Genangi safranin selama 1-2 menit.
Cuci kembali sediaan dengan air mengalirair kran, lalu keringkan di
udara.
Setelah kering lihat di bawah mikroskop.
c. Penanaman Bakteri pada MSA dan EMB
Setelah dilakukan pewarnaan gram dan dilihat di bawah mikroskop,
maka diketahuilah bakteri tersebut gram positif atau gram negatif. Sehingga bakteri yang ditanam pada MSA dan EMB adalah bakteri
batang gram positif dan batang gram negatif.
Panaskan ose sampai pijar, lalu dinginkan.
Ambil bakteri dari biakan agar darah atau mc conkey.
Inkubasikan dalam inkubator selama 18-24 jam.
d. Uji Indol
Panaskan ose sampai pijar, lalu dinginkan.
Ambil satu ose biakan dari satu koloni terpisah pada EMB atau MSA.
Lalu masukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi medium cair yang
kaya akan triptofan dan dikocok sampai bakteri terlepas dari ose.
Inkubasi pada inkubator dengan suhu 37° selama 24 jam.
Setelah diinkubasi, tetesi dengan 3 tetes regensia covac, apabila hasil positif maka akan terbentuk cincin warna merah pada permukaan
biakan.
e. Uji Methyl Red
Sterilkan ose dengan memanaskannya sampai pijar, lalu dinginkan.
Ambil satu ose biakan bakteri dari satu koloni terpisah pada EMB
atau MSA.
Lalu masukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi medium MRVP. Kocok sampai bakteri terlepas dari ose.
Inkubasi pada inkubator selama 24 jam dengan suhu 37°C.
Setelah diinkubasi, tetesi dengan reagensia methyl red sebanyak 5
tetes. Dikatakan hasil positif apabila tejadi perubahan warna menjadi warna merah.
Universitas Sumatera Utara
f. Uji Voges-Proskauer
Panaskan ose sampai pijar, lalu dinginkan.
Ambil satu ose biakan bakteri dari satu koloni terpisah pada EMB
atau MSA.
Lalu masukkan ke dalam tabung yang berisi medium MRVP. Kocok sampai bakteri terlepas dari ose.
Inkubasi pada inkubator selama 24 jam dengan suhu 37°C.
Setelah diinkubasi, teteskan 3 tetes naphtol 5 dan 1 tetes KOH 40.
Tunggu selama 15 menit.
Hasil dikatakan positif apabila terjadi perubahan warna menjadi warna merah bata.
g. Uji Citrat
Panaskan ose sampai pijar, lalu dinginkan.
Ambil satu ose bakteri dari koloni terpisah pada EMB atau MSA.
Tanamlah bakteri pada tabung reaksi yang berisi agar miring
simmon’s citrate. Caranya digoreskan satu garis di atas agar miring.
Inkubasi pada inkubator selama 24 jam dengan suhu 37°C.
Setelah diinkubasi, bacalah hasilnya. Hasil dikatakan positif apabila ada perubahan warna agar dari hijau menjadi biru tua.
h. Uji Urease
Panaskan ose sampai pijar, lalu dinginkan.
Ambil satu ose bakteri dari koloni terpisah pada EMB atau MSA.
Tanamlah bakteri pada tabung reaksi yang berisi medium urease
dengan cara digoreskan secara zig-zag pada bagian yang miring.
Inkubasikan pada inkubator selama 24 jam dengan suhu 37°C.
Setelah diinkubasi, bacalah hasilnya. Hasil dikatakan positif apabila ada perubahan warna pada medium menjadi warna merah muda.
i. Uji Motilitas
Panaskan ose sampai pijar, lalu dinginkan.
Ambil satu ose bakteri dari koloni terpisah pada EMB atau MSA.
Universitas Sumatera Utara
Tanamlah bakteri pada medium semisolid dengan cara ditusukkan
tegak lurus.
Inkubasikan pada inkubator dengan suhu 37°C selama 24 jam.
Setelah diinkubasi, baca hasilnya. Dikatakan positif apabila ada penyebaran pertumbuhan bakteri dan bekas tusukan tidak jelas.
j. Uji TSI