pengaruh pemberian L-Arginin terhadap kerusakan endotel arteri spiralis pada mencit model preeklampsia.

1 BAB I

PENDAHULUAN 1.1.Latar belakang

Preekl”mpsi” (PE) merup”k”n su”tu sindrom” klinis y”ng dide nisik”n seb”g”i su”tu onset b”ru d”ri hipertensi d”n proteinuri” sel”m” w”ktu p”ruh kedu” keh”mil”n (Powe et al, 2011). PE jug” bi”s di”rtik”n seb”g”i kondisi spesi k h”ny” p”d” keh”mil”n y”ng meningk”tk”n mort”lit”s d”n morbidit”s p”d” m”tern”l d”n fet”l. Di”gnosis PE diteg”kk”n p”d” tek”n”n d”r”h deng”n cut-off 140/90 mmHg d”n h”rus ”d” proteinuri” (Sh”msiet al, 2013). Ghulmiyy”h d”n Sib”i (2012) menyebutk”n b”hw” PE merup”k”n sindrom klinis deng”n k”r”kteristik onset b”ru d”ri hipertensi d”n proteinuri” setel”h 20 minggu usi” gest”si p”d” w”nit” y”ng sebelumny” normotensi.

Preekl”mpsi” s””t ini m”sih memberik”n morbidit”s d”n mort”lit”s m”tern”l m”upun perin”t”l terut”m” di neg”r” berkemb”ng. Prev”lensi kej”di”n preekl”mpsi” sekit”r 5% - 15% d”ri keseluruh”n keh”mil”n di duni”, dim”n” k”sus hipertensi d”l”m keh”mil”n term”suk preekl”mpsi” ditemuk”n d”l”m juml”h y”ng cenderung meningk”t d”n merup”k”n komplik”si medis tersering d”l”m keh”mil”n. Sekit”r 70% w”nit” y”ng didi”gnosis hipertensi d”l”m keh”mil”n merup”k”n k”sus preekl”mpsi” (Lei et ”l,2014). Komplik”si preekl”mpsi” menyeb”bk”n sekit”r 50.000 kem”ti”n m”tern”l ti”p t”hun. Di neg”r” berkemb”ng dim”n” keterb”t”s”n ”kses untuk mend”p”tk”n pen”ng”n”n keseh”t”n m”tern”l y”ng mem”d”i, ”ngk” kem”ti”n m”tern”l d”p”t menc”p”i 15% jik” dib”ndingk”n deng”n neg”r” m”ju y”ng sekit”r 0 - 1,8% (St”ff et ”l, 2013). Di Indonesi” 30 – 40% k”sus preekl”mpsi” menj”di penyeb”b kem”ti”n ibu h”mil d”n 30 – 50% menj”di penyeb”b kem”ti”n perin”t”l. Di RSUD Dr. Moew”rdi Sur”k”rt” kem”ti”n ibu h”mil y”ng diseb”bk”n oleh preekl”mpsi” y”itu 67,6% d”ri 37 k”sus preekl”mpsi” d”ri 1956 pers”lin”n p”d” t”hun 2008 (Sulistyow”ti et ”l, 2010).

Preekl”mpsi” sendiri menurut Cunningh”m et al (2014) p”ling b”ik dideskripsik”n seb”g”i sindrom” spesi k keh”mil”n y”ng d”p”t mempeng”ruhi semu” sistem org”n. H”l ini membu”t preekl”mpsi” merup”k”n h”l y”ng serius d”n komplik”siny” sering kur”ng dip”h”mi sehingg” bi”s”ny” ”k”n berkemb”ng menj”di

2

ekl”mpsi” ”t”u kem”ti”n m”tern”l, h”l inil”h y”ng menj”di penyeb”b penting mort”lit”s m”tern”l khususny” di neg”r” berkemb”ng (Sh”msiet al, 2013). Terd”p”t b”ny”k komplik”si y”ng d”p”t ditimbulk”n d”ri preekl”mpsi”, meliputi ekl”mpsi”, hemolytic- elevated liver enzim and low platelet (HELLPsyndrome), Disseminated Intra Coagulant (DIC), hipertensi emergensi, hipertensi ensef”lop”ti d”n kebut””n d”er”h kortik”l serebri (Cre”sy,2014). Sekit”r 3% hingg” 5% PE ”k”n ber”khir p”d” mort”lit”s m”tern”l (Powe

et al, 2011).

S”mp”i s””t ini etiologi p”sti d”ri Preekl”mpsi” belum diket”hui d”n k”ren”ny” disebut seb”g”i dise”se of theory . Beber”p” teori mengen”i penyeb”b d”ri preekl”mpsi” ”nt”r” l”in: 1. teori m”l”d”pt”si imun, 2. teori in ”m”si, 3. disfungsi endotel, 4. stress oksid”tif, d”n 5. sistem renin–”ngiotensin (Sh”h 2007). Konsep b”hw” kontributor ut”m” penyeb”b preekl”mpsi” ”d”l”h pl”sent”, hingg” s””t ini b”ny”k diterim” d”n tel”h terbukti di seb”gi”n peneliti”n. P”r” ”hli berpend”p”t preekl”mpsi” terj”di d”l”m du” t”h”p. T”h”p pert”m” bersif”t ”simtom”tik deng”n k”r”kteristik perkemb”ng”n ”bnorm”l pl”sent” p”d” trimester pert”m”. Perkemb”ng”n ”bnorm”l pl”sent” terut”m” proses ”ngiogenesis meng”kib”tk”n insu siensi pl”sent” d”n terlep”sny” m”teri”l pl”sent” mem”suki sirkul”si m”tern”l. P”d” proses endoteli”lis”si terj”di g”nggu”n sitotrofobl”s sert” inv”si ”rteri spir”lis p”d” miometrium y”ng tid”k ”deku”t. Proses pl”sent”si y”ng jelek ini menyeb”bk”n terj”diny” iskemi” d”n hipoksi” p”d” pl”sent”. Terlep”sny” m”teri”l pl”sent” memicu g”mb”r”n klinis t”h”p kedu” y”itu t”h”p simtom”tik. P”d” t”h”p ini berkemb”ng gej”l” hipertensi, g”nggu”n ginj”l d”n proteinuri”, d”n kerus”k”n end organ l”inny”. Sehingg” ”d”ny” g”nggu”n histologi, fungsi, d”n met”bolisme pl”sent” didug” s”ng”t bes”r per”n”nny” p”d” p”to siologi preekl”mpsi”. (Prib”di Adhi et ”l, 2015; Roberts J ”nd Hubel, 2009).

P”d” keh”mil”n norm”l terj”di inv”si trofobl”s p”d” pembuluh d”r”h di b”gi”n desidu”. Inv”si trofobl”s gelomb”ng pert”m” ini terj”di p”d” usi” keh”mil”n 10–16 minggu. P”d” usi” keh”mil”n 22 minggu terj”di inv”si trofobl”s gelomb”ng kedu”, di m”n” sel-sel trofobl”s mem”suki ”rteri spir”lis di l”pis”n desidu” s”mp”i ke l”pis”n miometrium. L”pis”n otot dinding pembuluh d”r”h tersebut dig”ntik”n oleh j”ring”n

3

el”stis, sehingg” pembuluh d”r”h berdil”t”si menc”p”i 30 k”li d”ri sebelum h”mil. Ke”d””n inil”h y”ng menyeb”bk”n terj”diny” perub”h”n siologis. P”d” preekl”mpsi” inv”si trofobl”s gelomb”ng kedu” tid”k sempurn” ”t”u g”g”l terj”di. Deng”n demiki”n l”pis”n otot tunik” medi” pembuluh d”r”h tet”p seb”g”im”n” bi”s” sehingg” ”rteri spir”lis tid”k berdil”t”si d”n memungkink”n terj”diny” v”sokonstriksi. P”d” ke”d””n ini perub”h”n siologis tid”k terj”di. Akib”t keg”g”l”n inv”si trofobl”s ini ”k”n terj”di perub”h”n p”d” ”rteri spir”lis sehingg” terj”di penurun”n ”lir”n d”r”h uteropl”sent”, d”n terj”di hiperpl”si” tunik” intim” d”n proses ”terosis. P”d” h”sil peneliti”n

did”p”tk”n h”sil p”d” hiperpl”si” tunik” intim” p”d” kelompok

Preekl”mpsi”/Ekl”mpsi” 20 k”sus d”n kelompok normotensif tid”k dijump”i, ”terosis ”kut p”d” Preekl”mpsi”/Ekl”mpsi” 18 k”sus d”n kelompok normotensif tid”k dijump”i ( Lukito, 2007 ).

S”l”h s”tu teori mengen”i ”d”ny” ketid”kseimb”ng”n ”nt”r” produksi r”dik”l beb”s d”n sistem pert”h”n”n ”ntioksid”n ”kib”t iskemi” pl”sent”, menyeb”bk”n terj”diny” stres oksid”tif. Proses peroksid”si lipid di”ngg”p memiliki per”n”n penting did”l”mny”. Ide”lny” sel”m” keh”mil”n norm”l, peningk”t”n produksi r”dik”l beb”s keseimb”ng”nny” sel”lu dij”g” mel”lui produksi ”ntioksid”n y”ng cukup, n”mun p”d” preekl”mpsi” terj”di peningk”t”n produksi r”dik”l beb”s berlebih”n d”n penurun”n k”d”r ”ntioksid”n sehingg” menyeb”bk”n su”tu ke”d””n stres oksid”tif (Gede, 2013).

P”d” beber”p” peneliti”n terb”ru stress oksid”tif ”t”u ketid”kseimb”ng”n oksid”n d”n ”ntioksid”n p”d” j”ring”n uteropl”sent” memeg”ng per”n penting d”l”m berb”g”i peny”kit term”suk preekl”mpsi”. R”dik”l beb”s ”d”l”h seti”p unsur y”ng mempuny”i s”tu ”t”u lebih elektron y”ng tid”k berp”s”ng”n di orbit y”ng p”ling lu”r. R”dik”l beb”s mempuny”i sif”t s”ng”t re”ktif d”n d”p”t mengub”h molekul menj”di r”dik”l. R”dik”l beb”s merup”k”n su”tu bentuk”n y”ng dih”silk”n oleh pern”f”s”n sec”r” ”erob d”n re”ksi met”bolik y”ng l”in. Oksigen p”ling b”ny”k digun”k”n sel”m” proses oksid”si d”n dikonversi menj”di ”ir, tet”pi 1-2% ”k”n menj”di oksigen re”ktif terut”m” superoxide (O2-), hidroksil (OH-) d”n hidroperoksil (H2O2). Met”bolit ”nion ini s”ng”tl”h re”ktif d”n membutuhk”n ”ntioksid”n untuk menetr”lisirny”. S”l”h s”tu

4

r”dik”l beb”s penting y”ng dih”silk”n p”d” preekl”mpsi” d”n ”bortus ”d”l”h r”dik”l beb”s ”nion superoksid”(O2-). R”dik”l beb”s ini ”k”n merus”k membr”ne sel y”ng b”ny”k meng”ndung ”s”m lem”k tid”k jenuh menj”di peroksid” lem”k. Peroksid” lem”k seb”g”i r”dik”l beb”s y”ng s”ng”t toksik bered”r di seluruh tubuh, d”n ”k”n merus”k membr”n sel endotel. Oleh seb”b itu diperluk”n ”ntioksid”n untuk menetr”lisisr r”dik”l beb”s (Su”rd”n”, 2012).

Meskipun p”to siologi y”ng tep”t d”ri preekl”mpsi” m”sih belum diket”hui, jel”s b”hw” ”d” pl”sent”si ”bnorm”l d”n c”c”t inv”si trofobl”s meng”kib”tk”n unit uteropl”sent” ber”d” di b”w”h perfusi. H”l ini p”d” gilir”nny” berhubung”n deng”n kerus”k”n endotel d”n produksi f”ktor v”so”ktif, y”ng mempromosik”n v”sokonstriksi. Seb”g”i t”ngg”p”n, oksid” nitr”t disintesis d”ri ”s”m ”mino L-Arginine, oleh kelu”rg” enzim sint”se oksid” nitr”t, y”ng terg”ntung k”lsium( Dorni”ck w”ll,2013 ).

L-Arginine tel”h disebutk”n b”hw” mempuny”i per”n j”lur L-Arginine-nitric oxide

d”l”m preekl”mpsi”. Sejuml”h peneliti”n menunjukk”n b”hw” produksi Nitric Oxide meningk”t p”d” keh”mil”n norm”l. P”d” tikus, k”d”r cGMP (sebu”h second messenger NO) pl”sm” d”n urin sert” k”d”r nitrit/nitr”t urin, met”bolit NO, indik”tor produksi NO di tubuh, ”k”n meningk”t sel”m” keh”mil”n. Sel”in itu, ekspresi protein ren”l (iNO d”n nNOS) m”sing-m”sing ”k”n meningk”t 31% d”n 25%, p”d” tikus di perteng”h”n gest”si. Sejuml”h peneliti”n tel”h menunjukk”n b”hw” NO mem”ink”n per”n penting d”l”m memper”nt”r”i hemodin”mik sistemik d”n v”sodil”t”si ren”l sel”m” keh”mil”n. G”nggu”n respon dependen endotel tel”h dil”pork”n p”d” pembuluh d”r”h y”ng diisol”si d”ri w”nit” deng”n preekl”mpsi”. H”l ini men”nd”k”n b”hw” g”nggu”n produksi NO endotel d”p”t mem”ink”n per”n penting d”l”m memper”nt”r”i p”to siologi preekl”mpsi”. Beber”p” peneliti”n tel”h menunjukk”n b”hw” inhibisi produksi NO oleh inhibitor spesi k untuk NOS sel”m” keh”mil”n p”d” tikus ”k”n meng”kib”tk”n peningk”tk”n tek”n”n ”rteri”l y”ng ny”t”, penurun”n GFR, proteinuri”, IUGR, d”n perl”mb”t”n peningk”t”n v”sodil”t”si ren”l p”d” perteng”h”n gest”si. Terlebih l”gi, efek-efek y”ng diper”nt”r”i oleh blok”de NO ini bersif”t reversibel mel”lui pemberi”n L-Arginine. Sel”in itu, p”d” preekl”mpsi” tel”h diket”hui ”d”ny” penurun”n bio”v”il”bilit”s nitrit oksid”, kemungkin”n di”kib”tk”n d”ri ”kumul”si ADMA, sebu”h

5

inhibitor endogen eNOS, ”kib”t peningk”t”n ”ktivit”s ”rgin”se endotel, sebu”h de siensi p”d” substr”t L-Arginine; sebu”h de siensi p”d” kof”ktor y”ng dibutuhk”n untuk ”ktivit”s NOS d”n terh”d”p peningk”t”n stres oksid”tif bert”nggung j”w”b d”l”m degr”d”si nitrit oksid” y”ng cep”t ”kib”t re”ktivit”sny” y”ng tinggi deng”n O2- untuk membentuk peroksinitrit. Efekny”, beber”p” lini terbukti tel”h menemuk”n sebu”h per”n peningk”t”n stres oksid”tif p”d” preekl”mpsi”, penurun”n ekspresi enzim ”ntioksid”n d”n peningk”t”n m”rker stres oksid”tif, term”suk peningk”t”n k”rbonil protein d”n peroksid”si lipid, tel”h dil”pork”n sehubung”n deng”n pl”sent” m”nusi” begitu jug” leukosit m”tern”l, v”skul”tur d”n pl”sm”. Seb”g”i h”silny”, t”mp”k ”d” penurun”n k”p”sit”s protektif ”ntioksid”n tot”l p”d” w”nit” deng”n Preekl”mpsi” (C”m”cho Els” et ”l, 2015).

L-Arginine menurunk”n ”ngk” kej”di”n preekl”mpsi”, d”n frekuensi preekl”mpsi” p”d” kelompok ini sebes”r 14.5%. Penurun”n risiko p”d” kelompok

L-Arginine diestim”si sebes”r 26%, deng”n e k”si sebes”r 74%. L-Arginine menurunk”n ”ngk” kej”di”n preekl”mpsi” ber”t sec”r” signi k”n. Penemu”n ini konsisten deng”n l”por”n d”ri V”dillo et ”l. P”d” peneliti”n V”dillo, efek s”mping seperti s”kit kep”l”, p”lpit”si, d”n dizziness dil”pork”n, tet”pi peneliti”n ini tid”k ditemuk”n ”d”ny” efek s”mping seperti itu. Peneliti”n terb”ru menyebutk”n b”hw” L-Arginine menurunk”n tek”n”n d”r”h sistolik, di”stolik, d”n MAP. B”hk”n p”sien deng”n hipertensi kronis d”p”t menurunk”n dosis ob”t ”ntihipertensi merek”. H”sil ini serup” deng”n h”sil y”ng dil”pork”n oleh F”cchinetti dkk. P”d” studi ini, penurun”n ”ngk” kej”di”n preekl”mpsi” ber”t mengh”silk”n peningk”t”n usi” keh”mil”n d”n outcome perin”t”l y”ng b”ik (Adhi,2006)

Peneliti”n deng”n menggun”k”n s”mpel uterus m”nusi” p”d” s””t keh”mil”n trimester I tid”k d”p”t dil”kuk”n dik”ren”k”n m”s”l”h etik. Peneliti menggun”k”n hew”n cob” y”itu mencit (Mus musculus) d”l”m peneliti”n ini k”ren” mempuny”i kem”mpu”n ber”d”pt”si hidup y”ng b”ik d”l”m lingkung”n l”bor”torium d”n sec”r” genetik mempuny”i kemirip”n deng”n m”nusi” sehingg” dih”r”pk”n d”p”t digun”k”n seb”g”i pemb”nding preekl”mpsi” p”d” m”nusi”.

6 1.2. Masalah Penelitian

Ap”k”h ”d” peng”ruh L-Arginine terh”d”p perb”ik”n kerus”k””n endotel ”rteri spir”lis y”itu menurunny” keteb”l”n tunik” intim” ”rteri spir”lis d”n meningk”tny” di”meter ”rteri spir”lis p”d” mencit model preekl”mpsi” ?

1.3.Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

Menc”ri keben”r”n perbed””n g”mb”r”n histolop”tologi ”rteri spir”lis p”d” uterus mencit norm”l, mencit model preekl”mpsi”, d”n mencit model preekl”mpsi” setel”h diberik”n L-Arginine.

1.3.2 Tujuan Khusus

Menget”hui fungsi L-Arginine seb”g”i ter”pi preekl”mpsi”, terut”m” menurunny” keteb”l”n tunik” intim” ”rteri spir”lis d”n meningk”tny” di”meter ”rteri spir”lis.

1.4. Manfaat Penelitian

H”sil peneliti”n ini dih”r”pk”n d”p”t memberik”n m”nf””t untuk: 1. Keilmu”n

”. H”sil peneliti”n ini dih”r”pk”n m”mpu men”mb”h inform”si tent”ng ter”pi

L-Arginine p”d” k”sus preekl”mpsi” terut”m” kerus”k”n ”rteri spir”lis uterus berup” meningk”tny” keteb”l”n tunik” intim” d”n menurunny” di”meter ”rteri spir”lis.

b. H”sil peneliti”n ini dih”r”pk”n m”mpu memberik”n m”suk”n d”n pertimb”ng”n d”l”m pemeriks””n histop”tologi setel”h menget”hui efek pengob”t”n L-Arginine

p”d” k”sus preekl”mpsi” gun” menurunk”n ”ngk” morbidit”s d”n mort”lit”s b”ik m”tern”l m”upun perin”t”l.

7

2. Pel”y”n”n

Menj”di b”h”n pertimb”ng”n d”l”m pengelol””n k”sus preekl”mpsi” di l”p”ng”n d”n pemeriks””n klinis terk”it kerus”k”n ”rteri spir”lis p”d” uterus ”kib”t preekl”mpsi”.

3. Peneliti”n

Memberik”n sumb”ng”n penget”hu”n tent”ng efek L-Arginine p”d” ”rteri spir”lis uterus hew”n uji model preekl”mpsi” sehingg” d”p”t menj”di d”s”r peneliti”n sebelumny”.

4. Kedokter”n Kelu”rg”

Deng”n menget”hui ”d”ny” perbed””n g”mb”r”n histop”tologi setel”h pemberi”n

L-Arginine p”d” mencit bunting model preekl”mpsi”, dih”r”pk”n d”p”t digun”k”n seb”g”i model ”cu”n p”d” m”nusi” sehingg” bis” dikemb”ngk”n us”h”-us”h” preventif d”n kur”tif p”d” k”sus preekl”mpsi” p”d” m”nusi” sec”r” lebih dini.

1.5. Originalitas Penelitian

T”ble.1 Origin”lit”s Peneliti”n N

O ( T”hun )Peneliti Judul V”ri”bel H”sil

1 Rop”ck” et ”l

( 2007 ) L-ArginineThe effect of on fet”l outcome in IUGR

L-Arginine, fet”l

outcomes

L-Arginine

berpeng”ruh terh”d”p

8

fetuses percep”t”n

pertumbuh” n j”nin,

memiliki

APGAR skor y”ng b”ik

2 Dorni”ck-w”ll

et ”l ( 2014 ) L-ArginineThe role of in the prevention ”nd

tre”tment of

pre-ecl”mpsi” : ” system”tic review

of r”ndomized tri”ls

L-Arginine,

preekl”mpsi” mengur”ngi L-Arginine preekl”mpsi

” p”d”

w”nit” y”ng memiliki

resiko

terj”diny” preekl”mpsi

”

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Preeklampsia

9 2.1.1. Definisi

Preekl”mpsi” (PE) merup”k”n su”tu sindrom” klinis y”ng dide nisik”n seb”g”i su”tu onset b”ru d”ri hipertensi d”n proteinuri” sel”m” w”ktu p”ruh kedu” keh”mil”n (Poweet al, 2011). PE jug” bis” di”rtik”n seb”g”i kondisi spesi k h”ny” p”d” keh”mil”n y”ng meningk”tk”n mort”lit”s d”n morbidit”s p”d” m”tern”l d”n fet”l. Di”gnosis PE diteg”kk”n p”d” tek”n”n d”r”h deng”n cut-off 140/90 d”n h”rus ”d” proteinuri” (Sh”msi et al, 2013). Ghulmiyy”h d”n Sib”i (2012) menyebutk”n b”hw” PE merup”k”n sindrom klinis deng”n k”r”kteristik onset b”ru d”ri hipertensi d”n proteinuri” setel”h 20 minggu usi” gest”si p”d” w”nit” y”ng sebelumny” normotensi.

Sindrom ini berhubung”n deng”n ”d”ny” penurun”n perfusi uteropl”sent”, peningk”t”n kem”ti”n sel trofobl”s d”n ”ktiv”si sel endotel m”tern”l d”n jug” s”l”h s”tu indik”si m”yor dil”kuk”nny” oper”si ces”r elektif. Preekl”mpsi” dik”r”kteristik”n deng”n ”d”ny” oliguri”, xanthin oxidase, ”s”m si”lik, ”sp”rt”t tr”ns”min”se, kre”tinin, ”s”m ur”t, l”kt”t dehidrogen”se, d”n edem” lok”l (Ek”mb”r”n, 2011).

Di”gnosis preekl”mpsi” merup”k”n di”gnosis klinis.Seb”g”im”n” dide nisik”n oleh American College of Obstetrics and Gynecology, di”gnosis preekl”pmsi” diteg”kk”n deng”n ”d”ny” tek”n”n d”r”h >140/90 mmHg p”d” 2 k”li pemeriks””n y”ng dikombin”sik”n deng”n ”d”ny” proteinuri” >300 mg per h”ri (Powe et al, 2011). Kondisi preekl”mpsi” ber”t ditentuk”n jik” ditemuk”n s”l”h s”tu kriteri” seb”g”i berikut: tek”n”n d”r”h > 160/110 mmHg p”d” du” k”li pemeriks””n d”l”m w”ktu 6 j”m, proteinuri” > 5 gr”m d”l”m 24 j”m ”t”u +3 d”l”m pemeriks””n dipstick du” spesimen urin d”l”m 4 j”m, oliguri” (urin < 500 mL d”l”m 24 j”m) (Ek”mb”r”n, 2011).

Komplik”si m”tern”l ”kut preekl”mpsi” ”nt”r” l”in ekl”mpsi”, stroke, solusio pl”sent”, Disseminated Intravascular Coagulation (DIC), ruptur h”ti d”n perd”r”h”n, edem” p”ru, g”g”l ginj”l ”kut, d”n kem”ti”n. Sed”ngk”n komplik”si m”tern”l kronis preekl”mpsi” ”nt”r” l”in hipertensi kronis, di”betes mellitus, peny”kit j”ntung coroner d”n de sit neurologis. Komplik”si perin”t”l ”nt”r” l”in still birth, prem”turit”s, petumbuh”n j”nin terh”mb”t, komplik”si neon”t”l d”n sekuelny” terut”m” terk”it prem”turit”s. Subkl”si k”si preekl”mpsi” d”p”t jug” berd”s”rk”n der”j”t ber”tny” k”r”kteristik m”tern”l d”n fet”l. Sindrom” preekl”mpsi” melu”s tid”k h”ny” timbulny”

10

hipertensi disert”i timbulny” proteinuri”, tet”pi keterlib”t”n m”tern”l d”n fet”l seperti insu siensi ren”l, disfungsi hep”toseluler ”t”upun pertumbuh”n j”nin terh”mb”t. De nisi preekl”mpsi” d”p”t digun”k”n d”l”m pr”ktik klinis dim”n” penil”i”n klinis penting d”l”m pen”t”l”ks”n””n, ”t”upun jug” d”l”m peneliti”n dim”n” kriteri” objektif terg”ntung peneliti. D”l”m peneliti”n ini tid”k digun”k”n de nisi kl”sik preekl”mpsi” (St”ff et ”l, 2013).

F”ktor risiko terj”diny” preekl”mpsi” ”nt”r” l”in nulip”r” (multip”r” deng”n p”s”ng”n b”ru mempuny”i risiko y”ng s”m” seperi nulip”r”), hipertensi kronis, di”betes mellitus, peny”kit ginj”l, obesit”s, kondisi hiperko”gulit”s (mis”lny” sindrom” ”nti fosfolipid), usi” tu” m”tern”l d”n kondisi y”ng menyeb”bk”n bert”mb”hny” m”ss” pl”sent” (mis”lny” keh”mil”n multifetus d”n mol” hid”tidos”). Riw”y”t preekl”mpsi” p”d” keh”mil”n sebelumny” meningk”tk”n risiko berul”ngny” preekl”mpsi”. P”d” keb”ny”k”n k”sus tid”k ditemuk”n riw”y”t kelu”rg”, ”k”n tet”pi riw”y”t kelu”rg” der”j”t pert”m” meningk”tk”n 2 s”mp”i 4 k”li lip”t risiko terj”diny” preekl”mpsi” (W”ng et ”l, 2009).

Peneliti”n epidemiologi mend”p”tk”n 20% perempu”n deng”n riw”y”t preekl”mpsi” berkemb”ng menj”di hipertensi ”t”u terd”p”t mikro”lbuminuri” hingg” 7 t”hun setel”hny” dib”ndingk”n h”ny” 2% p”d” perempu”n t”np” riw”y”t preekl”mpsi”. Risiko j”ngk” p”nj”ng terh”d”p peny”kit k”rdiov”skul”r d”n serebrov”skul”r meningk”t du” k”li lip”t p”d” preekl”mpsi” d”n hipertensi gest”sion”l. Preekl”mpsi” ber”t, rekurensi preekl”mpsi”, preekl”mpsi” disert”i pers”lin”n preterm, d”n preekl”mpsi” disert”i pertumbuh”n j”nin terh”mb”t mempuny”i hubung”n ku”t terj”diny” peny”kit k”rdiov”skul”r di kemudi”n h”ri. Preekl”mpsi” d”n peny”kit k”rdiov”skul”r mempuny”i f”ktor risiko y”ng s”m” ”nt”r” l”in hipertensi kronis, di”betes, obesit”s, peny”kit ginj”l, d”n sindrom” met”bolik. Peneliti”n l”inny” menunjukk”n preekl”mpsi” seb”g”i f”ktor risiko peny”kit g”g”l ginj”l (end stage renal disease) di kemudi”n h”ri (W”ng et ”l, 2009).

Ad”pun m”nifest”si klinis preekl”mpsi” y”itu endoteliosis glomerul”r, peningk”t”n preme”bilit”s v”skuler d”n respon in ”m”si sistemik y”ng meng”kib”tk”n kerus”k”n org”n d”n hipoperfusi. H”l tersebut ”k”n menyeb”k”n terj”diny” proteinuri”,

11

hipertensi, edem” serebri, HELLP, d”n IUGR ( Intr” Uterine Growth Restriction ) (Perkin,2011). Bi”s”ny” sindrom ini terut”m” muncul p”d” ”khir trimester kedu” s”mp”i ketig” keh”mil”n. Gej”l” ”k”n berkur”ng ”t”u menghil”ng setel”h mel”hirk”n, sehingg” ter”pi de nitifny” ”d”l”h meng”khiri keh”mil”n (Cunningh”m et al, 2014).

2.1.2. Patogenesis

Preekl”mpsi” merup”k”n sindrom” sistemik p”d” keh”mil”n y”ng ber”s”l d”ri pl”sent”. Diy”kini inv”si sitotrofobl”s pl”sent” y”ng in”deku”t d”n diikuti deng”n disfungsi endotel m”tern”l menj”di penyeb”bny”. Peneliti”n sebelumny” menunjukk”n b”hw” ”d”ny” f”ktor ”nti”ngiogenik seperti soluble fins-like tyrosine kinase 1 (sFlt1) d”n jug” soluble endoglin (sEng) y”ng muncul di pl”sent” menj”di penyeb”b hipertensi, proteinuri” d”n m”nifest”si klinis l”in (Young et al, 2010). Bers”m””n deng”n itu f”ktor ”ngiogenik y”ng menurun jug” menj”di penyeb”b PE, f”ktor tersebut ”nt”r” l”in VEGF d”n PIGF. Sel”in f”ktor-f”ktor tersebut, f”ktor genetik, nulip”r”, riw”y”t PE, usi” ibu y”ng terl”lu tu” ”t”u terl”lu mud”, obesit”s, di”betes, hipertensi kronis, kel”in”n ginj”l sert” peny”kit ”utoimun jug” berper”n d”l”m kej”di”n PE (His”shi et al, 2012).

12

G”mb”r 1. B”g”n p”to siologi preekl”mpsi” (George d”n Gr”nger, 2010) Pl”cent”l

Ischemi”

↑ TNF-α

↑ AT1-AA HIF-1α

↑ Pl”cent”l ”nd m”tern”l

pl”sm” sFlt-1

↑ ROS ↓ Pl”sm” VEGF, ↑ sEng

PlGF

Endotheli”l dysfunction

↓NO ↑ ET-1

Hypertension

Preekl”mpsi” (PE) di”w”li deng”n inv”si trofobl”s y”ng d”ngk”l d”n keg”g”l”n remodeling ”rteriol spir”l. H”l ini ”k”n menginisi”si ke”d””n hipoksi” d”n mengh”mb”t ekspresi beberp” ”gen regul”tor hipoksi” (George d”n Gr”nger, 2010). Pl”sent” hipoksi” y”ng timbul p”d” ”w”l PE ini ”k”n berhubung”n deng”n sFlt-1. Ke”d””n

13

hipoksi” ini p”d” peneliti”n menggun”k”n tikus menunjukk”n ”d”ny” peningk”t”n k”d”r sFlt-1 serum d”n menyeb”bk”n ”d”ny” sindrom” menyerup”i PE (Gilbert et al , 2007).

Kel”in”n tersebut mungkin berk”it”n deng”n j”lur nitrit oksid”, y”ng memberik”n kontribusi subst”nsi”l untuk mengontrol tek”n”n v”skuler. Sel”in nitrit oksid”, ”d”ny” stres oksid”tif mem”cu pelep”s”n d”ri r”dik”l beb”s, lipidoksid”,sitokin d”n sFlt-1. H”l tersebut meng”kib”tk”n disfungsi endotel deng”n g”nggu”n perme”bilit”s v”skuler d”n peningk”t”n tek”n”n d”r”h (Ek”mb”r”n,2011).

Proses pl”sent”si p”d” m”m”li” membutuhk”n f”ktor ”ngiogenesis y”ng tinggi untuk mencukupi kebutuh”n oksigen d”n nutrisi j”nin. F”ktor pro”ngiogenik d”n ”nti”ngiogenik bekerj”s”m” d”l”m perkemb”ng”n pl”sent”. Diperc”y” b”hw” ”ngiogenesis pl”sent” p”d” preekl”mpsi” tid”k efektif. P”d” preekl”mpsi”, sitotrofobl”s g”g”l merub”h ik”t”n cell-surface d”n adhesion molecules. Perub”h”n y”ng ”bnorm”l d”ri sitotrofobl”s merup”k”n deteksi ”w”l y”ng ”k”n menyeb”bk”n iskemi” pl”sent” (H”gm”n,2012).

14

Keter”ng”n g”mb”r : merup”k”n g”mb”r”n perbed””n proses inv”si trofobl”s p”d” keh”mil”n norm”l d”n preekl”mpsi” (Powe et al, 2011).

Seperti y”ng disebutk”n sebelumny”, p”d” g”mb”r di ”t”s d”p”t dijel”sk”n b”hw” PE terj”di jug” k”ren” penurun”n fungi d”ri f”ktor ”ngiogenik seperti VEGF d”n ”n”logny” y”ng di h”silk”n pl”sent” y”itu PIGF. F”ktor-f”ktor tersebut s”ng”t penting p”d” proses embriogenik v”skulogenesis d”n ”ngiogenesis. P”d” g”mb”r di ”t”s jug” terlih”t ”d”ny” pl”sent”si norm”l, sitotrofobl”s inv”sif fetus ”k”n menginv”si ”rteri spir”lis m”tern”l, mengub”h v”s” d”r”h tersebut v”s” d”r”h resisten k”liber kecil menj”di v”s” k”p”sit”nsi k”liber bes”r y”ng m”mpu menj”min perfusi ”deku”t b”gi pertumbuh”n fetus. Sel”m” proses inv”si v”skuler, sitotrofobl”s berub”h d”ri fenotip epitel menj”di fenotip endotel, sebu”h proses y”ng merujuk p”d”

pseudo-v”skulogenesis ”t”u mimikri v”skuler. P”d” PE, terj”di keg”g”l”n sitotrofobl”s untuk meng”dopsi fenotip inv”sif endoteli”l. Seb”likny” inv”si terh”d”p ”rteri spir”lis d”ngk”l d”n v”s” d”r”h tet”p menj”di v”s” d”r”h y”ng resisten deng”n k”liber kecil (Powe et al, 2011).

2.2. Stres oksidatif pada kehamilan normal dan preeklampsia

D”l”m keh”mil”n terd”p”t du” fenomen” stress oksid”tif siologis. Pert”m”, p”d” ”khir trimester pert”m”, terj”di stress oksid”tif p”d” b”gi”n perifer pl”sent”. Sirkul”si uteropl”sent” di b”w”h ”re” ini tid”k pern”h tertutup oleh tudung trophobl”stik, memperbolehk”n ”lir”n d”r”h m”tern”l sec”r” terb”t”s mem”suki pl”sent” d”ri usi” keh”mil”n 8 hingg” 9 minggu. H”l ini menyeb”bk”n peningk”t”n konsentr”si oksigen lok”l p”d” su”tu t”h”p keh”mil”n dim”n” trophobl”s memiliki konsentr”si d”n ”ktivit”s ”ntioksid”n ut”m” seperti SOD, k”t”l”se d”n glutathione peroxidase y”ng rend”h. Kerus”k”n oksid”tif trophobl”stik ut”m” d”n degener”si villi sec”r” progresif memicu terbentukny” membr”ne fetus y”ng merup”k”n l”ngk”h perkemb”ng”n penting untuk terj”diny” kel”hir”n perv”gin”m (Su”rd”n”, 2012).

15

Y”ng kedu” melib”tk”n fenomen” ischemia-reperfusion(I/R). Studi ”ngiogr” terh”d”p pembuluh d”r”h uterus d”ri ker” rhesus menunjukk”n b”hw” p”d” keh”mil”n norm”l, ”lir”n d”ri ”rteri spir”lis ke intervillous space sering intermiten, ”kib”t kompresi ekstern”l ”rteri sel”m” kontr”ksi uterus p”d” m”nusi” d”n b”hk”n ”kib”t perub”h”n postur”l. Sehingg” stimulus I/R der”j”t tertentu merup”k”n g”mb”r”n norm”l p”d” keh”mil”n, terut”m” setel”h mendek”ti ”term, dim”n” fetus d”n pl”sent” mengelu”rk”n oksigen d”l”m juml”h b”ny”k d”ri intervillous space. Stimulus kronis ini menyeb”bk”n peningk”t”n perlindung”n r”dik”l beb”s p”d” pl”sent”, sehingg” menurunk”n stress oksid”tif. Seperti p”d” keh”mil”n mud”, stress oksid”tif y”ng terkontrol b”ik ”k”n berper”n d”l”m remodeling plasenta sec”r” terus menerus d”n pentiong untuk fungsi pl”sent” seperti tr”nsport d”n sintesis hormone. D”l”m konteks ini, ”bortus d”n preekl”mpsi” d”p”t merup”k”n ”kib”t m”l”d”pt”si sement”r” terh”d”p perub”h”n k”d”r oksigen (Su”rd”n”, 2012).

Preekl”mpsi” mempuny”i p”to siologi y”ng kompleks, penyeb”b ut”m”ny” y”itu ”d”ny” pl”sent”si y”ng ”bnorm”l. Inv”si y”ng tid”k efektif d”ri sel sitotrofobl”s p”d” ”rteri spir”lis preekl”mpsi” tel”h l”m” diteliti. Peneliti”n ter”khir menunjukk”n b”hw” inv”si sel sitotrofobl”s p”d” preekl”mpsi” terj”di kel”in”n. Kel”in”n tersebut mungkin berk”it”n deng”n j”lur nitrit oksid”, y”ng memberik”n kontribusi subst”nsi”l untuk mengontrol tek”n”n v”skuler. Sel”in nitrit oksid”, ”d”ny” stres oksid”tif mem”cu pelep”s”n d”ri r”dik”l beb”s, lipid oksid”, sitokin d”n sFlt-1. H”l tersebut meng”kib”tk”n disfungsi endotel deng”n hiperperme”bilit”s v”skuler, trombo li” d”n hipertensi (Li Zhihe et ”ll 2007, Siddiqui A, 2011).

S”l”h s”tu teori etiologi preekl”mpsi” y”ng s””t ini cukup b”ny”k di”nut ”d”l”h teori iskemi” pl”sent”, r”dik”l beb”s, d”n disfungsi endotel. Teori ini meng”t”k”n ”d”ny” ketid”kseimb”ng”n ”nt”r” produksi r”dik”l beb”s d”n sistem pert”h”n”n ”ntioksid”n ”kib”t iskemi” pl”sent”, sehingg” terj”di stres oksid”tif. Proses peroksid”si lipid di”ngg”p memiliki per”n”n penting did”l”mny”. Ide”lny” sel”m” keh”mil”n norm”l, peningk”t”n produksi r”dik”l beb”s keseimb”ng”nny” sel”lu dij”g” mel”lui produksi ”ntioksid”n y”ng cukup, n”mun p”d” preekl”mpsi” terj”di peningk”t”n produksi r”dik”l beb”s berlebih”n d”n penurun”n k”d”r

16

”ntioksid”n sehingg” menyeb”bk”n su”tu ke”d””n stres oksid”tif (Gede, 2013).

Hipotesis y”ng penting p”d” p”togenesis d”ri preekl”mpsi” ”d”l”h terd”p”tny” seny”w” y”ng dih”silk”n j”ring”n uteropl”sent” y”ng m”suk ke sirkul”si ibu d”n menyeb”bk”n kerus”k”n endotel. Perub”h”n fungsi endotel y”ng terj”di di”ngg”p seb”g”i penyeb”b ut”m” timbulny” gej”l” preekl”mpsi”: hipertensi, proteinuri” d”n ”ktiv”si sistem hemost”sis. Seny”w” y”ng dih”silk”n j”ring”n uteropl”sent” y”ng d”p”t merus”k endotel itu ”d”l”h h”sil met”bolisme lipid terut”m” y”itu peroksid”se lipid. Peroksid”se lipid ini diproduksi p”d” s””t r”dik”l beb”s menyer”ng ”s”m lem”k tid”k jenuh d”n kolesterol p”d” membr”n sel d”n lipoprotein. Peroksid”se lipid merup”k”n z”t toksik y”ng bis” menyeb”bk”n kerus”k”n sel b”ik sec”r” l”ngsung m”upun tid”k l”ngsung (Gede, 2013).

Ke”d””n hipoksi” y”ng terj”di d”p”t meningk”tk”n juml”h xantin dehidrogenase

y”ng terkonversi menj”di xantin oksigenase y”ng ”k”n mendegr”d”si purin, xantin d”n

hipoxantin menj”di ”s”m ur”t. D”l”m proses degr”d”si tersebut terbentuk jug” superoksid” y”ng merup”k”n su”tu r”dik”l beb”s y”ng poten. Terj”diny” re”ksi r”dik”l beb”s ini dit”nd”i deng”n meningk”tny” lipid peroksid” p”d” p”sien preekl”mpsi” dib”ndingk”n deng”n keh”mil”n norm”l. Re”ksi r”dik”l beb”s inil”h y”ng ”k”n menimbulk”n disfungi endotel, y”itu terj”di endoteolisis d”n perub”h”n ultr”strukturny” p”d” ”l”s pl”sent” d”n pembuluh d”r”h uterus, k”ren” r”dik”l beb”s ini bere”ksi deng”n membr”n sel sehingg” terbentuk lipid peroksid”se d”n ”ldehid” y”ng toksik sehingg” d”p”t mem”tik”n sel (Gede, 2013).

2.3. Histopatologi arteri spiralis uterus pada kehamilan normal dan preeklampsia

D”l”m keh”mil”n m”nusi”, re”ksi desidu” b”ru seles”i setel”h impl”nt”si bl”stokist”. N”mun,perub”h”n pr”desidu” terj”di lebih d”hulu s””t f”se midlute”l d”l”m sel strom” endometrium y”ng terlet”k di dek”t ”rteriol” d”n ”rteri spir”lis. Seb”g”i ”kib”t impl”nt”si, ”lir”n d”r”h ke desidu” k”psul”ris ”k”n menghil”ng seiring berkemb”ngny” embrio- j”nin. Alir”n d”r”h ke desidu” p”riet”lis mel”lui ”rteri spir”lis menet”p, seperti jug” ”lir”n d”r”h endometrium sel”m” f”se lute”l siklus. Arteri spir”lis d”l”m desidu” p”riet”lis mempert”h”nk”n struktur endotel d”n otot polos p”d”

17

dindingny” sehingg” tet”p responsive terh”d”p ”gen v”so”ktif y”ng bekerj” p”d” otot polos ”t”u sel endotel. Sistem ”rteri spir”lis y”ng mend”r”hi desidu” b”s”lis tep”t dib”w”h bl”stokist” y”ng berimpl”nt”si, d”n ”khirny” mend”r”hi jug” ru”ng intervillus, meng”l”mi perub”h”n y”ng dr”m”tis. Arteriol” d”n ”rteri spir”lis ini diinv”si oleh sitotrofobl”s. Sel”m” proses ini, dinding pembuluh d”r”h desidu” b”s”lis dih”ncurk”n. H”ny” tersis” selubung pembuluh t”np” otot polos ”t”upun sel endotel. Akib”t y”ng penting d”ri h”l tersebut ”d”l”h s”lur”n pembuluh d”r”h m”tern”l ini y”ng menj”di pembuluh d”r”h uteropl”sent” tid”k responsive terh”d”p ”gen v”so”ktif (Cunningh”m, 2014).

P”d” keh”mil”n norm”l terj”di inv”si trofobl”s p”d” pembuluh d”r”h di b”gi”n desidu”. Inv”si trofobl”s gelomb”ng pert”m” ini terj”di p”d” usi” keh”mil”n 10–16 minggu. P”d” usi” keh”mil”n 22 minggu terj”di inv”si trofobl”s gelomb”ng kedu”, di m”n” sel-sel trofobl”s mem”suki ”rteri spir”lis di l”pis”n desidu” s”mp”i ke l”pis”n miometrium. L”pis”n otot dinding pembuluh d”r”h tersebut dig”ntik”n oleh j”ring”n el”stis, sehingg” pembuluh d”r”h berdil”t”si menc”p”i 30 k”li d”ri sebelum h”mil. Ke”d””n inil”h y”ng menyeb”bk”n terj”diny” perub”h”n siologis. P”d” PE inv”si trofobl”s gelomb”ng kedu” tid”k sempurn” ”t”u g”g”l terj”di. Deng”n demiki”n l”pis”n otot tunik” medi” pembuluh d”r”h tet”p seb”g”im”n” bi”s” sehingg” ”rteri spir”lis tid”k berdil”t”si d”n memungkink”n terj”diny” v”sokonstriksi. P”d” ke”d””n ini perub”h”n siologis tid”k terj”di. Akib”t keg”g”l”n inv”si trofobl”s ini ”k”n terj”di perub”h”n p”d” ”rteri spir”lis sehingg” terj”di penurun”n ”lir”n d”r”h uteropl”sent”, terj”di hiperpl”si” tunik” intim” d”n proses ”terosis. P”d” h”sil peneliti”n did”p”tk”n h”sil p”d” hiperpl”si” tunik” intim” p”d” kelompok Preekl”mpsi”/Ekl”mpsi” 20 k”sus d”n kelompok normotensif tid”k dijump”i, ”terosis ”kut p”d” Preekl”mpsi”/Ekl”mpsi” 18 k”sus d”n kelompok normotensif tid”k dijump”i ( Lukito, 2007 ).

P”d” impl”nt”si ”rteri spir”lis uteri meng”l”mi remodeling ekstensif k”ren” diinv”si oleh trofobl”s endovascular. Sel-sel ini mengg”ntik”n l”pis”n otot d”n endotel untuk memperleb”r di”meter pembuluh d”r”h. Ven”-ven” h”ny” diinv”si sec”r” super ci”l. N”mun, p”d” preekl”mpsi”, mungkin terj”di inv”si trofobl”stik inkomplet. Bil” terj”di inv”si d”ngk”l, pembuluh desidu”, d”n buk”n pembuluh d”r”h miometrium,

18

”k”n dil”pisi oleh trofobl”s endovascular. Arteriol” miometrium y”ng lebih d”l”m tid”k kehil”ng”n l”pis”n endotel d”n j”ring”n muskoel”stik merek”, d”n rer”t” di”meter ekstern”l merek” h”ny” seteng”h di”meter pembuluh p”d” pl”sent” norm”l. P”d” bebeber”p” peneliti”n memperlih”tk”n b”hw” der”j”t g”nggu”n inv”si trofobl”s p”d” ”rteri spir”lis berhubung”n deng”n kep”r”h”n peny”kit hipertensi. ( Cunningh”m, 2009 ).

Ad”ny” perub”h”n preekl”mpsi” dini, term”suk kerus”k”n endotel, insud”si komponen pl”sm” ke d”l”m dinding pembuluh d”r”h, prolifer”si sel miointim”, d”n nekrosi tunik” medi”. Lipid ”w”lny” ter”kumul”si d”l”m sel miointim” d”n sel”njutny” d”l”m m”krof”g. Sel y”ng dipenuhi lipid sem”c”m ini d”n temu”n terk”it disebut seb”g”i ”terosis. Bi”s”ny”, pembuluh d”r”h y”ng terken” ”terosis ”k”n meng”l”mi dil”t”si ”neurism”l (Cunningh”m,2009).

Y”ng terb”ik dipel”j”ri ”d”l”h p”d” mencit, deng”n m”s” y”ng singk”t (19 - 20) h”ri

keh”mil”n d”n ”d”ny” remoderlling ”rteri spir”l desidu” signi k”n. P”d” mencit, terd”p”t Natural killer sel y”ng terut”m” bert”nggung j”w”b untuk remodelling ”rteri d”l”m spesies ini. Inv”si trofobl”s di mencit rel”tif d”ngk”l d”n sement”r” dib”t”si s”mp”i ”khir keh”mil”n, umumny” di”ngg”p seb”g”i kontributor minor terj”diny” remodeling ”rteri (Burke, 2013).

19

Perub”h”n ”rteri spir”l sel”m” keh”mil”n. (A) tr”nsform”si siologis norm”l ”rteri spir”l p”d” keh”mil”n norm”l. Lumen ”rteri spir”l (t”nd” bint”ng) ”d”l”h dil”t”si. Sel-sel trofobl”s y”ng in ltr”si dinding ”rteri spir”l. (B) Keg”g”l”n tr”nsform”si siologis ”rteri spir”l p”d” p”sien deng”n preekl”mpsi”. Lumen ”rteri (t”nd” bint”ng) tid”k meleb”r. L”pis”n medi”l ”rteri spir”l y”ng utuh. Meskipun b”ny”k trofobl”s interstiti”l mengelilingi ”rteri spir”l, trofobl”s tid”k menginv”si dinding pembuluh d”r”h (Kim,2015).

2.4. L-Arginine

Arginine ”d”l”h s”l”h s”tu bentuk ”s”m ”mino esensi”l, bentuk ”ktif d”l”m

L-form, y”ng disintesis oleh sel-sel endotel d”n diekskresik”n lew”t urin. Arginine tel”h diket”hui seb”g”i ter”pi d”ri berb”g”i peny”kit d”n berper”n seb”g”i diet. L-Arginine

”d”l”h substr”t nitrit oksid” (NO), sebu”h v”sodil”tor y”ng potent, y”ng mungkin mem”ink”n per”n ut”m” d”l”m regul”si tek”n”n d”r”h. Peneliti”n deng”n model hew”n cob” menunjukk”n b”hw” L-Arginine-No system meng”l”mi upregul”si sel”m” keh”mil”n, d”n hipertensi, proteinuri”, IUGR, d”n kerus”k”n glomerulus d”p”t terj”di ”kib”t blok”de d”ri sintesis NO, sement”r” hipertensi ”kib”t inhibisi sintesis NO d”p”t diperb”iki deng”n suplement”si L-Arginine. P”d” m”nusi”, pemberi”n L-Arginine d”p”t meningk”tk”n sirkul”si uteropl”sent” d”n menurunk”n tek”n”n d”r”h m”tern”l, d”n stress oksid”tif d”p”t berper”n seb”g”i kunci ut”m” d”l”m perkemb”ng”n disfungsi endotel d”n preekl”mpsi”. Oleh k”ren” itu, L-Arginine mungkin d”p”t menj”di opsi ter”pi b”ru untuk hipertensi p”d” keh”mil”n. (Shunping Gui et ”ll 2013).

L-Arginine sec”r” tr”dision”l dikl”si k”sik”n seb”g”i ”s”m ”mino semi esensi”l ”t”u penting sec”r” kondision”l; ”d”l”h esensi”l p”d” ”n”k-”n”k d”n non-esensi”l p”d” or”ng dew”s”. Homeost”sis pl”sm” konsentr”si L-Arginine di”tur oleh ”sup”n m”k”n”n ”rginin, omset protein, sintesis ”rginin, d”n met”bolisme. H”l ini mungkin menjel”sk”n meng”p”, d”l”m kondisi tertentu, L-Arginine d”p”t menj”di komponen m”k”n”n y”ng penting. J”ring”n ut”m” di m”n” endogen sintesis L-Arginine terj”di ”d”l”h ginj”l, di m”n” L-Arginine terbentuk d”ri citrulline, y”ng dirilis terut”m” oleh usus kecil. H”ti jug” m”mpu mensintesis juml”h y”ng cukup L-Arginine; n”mun, ini

20

ben”r-ben”r digun”k”n ul”ng d”l”m siklus ure” ”g”r h”ti memberik”n kontribusi sedikit ”t”u tid”k s”m” sek”li untuk uks ”rginin pl”sm”.

L-Arginine bi”s”ny” merup”k”n sekit”r 5 – 7 % d”ri k”ndung”n ”s”m ”mino d”ri diet dew”s” kh”s y”ng seh”t. Ini dihitung untuk ”sup”n r”t”-r”t” 2,5 – 5 g/h”ri, y”ng h”ny” memenuhi persy”r”t”n minim”l tubuh untuk memperb”iki j”ring”n, sintesis protein d”n pemelih”r””n sel kekeb”l”n tubuh. L-Arginine dis”mp”ik”n mel”lui s”lur”n pencern””n (GIT) diser”p d”l”m jejunum d”n ileum d”ri usus kecil. Sebu”h sistem tr”nsport”si ”s”m ”mino tertentu (y+ tr”nsporter) memf”silit”si proses ini; sistem tr”nsport”si ini jug” bert”nggung j”w”b untuk memb”ntu peng”ngkut”n ”s”m ”mino d”s”r l”inny” L-lysine d”n L-histidine. Sekit”r 60% d”ri L-Arginine y”ng diser”p dimet”bolisme oleh GIT, d”n h”ny” 40% menc”p”i sirkul”si sistemik utuh (Z.G”d, 2010).

P”d” kondisi norm”l, tubuh m”mpu mensintesis L-Arginine untuk mencukupi kebutuh”n, tet”pi p”d” kondisi stress tertentu, dim”n” terj”di peningk”t”n kebutuh”n terh”d”p L-Arginine, produksi d”l”m tubuh tid”k l”gi m”mpu mencukupi, d”n p”d” s””t itu L-Arginine d”l”m m”k”n”n menj”di s”ng”t essensi”l. L-Arginine b”ny”k dijump”i p”d” m”k”n”n ”nt”r” l”in k”c”ng k”c”ng”n (brazil nuts d”n ”lmonds) ker”ng, d”n term”suk d”ging s”pi, d”ging b”bi. L-Arginine disintesis terut”m” diginj”l, memeg”ng per”n”n penting d”l”m siklus krebs-henseleit urea. L-ornithine d”n L-citrulline

merup”k”n precursor p”d” sintesis L-Arginine, y”ng kemudi”n dikonversi menj”di ure” d”n Lorhithine oleh enzim ”rgin”se. Seb”gi”n L-Argininee y”ng tid”k dikonversi m”suk d”l”m sirkul”si d”n didistribusik”n keseluruh j”ring”n tubuh d”n dimet”bolisme. Seb”gi”n kecil L-Arginine disintesis di liver. An”lisis f”rm”kokinetik menunjuk”n b”hw”

L-Arginine dose-related kinetics. Bio”v”il”bilit”s or”l sekit”r 70% d”n konsentr”si pl”sm” m”ksimum dic”p”i lebih l”mb”t d”rip”d” setel”h pemberi”n intr”ven”. H”l ini berhubung”n deng”n ”bsorbsi y”ng l”mb”t p”d” tr”ktus g”strointestin”l. L-Arginine

berper”n penting p”d” beber”p” fungsi sistem d”l”m tubuh. Ant”r” l”in: detoksi k”si ”mmoni”; precursor nitric oxide, ker”tin, poly”mine, glut”m”te, l-proline, ”gm”ntin, tetr”peptide tufsin; merup”k”n ”s”m ”minoglikogenik; memperb”iki sistem imun; pen”t”l”ks”n””n ”lk”losis met”bolik ber”t; mer”ngs”ng sekresi growth hormone, prol”ktin, hormone p”ncre”s gluc”gon d”n insulin, sert” ”kti t”s ”ntioksid”n

21

(Andhi,2006).

2.5. Peran L-Arginine dalam preeklampsia

L-Arginine bertind”k seb”g”i precursor NO d”n diub”h menj”di NO d”n

L-citrulline oleh NOS, seperti y”ng dijel”sk”n d”l”m b”gi”n p”to siologi preekl”mpsi”. Ini tel”h menj”di fokus peneliti”n y”ng bertuju”n untuk menyelidiki per”n penceg”h”n d”l”m w”nit” berisiko tinggi untuk menj”di preekl”mpsi”. Sebu”h studi d”ri infus intr”ven” L-Arginine p”d” w”nit” h”mil menunjuk”n penurun”n y”ng signi k”n p”d” tek”n”n d”r”h, efek y”ng lebih bes”r p”d” w”nit” preekl”mpsi”. B”ru-b”ru ini, focus p”d” efek d”ri suplement”si L-Arginine p”d” penceg”h”n preekl”mpsi” w”nit” y”ng berisiko tinggi. Sebu”h ”c”k percob””n terkontrol menunjuk”n b”hw” suplement”si diet deng”n kombin”si L-Arginine d”n ”ntioksid”n dik”itk”n deng”n penurun”n y”ng signi k”n d”l”m kej”di”n preekl”mpsi”, dib”ndingk”n deng”n ”ntioksid”n sendiri d”n pl”cebo (V”dillo-Orteg” F et ”ll, 2011). Menging”t b”hw” L-Arginine ”d”l”h suplemen m”k”n”n y”ng tersedi” sec”r” lu”s , bukti tent”ng efek y”ng menguntungk”n bis” menyedi”k”n s”r”n” y”ng l”y”k untuk menceg”h preekl”mpsi”. M”k”, peneliti”n lebih l”njut, d”l”m per”n untuk mengur”ngi kej”di”n preekl”mpsi” p”d” popul”si berisiko rend”h (T”m”nrit Joh”l et ”ll, 2014).

Konsentr”si L-Arginine tel”h dibuktik”n sec”r” signi k”n berkur”ng p”d” w”nit” deng”n preekl”mpsi” bil” dib”ndingk”n deng”n w”nit” y”ng seh”t t”np” peny”kit, deng”n or”ng l”in menunjukk”n perub”h”n d”l”m tr”nsport”si substr”t. N”mun, t”mp”k b”hw” r”sio ADMA untuk L-Arginine (buk”n konsentr”si mutl”k L-Arginine) mungkin lebih penting d”l”m menentuk”n ”ktivit”s nitr”t oksid” sint”se d”n produksi berikutny” r”dik”l beb”s oksigen, sehingg” mencipt”k”n siklus meng”b”dik”n nitr”t disfungsi sint”se oksid” (Dorni”ck w”ll,2013).

Peneliti”n deng”n model hew”n cob” menunjukk”n b”hw” system

L-Arginine-NO meng”l”mi regul”si sel”m” keh”mil”n. Hipertensi, proteinuri”, IUGR d”n kerus”k”n glomerulus d”p”t terj”di ”kib”t blok”de d”ri sintesis NO, sement”r” hipertensi ”kib”t inhibisi sintesis NO d”p”t diperb”iki deng”n suplement”si L-Arginine. P”d” m”nusi”, pemberi”n L-Arginine d”p”t meningk”tk”n sirkul”si uteropl”sent” d”n

22

menurunk”n tek”n”n d”r”h m”tern”l d”n stress oksid”tif d”p”t berper”n seb”g”i kunci ut”m” d”l”m perkemb”ng”n disfungsi endotel d”n preekl”mpsi”. Oleh k”ren” itu,

L-Arginine mungkin d”p”t menj”di opsi ter”pi b”ru untuk hipertensi p”d” keh”mil”n (Shunping et al, 2013).

2.6. Preeklampsia Pada Mencit (Mus musculus)

Mencit (Mus musculus) ”d”l”h hew”n m”m”li” penger”t (Rodentia) y”ng term”suk d”l”m f”mili Muridae (tikus-tikus”n). Mencit b”ny”k digun”k”n d”l”m peneliti”n dik”ren”k”n m”s” reproduksi d”n perkemb”ng”nny” y”ng singk”t, kem”mpu”nny” untuk bert”h”n hidup d”n menyesu”ik”n diri deng”n perub”h”n sert” sec”r” genetik”, mencit ”d”l”h m”m”li” deng”n kode genetik p”ling menyerup”i m”nusi” (Yue et ”l, 2014).

HLA-G merup”k”n molekul MHC kel”s 1b non kl”sik, bersif”t monomor k d”n memiliki kem”mpu”n mengh”mb”t ”ktivit”s sel NK d”n LGL desidu” y”ng berfungsi mel”w”n sel trofobl”s sehingg” HLA-G mempuny”i fungsi melindungi trofobl”s d”ri peng”ruh imun m”tern”l. Sel”m” keh”mil”n trofobl”s mempert”h”nk”n peningk”t”n regul”si ekspresi HLA-G sehingg” kerj” trofobl”s d”l”m menginv”si desidu” sistem v”skuler m”tern”l berj”l”n b”ik. Jik” HLA-G tid”k diekspresik”n ”t”u menurun, kem”mpu”n trofobl”s ”k”n berkur”ng d”l”m menginv”si uterus (di”ngg”p non-self). Jik” trofobl”s tid”k menginv”si ”rteri m”tern”l deng”n b”ik m”k” ”lir”n uteropl”senter menurun d”n terj”di hipoksi” pl”sent” y”ng menyeb”bk”n preekl”mpsi” (Soloski et al, 2008).

Gen kel”s 1 lokus MHC b”ik p”d” m”nusi” m”upun p”d” tikus mengkode sejuml”h bes”r gen sekit”r 50 gen y”ng memberi kode protein deng”n struktur mirip kel”s I, disebut gen kel”s Ib. Gen tersebut meliputi E,F,G,H,J, d”n X p”d” m”nusi” d”n Q”, TI” p”d” tikus. Fungsi sejuml”h bes”r gen ini belum diket”hui, tet”pi beber”p” d”p”t berper”n d”l”m mengend”lik”n imunit”s b”w””n, kemungkin”n deng”n meng”tur ”ktiv”si sel NK. P”d” mencit, Q”-2 produk gen preimplantasi embryonic development (Ped) merup”k”n protein MHC Cl”ss Ib y”ng merup”k”n homolog d”ri

23

HLA-G p”d” m”nusi”. Embrio mencit y”ng mengekspresik”n Q”-2 mengh”silk”n kecep”t”n pembel”h”n y”ng lebih ny”t”, surviv”l s”mp”i ”term d”n mengh”silk”n ber”t b”d”n l”hir y”ng b”ik d”n seb”likny” ”p”bil” mencit tid”k mengekspresik”n Q”-2 m”k” ”k”n terj”di kegugur”n, kem”ti”n j”nin mencit, pers”lin”n prem”tur d”n ber”t l”hir j”nin mencit y”ng rend”h (Pl”yf”ir et al, 2009; Roth, 2013).

2.7. Penelitian yang Relevan

Dorni”ck w”l (2013) d”l”m peneliti”nny” meny”t”k”n terd”p”t bukti khusus y”ng berk”it”n deng”n tind”k”n mek”nistik d”ri L-Arginine p”d” keh”mil”n lebih terb”t”s. Peneliti”n p”d” hew”n y”ng melib”tk”n tikus d”n mencit tel”h diinduksi tur preekl”mpsi”, term”suk hipertensi, proteinuri” d”n h”mb”t”n pertumbuh”n j”nin setel”h pengh”mb”t”n ”ktivit”s nitr”t oksid” sint”se. NG-nitro-L-Arginineee methyl ester (L-NAME) merup”k”n inhibitor penting d”ri oksid” nitr”t sint”se, d”n, p”d” tikus h”mil, infus menginduksi hipertensi d”n tur preekl”mpsi” l”inny”. Y”ng penting, tur ini t”mp”kny” reversibel setel”h pengob”t”n deng”n L-Arginine, deng”n hew”n diperl”kuk”n L-NAME y”ng kemudi”n diperl”kuk”n deng”n L-Arginine memiliki ekskresi sedikit protein urin, penurun”n tek”n”n d”r”h y”ng signi k”n.

2.8. Cara Pemeriksaan Histopatologi dengan Menggunakan Mikroskop

Pembu”t”n prep”r”t histop”tologi dil”kuk”n deng”n c”r” org”n uterus di ks”si deng”n menggun”k”n l”rut”n Netral Buffer Form”lin 10% kemudi”n dipotong d”n dim”sukk”n ke d”l”m temp”t spesimen y”ng terbu”t d”ri pl”stik. Sel”njutny” dil”kuk”n proses dehidr”si p”d” ”lkohol konsentr”si bertingk”t y”itu ”lkohol 70%, 80%, 90% ”lkohol ”bsolute I, ”bsolute II m”sing-m”sing 2 j”m. L”lu dil”kuk”n penjernih”n deng”n

xylol kemudi”n dicet”k menggun”k”n p”r”fin sehingg” sedi””n tercet”k di d”l”m blok p”r”fin d”n disimp”n d”l”m lem”ri es. Blok p”r” n tersebut kemudi”n dipotong tipis seteb”l 5-6 μm menggun”k”n mikrotom. H”sil potong”n di”pungk”n d”l”m ”ir h”ng”t bersuhu 600C untuk mereg”ngk”n ”g”r j”ring”n tid”k berlip”t. Sedi””n kemudi”n di”ngk”t d”n dilet”kk”n d”l”m gel”s objek untuk dil”kuk”n pew”rn””n Hematoxylin dan Eosin (HE). Sel”njutny” diperiks” dib”w”h mikroskop c”h”y” mixon eclip CY1 deng”n

24

pembes”r”n 400x. P”r”meter y”ng dinil”i y”itu hiperpl”si” tunik” intim” d”n ”terosis ”rteri spir”lis. Peneliti mel”kuk”n pengukur”n hiperpl”si” tunik” intim” d”n ”terosis ”rteri spir”lis d”ri seti”p prep”r”t blok p”r” n.

2.9. Cara Pembuatan Preparat dan Pemeriksaan Secara Miroskopis Sediaan Uutuk Pemeriksaan Histologi.

J”ring”n ”t”u org”n y”ng diterim” h”rus d”l”m ke”d””n ter ks”si deng”n form”lin buffer 10% (perb”nding”n j”ring”n d”n c”ir”n ks”si, 1:9 ) d”n ditutup r”p”t.

A. Buffer formalin 10%

1. Form”ldehid 40% H.CHO = 100 ml

2. Sodium Phosp”t monob”sic N”H2PO4.H2O = 4 gr”m 3. Sodium Phop”t dib”sic N”2HPO4 = 6.5 gr”m

4. Aqu”dest = 900 ml

B. Pemeriks””n M”kroskopis

Pemeriks””n m”kroskopis dil”kuk”n oleh dokter tug”s ”n”lis keseh”t”n/teknisi l”bor”torium mend”mpingi dokter, mel”kuk”n penc”t”t”n h”sil pemeriks””n dokter. P”d” t”h”p ini dokter jug” ”k”n memotong j”ring”n y”ng dicurig”i

C. Prosessing J”ring”n

Untuk prosessing j”ring”n mem”k”i ”l”t tissue prosessor automatic y”ng bekerj” ± 18,5 j”m (bis” diub”h sesu”i kebutuh”n). T”h”p”n prosessing j”ring”n y”itu, ks”si, dehidr”si, clearing, d”n in ltr”si p”r” n. T”h”p”n kerj” p”d”

Tissue Automatics Prosessor

1. Fiks”si:Botol 1. Buffer Formalin 10% 2 j”m 2. Dehidr”si : Botol 2. Alkohol 70% 1,5 j”m

25

Botol 4. Alkohol 95% 1,5 j”m

Botol 5. Alkohol ”bsolute I 1,5 j”m Botol 6. Alkohol ”bsolute II 1,5 j”m Botol 7. Alkohol ”bsolute III 1,5 j”m 3. Clearing : Botol 8. Xylol I 1 J”m

Botol 9. Xylol II 1,5 J”m

Botol 10. Xylol III 1,5 J”m

4. In ltr”si p”r” n : Botol 11. P”r”f n c”ir I 1,5 j”m Botol 12. P”r”f n c”ir II 2 j”m

➔ Juml”h 18,5 j”m D.Pengeblokk”n

Cara Kerja :

1. H”ng”tk”n p”r” n c”ir, pinset, d”n penutup cet”k”n 2. P”r” n c”ir ditu”ngk”n ked”l”m cet”k”n

3. J”ring”n d”ri prosessing dim”suk”n ked”l”m cet”k”n y”ng tel”h disi p”r” n c”ir, tek”n j”ring”n ”g”r sem”kin menempel di d”s”r cet”k”n

4. Tutup cet”k”n di”mbil, let”kk”n di”t”s cet”k”n d”n di tek”n. P”s”ng etiket di pinggir

5. Bi”rk”n s”mp”i membeku

6. Setel”h beku, kelu”rk”n d”ri cet”k”n. R”pik”n sisi-sisi blok. G”nti etiket deng”n y”ng perm”nen

E. Pemotong”n deng”n Mikrotom

26

di freezer ±15 menit ”t”u diberi b”tu es

2. Blok dijepit p”d” mikrotom kemudi”n dipotong deng”n pis”u mikrotom. Kemiring”n : ± 300 , Teb”l blok p”r” n ± 2-5 mikron

3. H”sil pemotong”n (berup” pit”/iris”n tipis y”ng s”ling bers”mbung) dim”sukk”n ked”l”m waterbath y”ng diisi ”ir y”ng sud”h dih”ng”tk”n 50 0 C, kemudi”n di”mbil deng”n k”c” objek (Melet”kk”n potong”n di waterbath

tid”k boleh terb”lik)

F. Inkub”si

Tuju”n : Mengu”pk”n ”ir y”ng terb”w” oleh h”sil potong”n hingg” j”ring”n menempel lebih ku”t

C”r” kerj” : inkub”si prep”r”t di ”t”s hot plate deng”n suhu±500 C (dib”w”h titik c”ir p”r”fin) sel”m” 15 menit

Seb”ikny” di”l”si deng”n kert”s mer”ng

Untuk pengec”t”n imunnohistokim” inkub”si 390C sel”m” 1 m”l”m G. Pengec”t”n

Umumny” d”l”m pengec”t”n histop”tologi digun”k”n pew”rn””n

Hematoxylin-Eosin (HE) dis”mping c”t khusus (PAS, gomori, ZN, M”lory, dll) d”n c”t y”ng lebih khusus y”itu immunohistokimi” (ER, PR, CD20, LMP, dll)

H. Proses pengec”t”n 1. Dep”r” nis”si

Prep”r”t m”suk ke Xylol I, II, d”n III m”sing-m”sing 3 menit, setel”h itu dil”p pinggir j”ring”n deng”n k”in k”s”

2. Rehidr”si

27

3. Prep”r”t m”suk ke ”ir meng”lir 3 menit (”ir meng”li dit”mpung d”l”m w”d”h )

Sebelumny” celup ked”l”m du” m”ngkok ”ir 3 celup 4. Pengec”t”n Inti 7 menit

Prep”r”t m”suk ke d”l”m Meyer hematoxylin

5. Prep”r”t m”suk ke ”ir meng”lir 3 menit (”ir meng”li dit”mpung d”l”m w”d”h )

Sebelumny” celup ked”l”m du” m”ngkok ”ir 3 celup

6. Counter Stain

Prep”r”t m”suk ke l”rut”n Eosin 7 celup

7. Prep”r”t M”suk ke ”ir w”d”h I, II, d”n III 3 celup 8. Dehidr”si

Prep”r”t m”suk ke d”l”m ”lkohol 70 %, 80%, 95%,100% 3 celup, setel”h itu Dil”p deng”n k”in k”s” sekit”r j”ring”n d”n tunggu s”mp”i kering

9. Clearing

Prep”r”t m”suk Ke Xylol I, d”n II m”sing-m”sing 2 menit

10. Mounting

28

30

2.11. Kerangka Konsep

Keter”ng”n :

Meng”kib”tk”n Perl”ku”n B”h”n d”s”r peneliti”n

Sirkul”si uteropl”sent”

terg”nggu Sirkul”si uteropl”sent” _terg”nggu

L-Arginine

inv”si trofobl”s tid”k ”dequ”t inv”si trofobl”s tid”k ”dequ”t

Aktivit”s Nitric oxide sintet”se_↓

Aktivit”s Nitric oxide sintet”se_↑

r”dik”l beb”s >> d”n reactive

oxygen species _↑ reactive oxygen species R”dik”l beb”s ˂˂ d”n _↓

V”sokonstriksi v”skuler V”sodil”t”si v”skuler

Perb”ik”n Hipoksi” j”ring”n

Kerus”k”n endotel p”d” ”rteri spir”lis uterus berup” :

meningk”tny” keteb”l”n tunik” intim” ”rteri spir”lis d”n

menurunny” di”meter ”rteri spir”lis

Perb”ik”n Kerus”k”n endotel p”d” ”rteri spir”lis uterus : menurunny” keteb”l”n

tunik” intim” ”rteri spir”lis d”n

peningk”t”n di”meter ”rteri spir”lis

Mencit bunting model preekl”mpsi”

Preekl”mpsi”

Hipoksi” j”ring”n

31

2.12. Penjelasan Kerangka Teori

Perkemb”ng”n pl”sent” y”ng ”bnorm”l (inf”rk, sklerosis) meng”kib”tk”n insu siensi pl”sent” d”n pelep”s”n beber”p” m”teri”l pl”sent” ke d”l”m sirkul”si m”tern”l sehingg” terj”di inv”si endov”skuler oleh sitotrofobl”s. Inv”si tersebut diikuti keg”g”l”n remodeling d”ri ”rteri spir”lis d”n desidu” b”s”lis. H”l tersebut meng”kib”tk”n rend”hny” oksigen”si y”ng meng”lir mel”lui pl”sent”. P”d” kondisi ini terj”di penurun”n k”d”r NOS y”ng meng”kib”tk”n bert”mb”h b”ny”kny” r”dik”l beb”s d”n re”ktif oksigen spesies (ROS), y”ng meng”kib”tk”n v”sokontriksi, peningk”t”n tek”n”n d”r”h d”n disfungsi endotel.

Proses ”ngiogenesis pl”sent” p”d” preekl”mpsi” tid”k efektif. Diseb”bk”n k”ren” ketid”kseimb”ng”n ”nt”r” oksid”n d”n ”ntioksid”n. ketid”kseimb”ng”n ”nt”r” produksi r”dik”l beb”s d”n sistem pert”h”n”n ”ntioksid”n meng”kib”tk”n terj”diny” hipoksi” j”ring”n d”n kerus”k”n endotel.

P”d” s””t keh”mil”n preekl”mpsi”, tingk”t NOS sec”r” bert”h”p ”k”n menurun sehingg” keseimb”ng”n ”k”n bergeser menj”di melem”hk”n f”ktor ”ntioksid”n, y”ng menyeb”bk”n konsentr”si NOS menj”di rend”h. Penurun”n f”ktor ”ntioksid”n d”n disfungsi endotel ”kib”t preekl”mpsi” d”p”t menyeb”bk”n penurun”n fungsi d”n b”hk”n kerus”k”n d”ri ”rteri spir”lis y”itu terj”diny” hiperpl”si” tunik” intim” d”n ”terosis.

L-Arginine ”d”l”h s”tu-s”tuny” substr”t d”l”m biosintesis NO, y”ng mem”ink”n per”n penting d”l”m proses siologis y”ng ber”g”m d”l”m tubuh m”nusi” term”suk neurotr”nsmisi, v”sorel”x”tion, sitotoksisit”s d”n kekeb”l”n.

L-Arginine ”d”l”h ”s”m ”mino esensi”l y”ng ditemuk”n d”l”m protein d”ri tubuh hew”n d”n berb”g”i sumber m”k”n”n. L-Arginine ber”s”l d”ri oksid” nitr”t y”ng diub”h oleh enzim k”t”lis oksid” nitr”t sint”se. L-Arginine tel”h muncul seb”g”i

messenger penting intr”seluler d”n ”nt”r seluler (Nitric oxide-cGMP) mengend”lik”n b”ny”k proses siologis. Deng”n pemberi”n L-Arginine y”ng

32

merup”k”n ”s”m ”mino esensi”l d”n merup”k”n substr”t nitrit oksid” (NO), sebu”h v”sodil”tor potent, y”ng d”p”t meningk”tk”n sirkul”si uteropl”sent” d”n menurunk”n tek”n”n d”r”h m”tern”l d”n stress oksid”tif d”p”t berper”n seb”g”i kunci ut”m” d”l”m perkemb”ng”n disfungsi endotel d”n preekl”mpsi”

Pemberi”n L-Arginine dih”r”pk”n d”p”t menyeb”bk”n perb”ik”n kerus”k”n endotel ”rteri spir”lis uteri deng”n mengur”ngi ”t”u menceg”h terj”diny” ”terosis.

2.13 Hipotesis

Ad” peng”ruh L-Arginine terh”d”p perb”ik”n kerus”k”n endotel y”itu menurunny” keteb”l”n tunik” intim” ”rteri spir”lis d”n meningk”tny” di”meter ”rteri spir”lis p”d” mencit model preekl”mpsi”.

33

BAB III

METODE PENELITIAN 3.1. JenisPenelitian

Jenis peneliti”n ini ”d”l”h peneliti”n eksperiment”l ”n”litik .Dil”kuk”n p”d” hew”n cob”: mencit betin” Mus musculus bunting p”d” usi” kebunting”n en”m bel”s h”ri, untuk menget”hui perbed””n histop”tologi ”rteri spir”lis uterus mencit bunting norm”l, mencit bunting model preekl”mpsi” d”n mencit bunting model preekl”mpsi” d”n mend”p”t ter”pi L-Arginine.

3.2. Waktu Penelitian

Peneliti”n direnc”n”k”n bul”n November 2016 s”mp”i deng”n J”nu”ri 2017

3.3. Tempat Penelitian

3.3.1 K”nd”ng Hew”n Percob””n F”kult”s Kedokter”n Hew”n Universit”s Airl”ngg” untuk proses membuntingk”n mencit d”n membu”t mencit bunting model preekl”mpsi” sert” memelih”r” mencit bunting s”mp”i deng”n peng”mbil”n s”mpel.

3.3.2 L”bor”torium p”tologi ”n”tomi F”kult”s Kedokter”n Hew”n Universit”s Airl”ngg” untuk pembu”t”n prep”r”t blok p”r” n d”n peng”m”t”n

34

histop”tologi s”mpel peneliti”n.

3.4. Populasi, Besar Sampel, dan Teknik Pengambilan Sampel

3.4.1. Peneliti”n p”d” hew”n cob” menggun”k”n org”n uterus mencit y”ng memenuhi kriteri” inklusi y”itu ber”s”l d”ri mencit betin” Mus musculus g”lur Swiss diperoleh d”ri pus”t Veterin”ri” F”rm” Sur”b”y”. D”l”m peneliti”n ini diperoleh mencit betin” umur 3 bul”n, seh”t, deng”n ber”t b”d”n 20-25 gr”m.

3.4.2. Peneliti”n hew”n cob” ini berd”s”rk”n pertimb”ng”n b”hw” mencit Mus musculus p”ling sering dip”k”i d”l”m peneliti”n biomedik, k”ren” sec”r” genetik mempuny”i kemirip”n deng”n m”nusi” sert” mempuny”i kem”mpu”n ber”d”pt”si hidup d”l”m lingkung”n l”bor”torium. Peng”mbil”n s”mpel prep”r”t dil”kuk”n p”d” uterus mencit y”ng sebelumny” tel”h dibed”h d”n dil”kuk”n blok p”r” n kemudi”n diberik”n pew”rn””n

Hematoxylin Eosin (HE).

3.4.3 Juml”h/ bes”r s”mpel untuk penguji”n hipotesis peneliti”n ditentuk”n berd”s”rk”n rumus ( Supr”nto, 2007).

( t – 1 ) ( r – 1 ) ≥ 15 ( 3 – 1 ) ( r – 1) ≥ 15

r ≥ 8,5 Keter”ng”n :

t = juml”h perl”ku”n

r = juml”h s”mpel y”ng diperluk”n

Berd”s”rk”n rumus di”t”s m”k” ti”p kelompok perl”ku”n ”d”l”h 8,5 (n=9) d”n untuk menghind”ri penurun”n juml”h s”mpel ”kib”t kem”ti”n, s”kit, mencit y”ng meng”l”mi p”rtus prem”turus m”upun penurun”n ber”t b”d”n sel”m” peneliti”n sebes”r 10% m”k” juml”h s”mpel ti”p kelompok diperb”ny”k menj”di 10, sehingg” juml”h seluruh s”mpel peneliti”n menj”di 30 mencit.

35

Teknik ”t”u c”r” peng”mbil”n s”mpel ”d”l”h deng”n membuntingk”n 3 kelompok mencit, d”ri ketig” kelompok mencit bunting tersebut, kelompok pert”m” t”np” diberi perl”ku”n l”gi, kelompok kedu” mend”p”t perl”ku”n l”gi menj”di mencit model preekl”mpsi”, kelompok ketig” mend”p”t perl”ku”n menj”di model preekl”mpsi” d”n mend”p”t L-Arginine.

P”d” h”ri ke-16 m”s” bunting mencit, d”ri ketig” kelompok dil”kuk”n pembed”h”n d”n di”mbil s”mpel pl”sent”. Al”s”n peng”mbil”n p”d” h”ri ke-16 ”d”l”h di”sumsik”n seperti keh”mil”n trimester kedu” p”d” keh”mil”n m”nusi”, dim”n” p”d” trimester kedu” m”nifest”si preekl”mpsi” muncul p”d” m”nusi”.

3.5. Variabel Penelitian

3.5.1. V”ri”bel beb”s : L-Arginine

3.5.2. V”ri”bel terg”ntung : kerus”k”n endotel ”rteri spir”lis.

3.5.3. V”ri”bel terkend”li : jenis mencit (Mus musculus) jenis kel”min betin”, ber”t b”d”n 20-25 gr”m, jenis m”k”n”n d”n minum”n, keseh”t”n mencit, per”w”t”n mencit, d”n s”nit”si k”nd”ng, temper”tur d”n kelemb”b”n k”nd”ng, w”ktu pemberi”n m”k”n/ minum d”n perl”kuk”n semu”ny” dikondisik”n s”m”.

3.6. Definisi Operasional

3.6.1 L-Arginine

L-Arginine ”d”l”h As”m ”mino esensi”l y”ng d”p”t meningk”tk”n sirkul”si uteropl”sent” d”n menurunk”n tek”n”n d”r”h m”tern”l. B”h”n sintetis

36

did”p”t d”ri kit L-Arginine deng”n dosis potensi”l p”d” mencit 200 mg/kgbb/h”ri p.o

Sk”l” ukur”n v”ri”bel ini ”d”l”h k”tegorik

3.6.2 Kerus”k”n endotel : hyperpl”si” ”t”u meningk”tny” keteb”l”n tunik” intim” d”n ”terosklerosis ”t”u menurunny” di”meter ”rteri spir”lis uterus mencit di”mbil kemudi”n dil”kuk”n blok p”r” n p”d” uterus mencit d”n di”m”ti deng”n mikroskop c”h”y” merk Nikon Eclipse Ci deng”n pembes”r”n 400x perc”b”ng”n d”ri ”rteri spir”lis kemudi”n diukur rer”t” d”ri teb”l tunik” intim” d”n di”meter ”rteri spir”lis p”d” tig” kelompok peneliti”n y”itu mencit bunting norm”l, mencit model preekl”mpsi” d”n mencit model preekl”mpsi” deng”n pemberi”n L-Arginine deng”n pl”sent” mencit bunting norm”l seb”g”i kontrol.

Di”meter ”rteri spir”lis diukur deng”n rumus lu”s lingk”r”n, teb”l ”rteri diukur hingg” tunik” ”dventisi” deng”n s”tu”n mikrometer persegi. Sk”l” ukur”n v”ri”bel ”d”l”h numerik d”n komp”r”tif p”d” tig” kelompok peneliti”n.

3.7 Kriteria Subjek Penelitian

3.7.1. Kriteri” inklusi : sedi””n org”n uterus mencit y”ng ber”s”l d”ri mencit

bunting betin” Mus musculus g”lur Swiss, umur 3 bul”n, seh”t, deng”n ber”t b”d”n 20-25 gr”m.

3.7.2. Kriteri” eksklusi : sedi””n j”ring”n uterus y”ng rus”k d”n tid”k d”p”t diproses lebih l”njut sert” ber”s”l d”ri mencit y”ng meningg”l sel”m” peneliti”n.

3.8. Instrumen Penelitian

3.8.1. K”nd”ng

K”nd”ng mencit merup”k”n temp”t mencit, berup” b”k pl”stik y”ng diberi penutup k”w”t. M”sing- m”sing k”nd”ng berisi 10 ekor mencit. K”nd”ng

37

berukur”n 40 x 30 x 15 cm. 3.8.2. M”k”n”n

M”k”n”n berup” p”k”n mencit pelet y”ng diberik”n p”gi d”n sore seb”ny”k 100 g/kg BB d”n minum”n mencit ”k”n mend”p”tk”n jenis d”n porsi y”ng s”m”.

3.8.3. Al”t d”n b”h”n peneliti”n

1. Al”t pembed”h”n mencit : gunting bed”h, pinset, j”rum, spr”yer, botol pl”stik temp”t j”ring”n, timb”ng”n mikro digit”l, k”p”s, d”n toples tertutup untuk n”rkose.

2. B”h”n pembed”h”n mencit : kloroform, 3. B”h”n Kit :

”) Kit ”nti Q”2 ”ntibodi ”lkohol, form”lin c”ir (5K44) b) Kit L-Arginine 200 mg / kgbb / h”ri p.o BIOSARGININE c) Pregnant More Serum Gonadotropin (PMSG) PG 600

d) Human Chorionic Gonadotropin (hCG) Chorulon 1500 iu

3.9. Tahapan Penelitian

Mel”kuk”n sinkronis”si bir”hi y”itu mencit betin” dew”s” usi” 3 bul”n deng”n ber”t b”d”n 20-25 gr”m disuntik 5 IU hormon Pregnant More Serum Gonadotropin

(PMSG), 48 j”m kemudi”n disuntik 5 IU Human Chorionic Gonadotropin (hCG). Mencit betin” tersebut dik”wink”n sec”r” monom”ting, y”itu s”tu pers”tu mencit betin” y”ng sud”h disinkronis”si bir”hi dim”sukk”n ke d”l”m k”nd”ng y”ng berisi s”tu mencit j”nt”n umur 7 bul”n ber”t ± 60 gr”m. Di”gnosis bunting did”p”tk”n 17 j”m setel”h dik”wink”n d”n diev”lu”si ”d”ny” copulatory plug (sumb”t y”ng menutupi v”gin” mencit d”ri serviks s”mp”i vulv”).

P”d” h”ri ke-1 keh”mil”n, d”ri seluruh s”mpel y”ng ”d” dib”gi menj”di tig” kelompok, y”itu:

K1 : terdiri d”ri mencit bunting norm”l (t”np” perl”ku”n)

K2 : terdiri d”ri mencit bunting model preekl”mpsi” t”np” perl”ku”n

38

mend”p”t L-Arginine.

P”d” mencit kelompok K2 d”n K3, p”d” h”ri ke-1 s”mp”i deng”n h”ri ke-4 keh”mil”n diberik”n perl”ku”n ”nti Q”-2 seb”ny”k 10 ng Intr” Peritone”l ( IP ) ”g”r menj”di model preekl”mpsi”. P”d” h”ri ke 7-15 kebunting”n mencit, p”d” kelompok K3 diberik”n L-Arginine 200 mg/ kgBB / h”ri per or”l.

P”d” h”ri ke-16 keh”mil”n mencit Mus musculus dim”n” p”d” m”nusi” di”n”logk”n trimester du” p”d” keh”mil”n, dil”kuk”n termin”si p”d” ketig” kelompok. Mencit kemudi”n dieut”n”si menggun”k”n ket”min d”n dil”njutk”n deng”n nekropsi. Setel”h terbuk” rongg” ”bdomen, uterus di”mbil d”n dim”sukk”n ked”l”m pot y”ng sud”h berisi Netral Buffer Formalin 10%.

Pembu”t”n prep”r”t histop”tologi dil”kuk”n deng”n c”r” org”n uterus di ks”si deng”n menggun”k”n l”rut”n Netral Buffer Formalin 10% kemudi”n dipotong d”n dim”sukk”n ke d”l”m temp”t spesimen y”ng terbu”t d”ri pl”stik. Sel”njutny” dil”kuk”n proses dehidr”si p”d” ”lkohol konsentr”si bertingk”t y”itu ”lkohol 70%, 80%, 90% ”lkohol ”bsolute I, ”bsolute II m”sing-m”sing 2 j”m. L”lu dil”kuk”n penjernih”n deng”n

xylol kemudi”n dicet”k menggun”k”n p”r” n sehingg” sedi””n tercet”k di d”l”m blok p”r”fin d”ndisimp”n d”l”m lem”ri es. Blok p”r” n tersebut kemudi”n dipotong tipis seteb”l 5-6 μm menggun”k”n mikrotom. H”sil potong”n di”pungk”n d”l”m ”ir h”ng”t bersuhu 600C untuk mereg”ngk”n ”g”r j”ring”n tid”k berlip”t. Sedi””n kemudi”n di”ngk”t d”n dilet”kk”n d”l”m gel”s objek untuk dil”kuk”n pew”rn””n Hematoxylin dan Eosin (HE).Sel”njutny” diperiks” dib”w”h mikroskop c”h”y” mixon eclip CY1 deng”n pembes”r”n 400x. P”r”meter y”ng dinil”i y”itu hiperpl”si” tunik” intim” d”n ”terosis ”rteri spir”lis. Peneliti mel”kuk”n pengukur”n hiperpl”si” tunik” intim” d”n ”terosis ”rteri spir”lis d”ri seti”p prep”r”t blok p”r” n. Setel”h semu” s”mpel di”mbil, hew”n cob” tersebut dim”tik”n deng”n c”r” dislok”si servik”lis deng”n tuju”n sup”y” mencit cep”t m”tiny” sehingg” mencit tid”k terl”lu l”m” mer”s”k”n s”kit.

3.10. Analisa Statistik

39 Science). Teknik ”n”lisis d”t” y”ng digun”k”n d”l”m peneliti”n ini ”d”l”h untuk histop”tologi ”rteri spir”lis uterus menggun”k”n uji st”tistik oneway anova d”n

Mann-whitney, k”ren” d”t” d”l”m peneliti”n ini berdistribusi norm”l. Ad”pun kel”njut”n d”ri uji oneway anova ”d”l”h jik” terd”p”t perbed””n y”ng berm”kn” m”k” dil”kuk”n deng”n uji Post Hoc t test. Perhitung”n st”tistik p”d” peneliti”n ini menggun”k”n tingk”t kem”kn””n sebes”r 0.05 (confident interval 95%) sehingg” bil” d”l”m uji st”tistik did”p”tk”n p < 0,05 d”p”t di”rtik”n berm”kn”.

3.11. Anggaran : bersif”t m”ndiri.

3.12. Kelayakan Etik

Kel”y”k”n etik did”p”tk”n d”ri komisi etik peneliti”n F”kult”s Kedokter”n Hew”n Universit”s Airl”ngg” deng”n NOMOR : 648-KE dinyatakan LAIK ETIK

3.13. Alur Penelitian

K 1 K 2 K 3

Mencit bunting

40

3.14. Penjelasan Alur Penelitian

Mencit bunting

kontrol neg”tif Mencit bunting kontrol positif

Injeksi Anti Q”-2 10 ηg IP H”ri ke 1-4

Injeksi Anti Q”-2 10 ηg IP H”ri ke 1-4

Pemberi”n L-Arginine

200 mg/kgbb/h”ri (0,2 ml) p”d” h”ri ke 7-15

keh”mil”n Termin”si mencit p”d” h”ri ke – 16 keh”mil”n

Pembu”t”n prep”r”t blok p”r” n

Pew”rn””n Hematoxylin dan Eosin (HE)

Peng”m”t”n G”mb”r”n histop”tologi j”ring”n uterus ( keteb”l”n tunik” intim” d”n di”meter ”rteri spir”lis ) dib”w”h mikroskop

deng”n pembes”r”n 400x

41

”. Mencit seh”t : deng”n kondisi m”t” bersin”r, bulu tid”k kus”m, ”ktif, n”fsu m”k”n b”ik.

b. Monom”ting : s”tu mencit j”nt”n dik”wink”n deng”n s”tu mencit betin”

c. Mencit bunting : Mencit betin” dew”s” deng”n ber”t 20-25 gr”m diny”t”k”n bunting y”itu terd”p”tny” copulatory plug (sumb”t v”gin”) menutupi v”gin” mencit d”ri serviks s”mp”i vulv”.

d. M”s” kebunting”n mencit : M”s” kebunting”n mencit s”mp”i deng”n 19-20 h”ri.

e. Uterus mencit bunting norm”l : Uterus y”ng di”mbil p”d” mencit norm”lt”np” pemberi”n ”nti Q”-2 d”n L-Arginine

f. Uterus mencit model preekl”mpsi” : y”itu Uterus y”ng di”mbil p”d” mencit bunting y”ng tel”h mend”p”t perl”ku”n pemberi”n ”nti Q”-2 seb”ny”k 10 ng p”d” h”ri ke-1 s/d h”ri ke-4.

g. Q”-2 : Protein ”l”mi p”d” embrio mencit y”ng menurunk”n re”ksi imunit”s mencit bunting terh”d”p embrio mencit, homolog deng”n HLA-G p”d” m”nusi”. Trofobl”s memiliki keunik”n deng”n mengh”silk”n perp”du”n tid”k w”j”r y”kni Hum”n Leukosit Antigen (HLA)-F, HLA-E, HLA-G (Inst”ni, et ”l, 2003; S”ftl”s et ”l, 2005). HLA-G h”ny” dih”silk”n oleh trofobl”s ekstr”vilus y”ng p”d” unit fetopl”sent” deng”n melindungi sel d”ri lisis oleh NK cell. Penurun”n ekspresi HLA-G p”d” trofobl”st dideteksi p”d” preekl”mpsi” d”n menyeb”bk”n keg”g”l”n inv”si trofobl”s.

h. Anti Q”-2 : Re”gen y”ng berfungsi menurunk”n ekspresi Q”-2 p”d” j”nin mencit.

i L-Arginine :. L-Arginine tel”h muncul seb”g”i messenger penting intr”seluler d”n ”nt”r seluler (Nitric oxide-cGMP) mengend”lik”n b”ny”k proses siologis. D”n merup”k”n s”tu-s”tuny” substr”t d”l”m biosintesis NO, y”ng mem”ink”n per”n penting d”l”m proses siologis y”ng ber”g”m d”l”m tubuh m”nusi” term”suk neurotr”nsmisi, v”sorel”ks”si, sitotoksisit”s d”n kekeb”l”n.

42

BAB IV

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

4.1. Hasil

Peneliti”n ini dil”ks”n”k”n mul”i bul”n Desember 2016 s”mp”i J”nu”ri 2017 di L”bor”torium in vitro d”n p”tologi ”n”tomi F”kult”s Kedokter”n Hew”n Universit”s Airl”ngg”, Sur”b”y”. Hew”n cob” mencit diperoleh d”ri Pus”t Veterin” Sur”b”y”, tig” puluh ekor mencit j”nt”n d”n tig” puluh ekor mencit betin” seh”t deng”n k”r”teristik y”ng homogen. Kemudi”n dil”kuk”n r”ndomis”si, pemberi”n l”bel, sinkronis”si d”n perk”win”n monom”ting.

Mencit betin” tersebut dib”gi menj”di tig” kelompok deng”n juml”h y”ng s”m”, kelompok mencit bunting norm”l disebut kelompok kontrol neg”tif ”t”u K(-), kelompok mencit model preekl”mpsi” disebut kelompok kontrol positif ”t”u K(+), d”n kelompok mencit model preekl”mpsi” deng”n perl”ku”n pemberi”n L-Arginine y”ng disebut kelompok perl”ku”n ”t”u P. S”mp”i h”ri ke 16 m”s” keh”mil”n, semu” mencit d”l”m ke”d””n seh”t.

Setel”h dil”kuk”n eut”n”si”, s”mpel di”mbil d”ri uterus induk mencit, kemudi”n dibu”t prep”r”t untuk meng”m”ti g”mb”r”n histologik uterus y”itu teb”l tunik” intim”

43

d”n di”meter ”rteri spir”lis p”d” m”sing – m”sing kelompok hew”n cob”. Peneliti”n ini merup”k”n peneliti”n eksperiment”l y”ng di”n”lisis deng”n peng”mbil”n s”mpel sec”r” r”ndomis”si.

P”d” peng”m”t”n di b”w”h mikroskop did”p”ti b”hw” p”d” pen”mp”ng di”meter ”rteri spir”lis p”d” kelompok kontrol positif lebih kecil dib”ndingk”n deng”n kelompok kontrol neg”tif d”n kelompok deng”n perl”ku”n. P”d” peng”m”t”n di b”w”h mikroskop terlih”t b”hw” teb”l tunik” intim” ”rteri spir”lis p”d” kelompok kontrol positif lebih teb”l dib”ndingk”n deng”n kelompok kontrol neg”tif d”n kelompok deng”n perl”ku”n.

44

Gambar 4.2. Arteri spir”lis p”d” mencit kelompok kontrol positif.

Gambar 4.3. Arteri spir”lis p”d” mencit kelompok deng”n perl”ku”n.

4.2. Deskripsi Data Penelitian

S”mpel peneliti”n menggun”k”n hew”n mencit (Mus musculus g”lur Swiss) betin” bunting, umur 3 bul”n, seh”t, deng”n ber”t b”d”n 20-25 gr”m. Peng”mbil”n s”mpel prep”r”t dil”kuk”n p”d” serum mencit y”ng sel”njutny” disentrigfug”si d”l”m suhu ru”ng deng”n g”y” 3000 gr”m per 10 menit kemudi”n disimp”n d”l”m suhu 80oC sebelum dil”kuk”n pengukur”n.

Juml”h tikus 30 y”ng dib”gi ked”l”m

3 kelompok y”itu kelompok kontrol (-)

y”itu mencit bunting norm”l (t”np”

perl”ku”n), kelompok kontrol (+) y”itu mencit bunting model preekl”mpsi”

t”np” perl”ku”n d”n Kelompok Perl”ku”n

y”itu kelompok mencit bunting model

preekl”mpsi” deng”n perl”ku”n mend”p”t L-Arginine.

D”ri d”t” peneliti”n did”p”tk”n b”hw” rer”t” Di”meter Arteri Spir”lis p”d” kelompok norm”l ”d”l”h 25.06 + 4.94 per µm2 , rer”t” Di”meter Arteri Spir”lis p”d”

45

kelompok preekl”mpsi” t”np” perl”ku”n ”d”l”h 16.64 + 3.68 per µm2 , d”n rer”t” Di”meter Arteri Spir”lis p”d” kelompok preekl”mpsi” deng”n perl”ku”n ”d”l”h 22.66+ 7,53 per µm2 .

Grafik 4.1. Gr” k Nil”i Rer”t” Di”meter Arteri Spir”lis

Gr” k di ”t”s menunjukk”n b”hw” rer”t” Di”meter Arteri Spir”lis p”d” kelompok neg”tif (kelompok norm”l) ”d”l”h tinggi (25.06+4.94/µm2), menurun p”d” kelompok preekl”mpsi” t”np” perl”ku”n (16.64+3.68/µm2) d”n meningk”t p”d” kelompok preekl”mpsi” deng”n perl”ku”n L-Arginine (22.66+ 7,53/µm2).

D”ri d”t” peneliti”n did”p”tk”n b”hw” rer”t” Keteb”l”n Arteri Spir”lis p”d” kelompok norm”l ”d”l”h 53.95+ 26.96 per µm2, rer”t” Di”meter Arteri Spir”lis p”d” kelompok preekl”mpsi” t”np” perl”ku”n ”d”l”h 96.50 + 16.66 per µm2, d”n rer”t” Di”meter Arteri Spir”lis p”d” kelompok preekl”mpsi” deng”n perl”ku”n ”d”l”h 62.79+ 8.04per µm2 .

Rerata Diameter Arteri Spiralis

Rerata Ketebalan Arteri Spiralis

77

NPar Tests

Kruskal-Wallis Test

Ranks

Kelompok N Me”n R”nk

Keteb”l”n_Arteri_Spir”lis Kontrol(-) 10 10.90 Kontrol(+) 10 25.10

Perl”ku”n 10 10.50

Tot”l 30

Test Statisticsa,b

Keteb”l”n_Arteri_ Spir”lis

Chi-Squ”re 17.852

df 2

Asymp. Sig. .000 ”. Krusk”l W”llis Test

78

NPAR TESTS

NPar Tests

Mann-Whitney Test

Ranks

Kelompok N Me”n R”nk Sum of R”nks

Keteb”l”n_Arteri_Spir”lis Kontrol(-) 10 5.90 59.00

Kontrol(+) 10 15.10 151.00

Tot”l 20

Test Statisticsb

Keteb”l”n_Arteri_ Spir”lis

M”nn-Whitney U 4.000

Wilcoxon W 59.000

Z -3.477

Asymp. Sig. (2-t”iled) .001 Ex”ct Sig. [2*(1-t”iled Sig.)] .000”

”. Not corrected for ties.

79

NPar Tests

Mann-Whitney Test

Ranks

Kelompok N Me”n R”nk Sum of R”nks

Keteb”l”n_Arteri_Spir”lis Kontrol(+) 10 15.50 155.00

Perl”ku”n 10 5.50 55.00

Tot”l 20

Test Statisticsb

Keteb”l”n_Arteri_ Spir”lis

M”nn-Whitney U .000

Wilcoxon W 55.000

Z -3.781

Asymp. Sig. (2-t”iled) .000 Ex”ct Sig. [2*(1-t”iled Sig.)] .000”

”. Not corrected for ties.

80

NPar Tests

Mann-Whitney Test

Ranks

Kelompok N Me”n R”nk Sum of R”nks

Keteb”l”n_Arteri_Spir”lis Kontrol(-) 10 10.50 105.00

Perl”ku”n 10 10.50 105.00

Tot”l 20

Test Statisticsb

Keteb”l”n_Arteri_ Spir”lis

M”nn-Whitney U 50.000

Wilcoxon W 105.000

Z .000

Asymp. Sig. (2-t”iled) 1.000 Ex”ct Sig. [2*(1-t”iled Sig.)] 1.000”

”. Not corrected for ties.