24
pembes”r”n 400x. P”r”meter y”ng dinil”i y”itu hiperpl”si” tunik” intim” d”n ”terosis ”rteri spir”lis. Peneliti mel”kuk”n pengukur”n hiperpl”si” tunik” intim” d”n ”terosis
”rteri spir”lis d”ri seti”p prep”r”t blok p”r” n.
2.9. Cara Pembuatan Preparat dan Pemeriksaan Secara Miroskopis Sediaan Uutuk Pemeriksaan Histologi.
J”ring”n ”t”u org”n y”ng diterim” h”rus d”l”m ke”d””n ter ks”si deng”n
form”lin buffer 10 perb”nding”n j”ring”n d”n c”ir”n ks”si, 1:9 d”n ditutup r”p”t.
A. Buffer formalin 10
1. Form”ldehid 40 H.CHO = 100 ml 2. Sodium Phosp”t monob”sic N”H2PO4.H2O = 4 gr”m
3. Sodium Phop”t dib”sic N”2HPO4 = 6.5 gr”m 4. Aqu”dest = 900 ml
B. Pemeriks””n M”kroskopis
Pemeriks””n m”kroskopis dil”kuk”n oleh dokter tug”s ”n”lis keseh”t”nteknisi l”bor”torium mend”mpingi dokter, mel”kuk”n penc”t”t”n h”sil pemeriks””n
dokter. P”d” t”h”p ini dokter jug” ”k”n memotong j”ring”n y”ng dicurig”i
C. Prosessing J”ring”n
Untuk prosessing j”ring”n mem”k”i ”l”t tissue prosessor automatic y”ng bekerj” ± 18,5 j”m bis” diub”h sesu”i kebutuh”n. T”h”p”n prosessing j”ring”n
y”itu, ks”si, dehidr”si, clearing, d”n in ltr”si p”r” n. T”h”p”n kerj” p”d” Tissue Automatics Prosessor
1. Fiks”si:Botol 1. Buffer Formalin 10 2 j”m
2. Dehidr”si : Botol 2. Alkohol 70 1,5 j”m
Botol 3. Alkohol 80 1,5 j”m
25
Botol 4. Alkohol 95 1,5 j”m Botol 5. Alkohol ”bsolute I 1,5 j”m
Botol 6. Alkohol ”bsolute II 1,5 j”m Botol 7. Alkohol ”bsolute III 1,5 j”m
3. Clearing : Botol 8. Xylol I 1 J”m
Botol 9. Xylol II 1,5 J”m Botol 10. Xylol III 1,5 J”m
4. In ltr”si p”r” n : Botol 11. P”r”f n c”ir I 1,5 j”m
Botol 12. P”r”f n c”ir II 2 j”m
➔ Juml”h 18,5 j”m
D.Pengeblokk”n
Cara Kerja : 1. H”ng”tk”n p”r” n c”ir, pinset, d”n penutup cet”k”n
2. P”r” n c”ir ditu”ngk”n ked”l”m cet”k”n
3. J”ring”n d”ri prosessing dim”suk”n ked”l”m cet”k”n y”ng tel”h disi p”r” n
c”ir, tek”n j”ring”n ”g”r sem”kin menempel di d”s”r cet”k”n
4. Tutup cet”k”n di”mbil, let”kk”n di”t”s cet”k”n d”n di tek”n. P”s”ng etiket di
pinggir
5. Bi”rk”n s”mp”i membeku
6. Setel”h beku, kelu”rk”n d”ri cet”k”n. R”pik”n sisi-sisi blok. G”nti etiket
deng”n y”ng perm”nen
E. Pemotong”n deng”n Mikrotom
1. Sebelum pemotong”n M”suk”n ked”l”m pl”stik y”ng diisi ”ir d”n let”kk”n
26
di freezer ±15 menit ”t”u diberi b”tu es
2. Blok dijepit p”d” mikrotom kemudi”n dipotong deng”n pis”u mikrotom.
Kemiring”n : ± 30 , Teb”l blok p”r” n ± 2-5 mikron
3. H”sil pemotong”n berup” pit”iris”n tipis y”ng s”ling bers”mbung
dim”sukk”n ked”l”m waterbath y”ng diisi ”ir y”ng sud”h dih”ng”tk”n 50 C,
kemudi”n di”mbil deng”n k”c” objek Melet”kk”n potong”n di waterbath tid”k boleh terb”lik
F. Inkub”si
Tuju”n : Mengu”pk”n ”ir y”ng terb”w” oleh h”sil potong”n hingg” j”ring”n
menempel lebih ku”t
C”r” kerj” : inkub”si prep”r”t di ”t”s hot plate deng”n suhu±50 C dib”w”h titik
c”ir p”r”fin sel”m” 15 menit
Seb”ikny” di”l”si deng”n kert”s mer”ng Untuk pengec”t”n imunnohistokim” inkub”si 39
C sel”m” 1 m”l”m
G. Pengec”t”n
Umumny” d”l”m
pengec”t”n histop”tologi
digun”k”n pew”rn””n
Hematoxylin-Eosin HE dis”mping c”t khusus PAS, gomori, ZN, M”lory, dll d”n c”t y”ng lebih khusus y”itu immunohistokimi” ER, PR, CD20, LMP, dll
H. Proses pengec”t”n
1. Dep”r” nis”si
Prep”r”t m”suk ke Xylol I, II, d”n III m”sing-m”sing 3 menit, setel”h itu dil”p pinggir j”ring”n deng”n k”in k”s”
2. Rehidr”si
Prep”r”t m”suk ke ”lkohol 100, 95, 80, 70 m”sing-m”sing 2 menit
27
3. Prep”r”t m”suk ke ”ir meng”lir 3 menit
”ir meng”li dit”mpung d”l”m w”d”h Sebelumny” celup ked”l”m du” m”ngkok ”ir 3 celup
4. Pengec”t”n Inti 7 menit
Prep”r”t m”suk ke d”l”m Meyer hematoxylin
5. Prep”r”t m”suk ke ”ir meng”lir 3 menit
”ir meng”li dit”mpung d”l”m w”d”h Sebelumny” celup ked”l”m du” m”ngkok ”ir 3 celup
6. Counter Stain
Prep”r”t m”suk ke l”rut”n Eosin 7 celup
7. Prep”r”t M”suk ke ”ir w”d”h I, II, d”n III 3 celup
8. Dehidr”si
Prep”r”t m”suk ke d”l”m ”lkohol 70 , 80, 95,100 3 celup, setel”h itu Dil”p deng”n k”in k”s” sekit”r j”ring”n d”n tunggu s”mp”i kering
9. Clearing
Prep”r”t m”suk Ke Xylol I, d”n II m”sing-m”sing 2 menit
10. Mounting
11. Prep”r”t diberi 1 tetes entel”n d”n ditutup objek gl”ss
28
2.10. Kerangka Teori
