26
BAB III METODE PENGUJIAN
3.1 Tempat
Analisis bakteri Escherichia Coli pada air minum dilakukan di Laboratorium yang bertempat Balai Teknik Kesehatan Lingkungan dan
Pengendalian Penyakit BTKLPP yang bertempat di Jalan K.H Wahid Hasyim No.15 Medan.
3.2 Sampel, Alat, dan Bahan 3.2.1 Sampel
Sampel dengan kode 216BAM adalah air minum dari Kabupaten Balige.
3.2.2 Alat
1. Peralatan yang digunakan untuk pembuatan media terdiri dari autoklafolabtech, beaker glass, hot plateolabtech, magnetic strirer, neraca
analitispioneer, pipa volum , petri dan spatula.
2. Peralatan yang digunakan untuk pengujian terdiri dari bola karet, inkubator 35
CIncucell, inkubator 44 CImperial III, jarum ose, lampu Bunsen,
ovenMemmert, pipet volume, rak tabung, tabung durham dan tabung reaksi.
3.2.3 Bahan
Bahan-bahan yang digunakan terdiri dari aquadest, Media Brilliant Green Lactose Broth, Lactose Broth, Media Tryptone
Universitas Sumatera Utara
27
3.3 Prosedur
3.3.3 Pembuatan Media
1. Pembuatan Media Lactose Broth Single Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 gr. Dimasukkan
kedalam Beaker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 1 liter.Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan
kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
C selama 15
menit, setalh dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.
2. Pembuatan Media Lactose Broth Double Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 26 gr. Dimasukkan
kedalam beaker glass, dilarutkan kedalam akuades sebanyak 500ml. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan
kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
C selama 15 menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.
3. Pembuatan Media Brilliant Green Lactose Broth Ditimbang seksama Brillian green lactose Broth sebanyak 40 gr.
Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-
masing 10 ml. Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
C selama 15 menit, setalh dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering. 4. Pembuatan Media Tryptone
Universitas Sumatera Utara
28 Ditimbang seksama media Tryptone sebanyak 15 gr. Dimasukkan
magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai homogen. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 10 ml.
Disterilkan di dalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121 C selama 15
menit, setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.
3.4 Uji Pendugaan