel = 25 gram

Kadar rata–rata magnesium pada biji kakao (X) = 174,6994 mg/100 g C*A = 10 % x X

=

x 174,6994 mg/100 g = 17,46994 mg/100 g = 174,6994 g/g

V

=

=

= 4 ml

3. Kalium

Berat sampel = 25 gram

Kadar rata–rata kalium pada biji kakao (X) = 691,4279 mg/100 g C*A = 5 % x X

=

x 691,4279 mg/100 g = 34,57139 mg/100 g = 345,7139 g/g

V

=

=

= 9 ml

4. Natrium

Berat sampel = 25 gram

Kadar rata–rata natrium pada biji kakao (X) = 7,2067 mg/100 g C*A = 10 % x X

=

x 7,2067 mg/100 g = 0,72067 mg/100 g = 7,2067 g/g

V

=

=

= 0,2 ml

Magnesium, Kalium Dan Natrium Pada Sampel Biji Kakao

1. Perhitungan uji perolehan kembali kadar kalsium Sampel 1

Persamaan regresi : Y = 0,0352 X + 0,0046 X =

= 3,6562 g/ml Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 3,6562 g/ml CF =

x Volume (ml) x Faktor pengenceran =

x 50 ml x 50

= 365,5981 = 36,5598 mg/100g

Kadar sampel 1 setelah ditambah larutan baku (CF) = 36,5598 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum ditambahkan lautan baku (CA) adalah kadar rata-rata dari keenam sampel

CA =

= 33,2278 mg/100g

Berat sampel rata-rata uji recovery = 25,0017 g Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A) adalah C*A =

x Volume (ml)

=

x 0,8 ml

= 31,9978 = 3,1997 mg/100g

Maka % perolehan kembali kalsium =

x 100%

=

x 100%

2. Perhitungan uji perolehan kembali kadar magnesium Sampel 1

Persamaan regresi : Y = 0,5636 X + 0,0025 X =

= 0,5023 g/ml Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 0,5023 g/ml CF =

x Volume (ml) x Faktor pengenceran =

x 50 ml x 1900

= 1908,6255 = 190,8625 mg/100g

Kadar sampel 1 setelah ditambah larutan baku (CF) = 190,8625 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum ditambahkan lautan baku (CA) adalah kadar rata-rata dari keenam sampel

CA =

= 174,6994 mg/100g

Berat sampel rata-rata uji recovery = 25,0017 g Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A) adalah C*A =

x Volume (ml)

=

x 4 ml

= 159,9891 = 15,9989 mg/100g

Maka % perolehan kembali magnesium=

x 100%

=( - )

x100%

3. Perhitungan uji perolehan kembali kadar kalium Sampel 1

Persamaan regresi : Y = 0,0404 X + 0,0027

X = -

= 2,4332 g/ml Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 2,4332 g/ml CF =

x Volume (ml) x Faktor pengenceran =

x 50 ml x 1500

= 7299,1621 = 729,9162 mg/100g

Kadar sampel 1 setelah ditambah larutan baku (CF) = 729,9162 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum ditambahkan lautan baku (CA) adalah kadar rata-rata dari keenam sampel

CA =

= 691,4279 mg/100g

Berat sampel rata-rata uji recovery = 25,0017 g Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A) adalah C*A =

x Volume (ml)

=

x 9 ml = 359,9755 = 35,9975 mg/100g

Maka % perolehan kembali kalium =

x 100%

= ( - )

x100%

4. Perhitungan uji perolehan kembali kadar natrium Sampel 1

Persamaan regresi : Y = 0,1164 X + 0,0016

X = -

= 0,4003 g/ml Konsentrasi setelah ditambahkan larutan baku = 0,4003 g/ml CF =

x Volume (ml) x Faktor pengenceran =

x 50 ml x 100

= 80,0552 = 8,0055 mg/100g

Kadar sampel 1 setelah ditambah larutan baku (CF) = 8,0055 mg/100g

Kadar rata-rata sampel sebelum ditambahkan lautan baku (CA) adalah kadar rata-rata dari keenam sampel

CA =

= 7,2067 mg/100g

Berat sampel rata-rata uji recovery = 25,0017 g Kadar larutan standar yang ditambahkan (C*A) adalah C*A =

x Volume (ml)

=

x 0,2 ml = 7,9995

= 0,7999 mg/100g

Maka % perolehan kembali natrium =

x 100%

= ( - )

x100%

Dan Natrium Pada Sampel

1. Uji Perolehan Kembali Kalsium

No Berat Sampel

(g) Absorbansi

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar CF

( g/g)

Kadar CF

(mg/100g)

% Recovery 1. 25,0015 0,1333 3,6562 365,5981 36,5598 104,1348 2. 25,0019 0,1335 3,6619 366,1622 36,6162 105,8974 3. 25,0017 0,1330 3,6477 364,7452 36,4745 101,4689 4. 25,001 0,1332 3,6534 365,3254 36,5325 103,2816 5. 25,0015 0,1334 3,6591 365,8880 36,5888 105,0411 6. 25,0018 0,1330 3,6477 364,7437 36,4743 101,4626 Jumlah: 150,0104 0,7994 21,9260 2192,4626 219,2461 621,2864 Rata-rata: 25,0017 0,1332 3,6543 365,4104 36,5410 103,5477

2. Uji Perolehan Kembali Magnesium

No. Berat Sampel

(g) Absorbansi

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar CF

( g/g)

Kadar CF

(mg/100g)

% Recovery 1. 25,0015 0,2856 0,5023 1908,6255 190,8625 101,0263 2. 25,0019 0,2858 0,5027 1910,1148 191,0114 101,9570 3. 25,0017 0,2859 0,5028 1910,5101 191,0510 102,2045 4. 25,001 0,2857 0,5025 1909,4236 190,9423 101,5251 5. 25,0015 0,286 0,5030 1911,2853 191,1285 102,6889 6. 25,0018 0,2858 0,5027 1910,1225 191,0122 101,9620 Jumlah: 150,0104 1,7148 3,0160 11460,0818 1146,0079 611,3638 Rata-rata: 25,0017 0,2858 0,5027 1910,0136 191,0013 101,8940

3. Uji Perolehan Kembali Kalium

No Berat Sampel

(g) Absorbansi

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar CF

( g/g)

Kadar CF

(mg/100g)

% Recovery 1. 25,0015 0,101 2,4332 7299,1621 729,9162 106,9194 2. 25,0019 0,1007 2,4257 7276,5470 727,6547 100,6370 3. 25,0017 0,1009 2,4307 7291,6042 729,1604 104,8198 4. 25,001 0,1006 2,4233 7269,6092 726,9609 98,7096 5. 25,0015 0,1008 2,4282 7284,1630 728,4163 102,7527 6. 25,0018 0,1008 2,4282 7284,0755 728,4075 102,7282 Jumlah: 150,0104 0,6048 14,5693 43705,1610 4370,5160 616,5667 Rata-rata: 25,0017 0,1008 2,4282 7284,1935 728,4193 102,7611

4. Uji Perolehan Kembali Natrium

No Berat Sampel

(g) Absorbansi

Konsentrasi ( g/ml)

Kadar CF

( g/g)

Kadar CF

(mg/100g)

% Recovery 1. 25,0015 0,0482 0,4003 80,0552 8,0055 99,8625 2. 25,0019 0,0484 0,4021 80,4139 8,0413 104,3380 3. 25,0017 0,0481 0,3995 79,8946 7,9894 97,8497 4. 25,001 0,0483 0,4012 80,2368 8,0236 102,1253 5. 25,0015 0,0485 0,4029 80,5752 8,0575 106,3633 6. 25,0018 0,0483 0,4012 80,2342 8,0234 102,1003 Jumlah: 150,0104 0,2898 2,4072 481,4099 48,1407 612,6391 Rata-rata: 25,0017 0,0483 0,4012 80,2350 8,0235 102,1065

Kakao

1. Kalsium

No. (%) Perolehan Kembali

(Xi) (Xi - Xi) (Xi - Xi)

2

1. _104,1348 0,5871 0,3445

2. 105,8974 2,3497 5,5211

3. _101,4689 -2,0788 4,3214

4. _103,2816 -0,2661 0,0708

5. _105,0411 1,4934 2,2302

6. _101,4626 -2,0851 4,3476

∑Xi = 621,2864 ∑(Xi - Xi)2 = 16,8356 Xi = 103,5477

SD =

√

=

√

= √ = 1,8350 RSD =

x 100% =

x 100% = 1,7721 %

2. Magnesium

No. (%) Perolehan Kembali

(Xi) (Xi - Xi) (Xi - Xi)

2

1. _101,0263 -0,8677 0,7529

2. 101,9570 0,0630 0,0040

3. _102,2045 0,3105 0,0964

4. _101,5251 -0,3689 0,1361

5. _102,6889 0,7949 0,6319

6. _101,9620 0,0680 0,0046

SD =

√

=

√

= √ = 0,5702

RSD =

x 100% =

x 100% = 0,5596 %

3. Kalium

No. (%) Perolehan Kembali

(Xi) (Xi - Xi) (Xi - Xi)

2

1. _106,9194 4,1583 17,2915

2. _100,6370 -2,1241 4,5118

3. 104,8198 2,0587 4,2382

4. _98,7096 -4,0515 16,4147

5. _102,7527 -0,0084 0,0000

6. _102,7282 -0,0329 0,0011

∑Xi = 616,5667 ∑(Xi - Xi)2 = 42,4573 Xi = 102,7611

SD =

√

=

√

= √ = 2,9140

RSD =

x 100%

=

x 100% = 2,8357 %

4. Natrium

No. (%) Perolehan Kembali

(Xi) (Xi - Xi) (Xi - Xi)

2

1. _99,8625 -2,244 5,0355

2. 104,3380 2,2315 4,9796

3. _97,8497 -4,2568 18,1203

4. _102,1253 0,0188 0,0004

5. _106,3633 4,2568 18,1203

6. _102,1003 -0,0062 0,0000

∑Xi = 612,6391 ∑(Xi - Xi)2 = 46,2561 Xi = 102,1065

SD =

√

=

√

= √ = 3,0416

RSD =

x 100%

=

x 100% = 2,9788 %

1. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi kalsium Y = 0,0352 X + 0,0046

Slope = 0,0352

No

Konsentrasi (µg/ml)

X

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 -0,0002 0,0046 -0,0048 0,00002304

2 2,0000 0,0812 0,0750 0,0062 0,00003844

3 4,0000 0,1472 0,1454 0,0018 0,00000324

4 6,0000 0,2121 0,2158 -0,0037 0,00001369

5 8,0000 0,2879 0,2862 0,0017 0,00000289

6 10,0000 0,3552 0,3566 -0,0014 0,00000196

∑(Y-Yi)2= 0,00008326

Simpangan Baku =

√

=

√

= 0,0045

Batas Deteksi = ⁄ =

= 0,3888 g/ml

Batas Kuantitasi = _⁄

=

= 1,2963 g/ml

2. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi magnesium Y = 0,5636 X + 0,0025

Slope = 0,5636

No

Konsentrasi (µg/ml)

X

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 -0,0003 0,0025 -0,0028 0,00000784

2 0,2000 0,1137 0,1152 -0,0015 0,00000225

3 0,4000 0,2369 0,2279 0,0090 0,00008100

4 0,6000 0,3391 0,3407 -0,0016 0,00000256

5 0,8000 0,4497 0,4534 -0,0037 0,00001369

6 1,0000 0,5665 0,5661 0,0004 0,00000016

∑(Y-Yi)2= 0,00010750

Simpangan Baku =

√

=

√

= 0,0051

Batas Deteksi = ⁄ =

= 0,0275 g/ml

Batas Kuantitasi = ⁄ =

= 0,0919 g/ml

3. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi kalium Y = 0,0404 X + 0,0027

Slope = 0,0404

No

Konsentrasi (µg/ml)

X

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 -0,0020 0,0027 -0,0047 0,00002209

2 2,0000 0,0853 0,0835 0,0018 0,00000324

3 4,0000 0,1711 0,1643 0,0068 0,00004624

4 6,0000 0,2437 0,2451 -0,0014 0,00000196

5 8,0000 0,3267 0,3259 0,0008 0,00000064

6 10,0000 0,4036 0,4067 -0,0031 0,00000961

∑(Y-Yi)2= 0,00008380

Simpangan Baku =

√

=

√

= 0,0045

Batas Deteksi = ⁄ =

= 0,3398 g/ml

Batas Kuantitasi = ⁄ =

= 1,1329 g/ml

4. Perhitungan batas deteksi dan batas kuantitasi natrium Y = 0,1164 X + 0,0016

Slope = = 0,1164

No

Konsentrasi (µg/ml)

X

Absorbansi

(Y) Yi Y-Yi (Y-Yi)

2

1 0,0000 -0,0001 0,0016 -0,0017 0,00000289

2 0,2000 0,0265 0,0249 0,0016 0,00000256

3 0,4000 0,0489 0,0482 0,0007 0,00000049

4 0,6000 0,0715 0,0714 0,0001 0,00000001

5 0,8000 0,0932 0,0947 -0,0015 0,00000225

6 1,0000 0,1186 0,1180 0,0006 0,00000036

∑(Y-Yi)2= 0,00000856

Simpangan Baku =

√

=

√

= 0,0014

Batas Deteksi = ⁄ =

= 0,0377 g/ml

Batas Kuantitasi = ⁄ =

= 0,1256 g/ml

Tanur

Alat Spektrofotometer Serapan Atom (AAS)

Almatsier, S. (2004). Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: PT. Gramedia PustakaUtama. Halaman 228, 230 – 237, 242 – 243, 246 – 248.

Ambardini, S. (2009). Perubahan Kadar Lemak Biji Kakao (Theobroma cacao L.) Melalui Fermentasi Beberapa Isolat Khamir. Warta-Wiptek, Vol. 17, No. 01 Januari 2009, ISSN 0854-0667. Available from: http://118.97.35.230/download/29072010/sriambardini/MIPA/perubahan/ kadar/lemak/biji/kakao.doc. Tgl 19 Juni 2015.

Budiyanto, M.A.K. (2004). Dasar-Dasar Ilmu Gizi. Edisi Kedua. Cetakan Ketiga. Malang: UMM-Press. Halaman 60, 64 - 65.

Darmono. (1995). Logam Dalam Sistem Biologi Makhluk Hidup. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia Press. Halaman 127, 130.

Ditjen, POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 692.

Doume, Z.S.Y., Rostiati., dan Hutomo, G.S. (2013). Karakteristik Kimia Dan Sensoris Biji Kakao Hasil Fermentasi Pada Tingkat Petani Dan Skala Laboratorium. Agrotekbis 1 (2) : 145-152, Juni 2013, ISSN: 2338-3011. Available from: http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php. Tgl 18 Juni 2015.

Elisabeth, D.A.A., Suharyanto., dan Rubiyo. (2007). Pengaruh Fermentasi Biji Kakao Terhadap Mutu Produk Olahan Setengah Jadi Cokelat. Available from: http://ntb.litbang.pertanian.go.id/ind/2007/pengaruhfermentasi.doc. Tgl 19 Juni 2015.

Ermer, J., and McB. Miler, J.H. (2005). Method Validation in Pharmaceutical Analysis. Weinheim: Wiley-Vch Verlag GmbH & Co. KGaA. Halaman 171.

Gandjar, I.G., dan Rohman, A. (2009). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 298 - 321.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Review Artikel. Majalah Ilmu Kefarmasian. Vol. I, No. 3, 1(3). Halaman 117 – 119,12 – 122, 127 – 130.

Harris, D.C. (2007). Quantitative Chemical Analysis. Seventh Edition. New York: W. H. Freeman and Company. Pages 455.

SNI Biji Kakao 01-2323-2008. Yogyakarta: Perpustakaan Nasional Katalog Dalam Terbitan. Halaman 19 – 20, 24 – 25.

Hayati, R., Yusmanizar., Mustafril., dan Fauzi, H. (2012). Kajian Fermentasi dan

Suhu Pengeringan Pada Mutu Kakao (Theobroma cacao L.). Jurnal Keteknikan Pertanian. Available from:

http://id.portalgaruda.org/ref=browsemod=viewarticle=144077. Tgl 17 Juni 2015.

Helrich, K. (1990). Official Methods Of Analysis Of The Association Of Official Analytical Chemists. Edisi ke-15. Virginia: AOAC International. Halaman 42.

Khopkar, S.M. (2003). Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: Universitas Indonesia Press. Halaman 274 - 279.

Knight, I. (1999). Chocolate and Cocoa : Health and Nutrition. Berlin, Germany: Blackwell Publishing Ltd. Halaman 145.

Kristianingrum, S. (2012). Kajian Berbagai Proses Destruksi Sampel Dan Efeknya. Available from: https://www.academia.edu.6847858/kajian-berbagai-proses-destruksi-sampel-dan-efeknya. Tgl 18 Juni 2015.

Poedjiwidodo, Y. (1996). Sambung Samping Kakao. Ungaran: PT. Trubus Agriwidya. Halaman 5, 17 - 18, 99.

Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia. (2004). Panduan Lengkap Budi Daya Kakao. Jakarta: Agromedia Pustaka. Halaman 29, 156, 159.

Rosmarkam, A., dan Yuwono, N.W. (2002). Ilmu Kesuburan Tanah. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 62 – 64.

SNI 2323:2008. (2008). Standar Nasional Indonesia (SNI) Biji Kakao. Jakarta: Badan Standardisasi Nasional. Halaman 3.

Sudjana. (2005). Metode Statistika. Edisi Keenam. Bandung: Tarsito. Halaman 93, 168, 239.

Susanto, F.X. (1994). Tanaman Kakao Budidaya Dan Pengolahan Hasil. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 160.

Ulfaniah, K., Handoyo, T., dan Sakdiyah, Z. (2014). Perubahan Kandungan Antioksidan, Polifenol Dan Profil Protein Selama Pra-Perkecambahan Pada Biji Kakao. Berkala Ilmiah Pertanian, Vol. 1, No. 3. Available from: http://jurnal.unej.ac.id/index.php/BIP/article/view/507. Tgl 17 Juni 2015.

Pulpa Kakao Menjadi Produk Yang Bermutu Dan Bernilai Tambah.

Review Penelitian Kopi dan Kakao 2008, 24(1) 65-82. Available from:

http://dokumen.tips/teknologi-fermentasi-dan-diversifikasi- pulpa-kakao-menjadi-produk-yang-bermutu-dan-bernilai-tambah.html. Tgl 16 Juni 2015.

Wiranda, W. (2014). Penentuan Kandungan Logam Kalsium (Ca) Dan Magnesium (Mg) Pada Biji Kakao Non Fermentasi Dan Fermentasi Dengan Cara Spektrofotometri. Available from: http://repository.unand.ac.id/5598. Tgl 10 Juni 2015.

METODE PENELITIAN

Metode penelitian yang dilakukan ini adalah penelitian yang besifat deskriptif, yang bertujuan menggambarkan suatu keadaan secara sistematis yaitu untuk mengetahui kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium pada biji kakao non fermentasi dan fermentasi.

3.1 Tempat Dan Waktu Penelitian

Tempat dan waktu penelitian ini dilakukan di Laboratorium Penelitian Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara pada bulan Mei 2015 – Agustus 2015.

3.2 Bahan - Bahan 3.2.1 Sampel

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah kakao yang diambil dari kebun di belakang rumah saudara, di Jalan Coklat No. 78, Kelurahan Sukarame, Kecamatan Binjai Darat, Provinsi Sumatera Utara.

3.2.2 Pereaksi

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah pro analisis keluaran E. Merck yaitu asam nitrat pekat 65% b/v, akuademineralisata, larutan baku

kalsium 1000 g/ml, larutan baku magnesium 1000 g/ml, larutan baku kalium

1000 g/ml dan larutan baku natrium 1000 g/ml (Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi USU).

3.3 Alat – Alat

Alat–alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Spektrofotometer Serapan Atom (Hitachi Z-2000) dengan nyala udara-asetilen lengkap dengan lampu katoda kalsium, magnesium, kalium dan natrium, Tanur (Naberthem), Kertas Whatman No.42, Neraca analitik (BOECO Germany), Krus porselen, Hot plate (BOECO Germany), Blender (Aragawa), Alat-alat gelas (Pyrex dan Oberoi).

3.4 Identifikasi Sampel

Identifikasi tumbuhan dilakukan oleh Herbarium Bogoriense, Bidang Botani, Pusat Penelitian dan Pengembangan Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor, Jalan Raya Jakarta–Bogor Km.46, Cibinong.

3.5 Pembuatan Pereaksi 3.5.1 Larutan HNO3 (1:1)

Asam Nitrat 65% sebanyak 100 ml diencerkan dengan akuademineralisata 100 ml (Ditjen POM, 1979).

3.6 Prosedur Penelitian 3.6.1 Pengambilan Sampel

Metode pengambilan sampel dilakukan dengan cara sampling purposif yang dikenal juga sebagai sampling pertimbangan dimana sampel ditentukan atas pertimbangan bahwa populasi sampel adalah homogen dan sampel yang tidak diambil mempunyai karakteristik yang sama dengan sampel yang sedang diteliti (Sudjana, 2005).

3.6.2.1 Penyiapan Sampel Non Fermentasi

Percobaan dilakukan dimulai dari pemetikan buah kakao dengan menggunakan pisau. Buah kakao yang baru dipetik, lalu dibelah menjadi dua bagian. Kemudian dikeringkan dibawah sinar matahari selama 7 hari. Sampel yang sudah kering, lalu dikupas kulit arinya dan diblender (dihaluskan).

3.6.2.2 Penyiapan Sampel Fermentasi

Percobaan dilakukan dimulai dari pemetikan buah kakao dengan menggunakan pisau. Buah kakao yang baru dipetik, lalu dibelah menjadi dua bagian. Kemudian dilakukan proses fermentasi biji kakao yang dimasukkan ke dalam kotak fermentasi dan ditutup dengan menggunakan daun pisang. Fermentasi dilakukan selama 5 hari dengan pembalikan sekali setelah 48 jam fermentasi. Biji yang sudah difermentasi dicuci secara hati-hati. Kemudian biji dikeringkan dibawah sinar matahari selama 7 hari. Sampel yang telah kering, lalu dikupas kulit arinya dan diblender (dihaluskan).

3.6.3 Proses Destruksi

Sampel yang telah dihaluskan ditimbang sebanyak 25 gram didalam krus porselen, diarangkan diatas hot plate, lalu diabukan dalam tanur dengan temperatur awal 100°C dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga suhu 500°C dengan interval 25°C setiap 5 menit. Pengabuan dilakukan selama 48 jam dan dibiarkan hingga dingin pada desikator. Abu yang diperoleh ditambahkan 5 ml HNO3 (1:1) secara hati-hati. Kemudian kelebihan HNO3 (1:1) diuapkan pada hot plate sampai kering. Krus porselen dimasukkan kembali ke dalam tanur dengan temperatur awal 100oC dan perlahan-lahan temperatur dinaikkan hingga

suhu 500 C dengan interval 25 C setiap 5 menit, dilakukan selama 1 jam dan dibiarkan hingga dingin pada desikator (Helrich, 1990).

3.6.4 Pembuatan Larutan Sampel

Hasil destruksi dilarutkan dengan 5 ml HNO3 (1:1), dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan krus porselen dibilas dengan akuademineralisata sebanyak 3 kali. Hasil pembilasan dimasukkan ke dalam labu tentukur. Setelah itu dicukupkan volumenya dengan akuademineralisata hingga garis tanda. Lalu disaring dengan kertas Whatman No. 42 dengan membuang ± 5 ml larutan sampel pertama hasil penyaringan untuk menjenuhkan kertas saring dan selanjutnya ditampung ke dalam botol. Larutan ini digunakan untuk uji kuantitatif kalsium, magnesium, kalium dan natrium.

3.6.5 Analisis Kuantitatif

3.6.5.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalsium

Larutan baku kalsium (1000 g/ml) dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (konsentrasi 100 g/ml) (LIB I).

Larutan untuk kurva kalibrasi kalsium dibuat dengan memipet (0,5; 1; 1,5; 2; dan 2,5 ml) dari LIB I, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (larutan ini

mengandung 2; 4; 6; 8 dan 10 g/ml) dan diukur pada panjang gelombang 422,7 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.6.5.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Magnesium

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (konsentrasi 10 g/ml) (LIB II).

Larutan untuk kurva kalibrasi magnesium dibuat dengan memipet (1; 2; 3; 4; dan 5 ml) dari LIB II, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (larutan ini mengandung 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 dan 1 g/ml) dan diukur pada panjang gelombang 285,2 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.6.5.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalium

Larutan baku kalium (1000 g/ml) dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (konsentrasi 100 g/ml) (LIB I).

Larutan untuk kurva kalibrasi kalium dibuat dengan memipet (0,5; 1; 1,5; 2; dan 2,5 ml) dari LIB I, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (larutan ini

mengandung 2; 4; 6; 8 dan 10 g/ml) dan diukur pada panjang gelombang 766,5 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.6.5.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi Natrium

Larutan baku natrium (1000 g/ml) dipipet sebanyak 5 ml, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (konsentrasi 100 g/ml), kemudian dipipet 5 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (konsentrasi 10 g/ml) (LIB II).

dan 5 ml) dari LIB II, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuademineralisata (larutan ini mengandung 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 dan 1 g/ml) dan diukur pada panjang gelombang 589,0 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.6.5.5 Penetapan Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Dalam Sampel

Sebelum dilakukan penetapan kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium dalam sampel terlebih dahulu alat spektrofotometer serapan atom dikondisikan dan diatur metodenya sesuai dengan mineral yang akan diperiksa.

3.6.5.5.1 Penetapan Kadar Kalsium Dalam Sampel

Larutan sampel biji kakao hasil destruksi dipipet sebanyak 1 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan dengan akuademineralisata hingga garis tanda (Faktor pengenceran = 50/1 = 50 kali). Diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom pada panjang gelombang 422,7 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku kalsium. Konsentrasi kalsium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.5.5.2 Penetapan Kadar Magnesium Dalam Sampel

Larutan sampel biji kakao hasil destruksi dipipet sebanyak 0,1 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dicukupkan dengan akuademineralisata hingga garis tanda. Kemudian dipipet lagi sebanyak 6,5 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan dengan akuademineralisata hingga garis

285,2 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku magnesium. Konsentrasi magnesium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.5.5.3 Penetapan Kadar Kalium Dalam Sampel

Larutan sampel biji kakao hasil destruksi dipipet sebanyak 0,1 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml, dicukupkan dengan akuademineralisata hingga garis tanda. Kemudian dipipet lagi sebanyak 8,3 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan dengan akuademineralisata hingga garis tanda (Faktor pengenceran = 50/0,1 x 25/8,3 = 1500 kali). Diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom pada panjang gelombang 766,5 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku kalium. Konsentrasi kalium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

3.6.5.5.4 Penetapan Kadar Natrium Dalam Sampel

Larutan sampel biji kakao di pipet sebanyak 0,5 ml dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan diencerkan dengan akua demineralisata hingga garis tanda (Faktor pengenceran = 50/0,5 = 100 kali). Diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometer serapan atom pada panjang gelombang 589,0 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh harus berada dalam rentang kurva kalibrasi larutan baku natrium. Konsentrasi natrium dalam sampel ditentukan berdasarkan persamaan garis regresi dari kurva kalibrasi.

dihitung dengan cara sebagai berikut:

Kadar ( g/g) =

3.6.6 Analisis Data Secara Statistik 3.6.6.1 Penolakan Hasil Pengamatan

Menurut Sudjana (2005), kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium yang diperoleh dari hasil pengukuran masing-masing larutan sampel dianalisis dengan metode standar deviasi menggunakan rumus sebagai berikut:

SD =

√

Keterangan:

Xi = kadar sampel (mg/100g)

X = kadar rata-rata sampel (mg/100g) n = jumlah pengulangan

Untuk mencari t hitung digunakan rumus:

t hitung =| |

√

dan untuk menentukan kadar mineral di dalam sampel dengan interval

kepercayaan 99%, α = 0.01, dk = n-1, dapat digunakan rumus: Kadar Mineral: μ = X ± (t (α/2, dk) x SD / √n )

Keterangan:

X = kadar rata-rata sampel (mg/100g) SD = standar deviasi (mg/100g)

dk = derajat kebebasan (dk = n-1)

α = interval kepercayaan n = jumlah pengulangan

Menurut Sudjana (2005), sampel yang dibandingkan adalah independen

dan jumlah pengamatan masing-masing lebih kecil dari 30 dan varians () tidak diketahui sehingga dilakukan uji F untuk mengetahui apakah varians kedua

populasi sama (1 =  2) atau berbeda (1  2) dengan rumus: F0 =

Keterangan: F0 = beda nilai yang dihitung

S1 = standar deviasi sampel 1 (mg/100g) S2 = standar deviasi sampel 2 (mg/100g)

Apabila dari hasilnya diperoleh Fo tidak melewati nilai kritis F maka dilanjutkan uji dengan distribusi t dengan rumus:

to =

√

Sp =

√

Keterangan: X1 = kadar rata-rata sampel 1 (mg/100g) X2 = kadar rata-rata sampel 2 (mg/100g) Sp = simpangan baku

n1 = jumlah pengulanan sampel 1 n2 = jumlah pengulanan sampel 2

S1 = standar deviasi sampel 1 (mg/100g) S2 = standar deviasi sampel 2 (mg/100g)

Kedua sampel dinyatakan berbeda apabila to yang diperoleh melewati nilai kritis t, dan sebaliknya.

3.6.7 Analisis Validasi Metode

3.6.7.1 Uji Perolehan Kembali (Recovery)

Uji perolehan kembali (recovery) dilakukan dengan metode penambahan larutan standar (standard addition method). Dalam metode ini, kadar mineral

mineral dalam sampel setelah penambahan larutan baku dengan konsentrasi tertentu (Ermer dan McB. Miller, 2005).

Sampel biji kakao yang telah dihaluskan, ditimbang sebanyak 25 gram di dalam 24 krus porselin, lalu masing-masing krus ditambahkan 0,8 ml larutan baku

kalsium (konsentrasi 1000 g/ml), 4 ml larutan baku magnesium (konsentrasi

1000 g/ml), 9 ml larutan baku kalium (konsentrasi 1000 g/ml), dan 0,2 ml larutan baku natrium (konsentrasi 1000 g/ml). Perhitungan jumlah baku yang ditambahkan dapat dilihat pada Lampiran 16 Halaman 101. Kemudian dilanjutkan dengan prosedur destruksi kering seperti yang telah dilakukan pada sampel sebelumnya. Prosedur pengukuran uji perolehan kembali dilakukan sama dengan prosedur penetapan kadar dalam sampel.

Menurut Harmita (2004), persen perolehan kembali dapat dihitung dengan rumus di bawah ini:

Persen Perolehan Kembali = Keterangan:

CA = kadar logam dalam sampel sebelum penambahan baku (mg/100g) CF = kadar logam dalam sampel setelah penambahan baku (mg/100g) C*A = kadar larutan baku yang ditambahkan (mg/100g)

3.6.7.2 Simpangan Baku Relatif

Keseksamaan atau presisi diukur sebagai simpangan baku relatif atau koefisien variasi. Keseksamaan atau presisi merupakan ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual ketika suatu metode dilakukan secara berulang untuk sampel yang homogen. Nilai simpangan baku relatif yang

dilakukan. Menurut Harmita (2004), rumus untuk menghitung simpangan baku relatif adalah sebagai berikut:

RSD = 100%

X SD

Keterangan: X = kadar rata-rata sampel (%) SD = standar deviasi (%)

RSD = relative standard deviation (%)

3.6.7.3 Batas Deteksi Dan Batas Kuantitasi

Menurut Harmita (2004), batas deteksi merupakan jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan. Sebaliknya batas kuantitasi merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama.

Batas deteksi dan batas kuantitasi ini dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:

Simpangan Baku ⁄ =

√

Batas Deteksi (LOD) = Batas Kuantitasi (LOQ) =

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan

Identifikasi tumbuhan dilakukan oleh Herbarium Bogoriense, Bidang Botani, Pusat Penelitian dan Pengembangan Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Bogor, Jalan Raya Jakarta–Bogor Km.46, Cibinong. Disebutkan bahwa tumbuhan yang digunakan adalah biji kakao (Theobroma cacao L.) dengan suku Malvaceae. Surat hasil identifikasi tumbuhan dapat dilihat pada Lampiran 2 Halaman 57.

4.2 Analisis Kuantitatif

4.2.1 Kurva Kalibrasi Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium

Kurva kalibrasi kalsium, magnesium, kalium dan natrium diperoleh dengan cara mengukur absorbansi dari larutan baku kalsium, magnesium, kalium dan natrium pada panjang gelombang masing-masing.

Dari pengukuran kurva kalibrasi untuk keempat mineral tersebut diperoleh persamaan garis regresi yaitu Y = 0,0352X + 0,0046 untuk kalsium, Y = 0,5636X + 0,0025 untuk magnesium, Y = 0,0404X + 0,0027 untuk kalium dan Y = 0,1164X + 0,0016 untuk natrium.

Kurva kalibrasi larutan baku kalsium, magnesium, kalium dan natrium dapat dilihat pada Gambar 4.1, Gambar 4.2, Gambar 4.3 dan Gambar 4.4 berikut ini:

Gambar 4.1 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Kalsium

Gambar 4.2 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Magnesium

Gambar 4.3 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Kalium

r = 0,9995

-0,05 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4

0 2 4 6 8 10 12

A b so rb a n si Konsentrasi (mcg/ml)

Y = 0,5636X + 0,0025 r = 0,9998

-0,1 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2

A b so rb a n si Konsentrasi (mcg/ml)

1-Mg 285.2

Y = 0,0404X + 0,0027 r = 0,9996

-0,05 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45

0 2 4 6 8 10 12

A b so rb a n si Konsentrasi (mcg/ml)

1-K 766.5

Gambar 4.4 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Natrium

Berdasarkan kurva diatas diperoleh hubungan yang linear antara konsentrasi dengan absorbansi, dengan koefisien korelasi (r) kalsium sebesar 0,9995, magnesium sebesar 0,9998, kalium sebesar 0,9996 dan natrium sebesar 0,9995. Nilai r ≥ 0,97 menunjukkan adanya korelasi linier yang menyatakan adanya hubungan antara X (Konsentrasi) dan Y (Absorbansi) (Ermer dan McB.Miller, 2005).

Data hasil pengukuran absorbansi larutan baku dan perhitungan persamaan garis regresi kalsium dapat dilihat pada Lampiran 6 Halaman 61, magnesium dapat dilihat pada Lampiran 7 Halaman 63, kalium dapat dilihat pada Lampiran 8 Halaman 65 dan natrium dapat dilihat pada Lampiran 9 Halaman 67.

4.2.2 Analisis Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Dalam Sampel

Penentuan kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium dilakukan secara spektrofotometri serapan atom. Sumber nyala yang dipakai adalah udara-asitilen dengan suhu nyala 2200oC yang dapat mengatomisasi hampir semua elemen. Konsentrasi kalsium, magnesium, kalium dan natrium dalam sampel

Y = 0,1164X + 0,0016 r = 0,9995

-0,02 0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0,14

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2

A

b

so

rb

a

n

si

Konsentrasi (mcg/ml)

masing-masing. Konsentrasi kalsium, magnesium, kalium dan natrium belum berada dalam rentang kalibrasi sehingga perlu diencerkan, untuk kalsium (pengenceran 50 kali), untuk magnesium (pengenceran 1900 kali), untuk kalium (pengenceran 1500 kali), dan untuk natrium (pengenceran 100 kali). Pengujian dilanjutkan dengan perhitungan statistik. Hasil analisis kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium dapat dilihat pada Lampiran 10 Halaman 69, serta contoh perhitungan dapat dilihat pada Lampiran 11 Halaman 72. Hasil penetapan kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium pada sampel dapat dilihat pada Tabel 4.1 berikut:

Tabel 4.1 Hasil Penetapan Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Dalam Sampel

Sampel Kadar (mg/100g)

Kalsium Magnesium Kalium Natrium Biji kakao

non fermentasi

30,2659 ± 0,0716

154,7221 ± 0,0687

607,7246 ± 1,2112

6,6898 ± 0,0245 Biji kakao

fermentasi

33,2278 ± 0,0498

174,6994 ± 0,1220

691,4279 ±

1,1020 7,2067 ± _0,0268

Berdasarkan Tabel 4.1 diatas dapat diketahui bahwa kadar kalium pada biji kakao fermentasi lebih besar dibandingkan biji kakao non fermentasi dan mineral lain, hal ini dikarenakan kebutuhan unsur hara kakao meningkat sesuai dengan pertambahan umur. Hasil penelitian menunjukkan bahwa unsur hara yang paling banyak atau tinggi yang dibutuhkan kakao adalah kalium dengan urutan K > Mg > Ca > Na (Poedjiwidodo, 1996). Kalium berperan langsung dalam proses fotosintesis yaitu dalam pembentukan klorofil dan pembentukan jaringan, dan

tinggi (Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia, 2004). Kadar magnesium pada biji kakao fermentasi lebih besar dibanding dengan biji kakao fermentasi, hal ini terjadi dikarenakan magnesium dalam jaringan tanaman relatif lebih rendah dibanding kalium, semakin tinggi penyerapan kalium semakin rendah penyerapan magnesium (Rosmarkam, dkk., 2002).

Meningkatnya kadar magnesium dan kalsium pada biji kakao fermentasi didukung oleh hasil penelitian Wiranda (2014), yang menyatakan bahwa kandungan magnesium pada biji kakao dengan proses fermentasi meningkat dibandingkan dengan biji kakao non fermentasi yaitu 491 mcg/g dan 445 mcg/g menjadi 554 mcg/g dan 505 mcg/g. Kandungan kalsium pada biji kakao dengan proses fermentasi juga meningkat dibandingkan dengan biji kakao non fermentasi yaitu 453 mcg/g dan 466 mcg/g menjadi 596 mcg/g dan 528 mcg/g.

Data yang didapat kemudian dihitung berapa besar persentase peningkatan kadar dari masing-masing mineral pada sampel yaitu peningkatan kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium pada biji kakao non fermentasi menjadi biji kakao fermentasi (perhitungan dapat dilihat pada Lampiran 13 pada Halaman 89). Hasil peningkatan kadar kalsium, magnesium, kalium dan natrium pada sampel biji kakao non fermentasi dengan biji kakao fermentasi dapat dilihat pada Tabel 4.2 berikut:

3.6 Prosedur Penelitian ... 31

3.6.1 Pengambilan Sampel ... 31

3.6.2 Penyiapan Sampel ... 32

3.6.2.1 Penyiapan Sampel Non Fermentasi ... 32

3.6.2.2 Penyiapan Sampel Fermentasi ... 32

3.6.3 Proses Destruksi ... 32

3.6.4 Pembuatan Larutan Sampel ... 33

3.6.5 Analisis Kuantitatif ... 33

3.6.5.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalsium ... 33

3.6.5.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Magnesium ... 33

3.6.5.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalium ... 34

3.6.5.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi Natrium ... 34

3.6.5.5 Penetapan Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Dalam Sampel ... 35

3.6.5.5.1 Penetapan Kadar Kalsium ... 35

3.6.5.5.2 Penetapan Kadar Magnesium ... 35

3.6.5.5.3 Penetapan Kadar Kalium ... 36

3.6.5.5.4 Penetapan Kadar Natrium ... 36

3.6.6 Analisis Data Secara Statistik ... 37

3.6.6.1 Penolakan Hasil Pengamatan ... 37

3.6.6.2 Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Antar Sampel ... 38

3.6.7 Analisis Validasi Metode ... 38

3.6.7.1 Uji Perolehan Kambali (Recovery) ... 38

3.6.7.3 Batas Deteksi Dan Batas Kuantitasi ... 40

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 41

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 41

4.2 Analisis Kuantitatif ... 41

4.2.1 Kurva Kalibrasi Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium ... 41

4.2.2 Analisis Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Dalam Sampel ... 43

4.2.3 Uji Perolehan Kembali (Recovery) ... 47

4.2.4 Simpangan Baku Relatif ... 48

4.2.5 Batas Deteksi Dan Batas Kuantitasi ... 49

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 50

5.1 Kesimpulan ... 50

5.2 Saran ... 50

DAFTAR PUSTAKA ... 51

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

2.1 Persyaratan Umum Mutu Biji Kakao ... 7 2.2 Persyaratan Khusus Mutu Biji Kakao ... 7 2.3 Rentang Persen Perolehan Kembali Yang Diizinkan Pada

Analit Sampel ... 28 4.1 Hasil Penetapan Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan

Natrium Dalam Sampel ... 44 4.2 Hasil Peningkatan Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan

Natrium Pada Sampel Biji Kakao Non Fermentasi Menjadi

Biji Kakao Fermentasi ... 46 4.3 Hasil Uji Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium,

Magnesium, Kalium Dan Natrium Antar Sampel ... 47 4.4 Persen Uji Perolehan Kembali (Recovery) Kadar Kalsium,

Magnesium, Kalium Dan Natrium ... 47 4.5 Simpangan Baku Relatif Kalsium, Magnesium, Kalium

Dan Natrium Dalam Sampel ... 48 4.6 Batas Deteksi Dan Batas Kuantitasi Kalsium, Magnesium

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Sistem Peralatan Spektrofotometri Serapan Atom ... 25

4.1 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Kalsium ... 42

4.2 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Magnesium ... 42

4.3 Kurva Kalibrasi Larutan Baku Kalium ... 42

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Gambar Tanaman Kakao (Theobroma cacao L.), Buah Kakao, Biji Kakao Non Fermentasi Dan Biji Kakao

Fermentasi ... 54 2. Hasil Identifikasi Tanaman ... 57 3. Bagan Alir Proses Destruksi Kering Biji Kakao Non Fermentasi ... 58 4. Bagan Alir Proses Destruksi Kering Biji Kakao Fermentasi 59 5. Bagan Alir Pembuatan Larutan Sampel ... 60 6. Data Kalibrasi Kalsium Dengan Spektrofotometer Serapan

Atom, Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan

Koefisien Korelasi (r) ... 61 7. Data Kalibrasi Magnesium Dengan Spektrofotemer

Serapan Atom, Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan

Koefisien Korelasi (r) ... 63 8. Data Kalibrasi Kalium Dengan Spektrofotometer Serapan

Atom, Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan

Koefisien Korelasi (r) ... 65 9. Data Kalibrasi Natrium Dengan Spektrofotometer Serapan

Atom, Perhitungan Persamaan Garis Regresi Dan

Koefisien Korelasi (r) ... 67 10. Hasil Analisis Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan

Natrium Dalam Sampel ... 69 11. Contoh Perhitungan Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium

Dan Natrium Pada Sampel ... 72 12. Perhitungan Statistik Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium

Dan Natrium Dalam Sampel ... 76 13. Persentase Peningkatan Kadar Kalsium, Magnesium

Kalium Dan Natrium Dalam Biji Kakao Non Fermentasi

14. Pengujian Beda Nilai Rata-Rata Kadar Kalsium,

Magnesium, Kalium Dan Natrium Pada Sampel ... 91 15. Hasil Analisis Kadar Kalsium, Magnesium, Kalium Dan

Natrium Sebelum Dan Sesudah Penambahan Masing-

Masing Larutan Baku Pada Biji Kakao ... 98 16. Perhitungan Jumlah Baku Yang Ditambahkan Untuk

Perolehan Kembali Kalsium, Magnesium, Kalium Dan

Natrium Pada Biji Kakao ... 101 17. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali Kadar

Kalsium, Magnesium, Kalium Dan Natrium Pada Sampel

Biji Kakao ... 103 18. Kesimpulan Uji Perolehan Kembali Kalsium, Magnesium

Kalium Dan Natrium Pada Sampel ... 107 19. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Pada Sampel

Biji Kakao ... 109 20. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) Dan Batas Kuantitasi

(LOQ) ... 112 21. Tabel Distribusi t ... 116 22. Tabel Distribusi F ... 117 23. Gambar Alat Spektrofotometer Serapan Atom (AAS) Dan