Variabel Penelitian Variabel Bebas Definisi Operasional Bahan dan Alat Penelitian .1 Bahan Penelitian

− Kelompok VIII: kontrol negatif ektrak kulit buah delima tanpa suspensi P.gingivalis = 1 sampel Jumlah sampel = 26 sampel

3.4 Variabel Penelitian Variabel Bebas

− Ekstrak kulit buah delima dengan konsentrasi 25, 12,5, 6,25, 3,125 , 1,625 , dan 0,8. Variabel Tergantung − Pertumbuhan bakteri P.gingivalis pada media Tryptic Soy Agar dengan pengukuran nilai KHM dan KBM Variabel Terkendali − Asal buah delima Kota Sawahlunto − Konsentrasi etanol yang dipakai 70 − Suspensi P. gingivalis ATCC 33277 − Jenis media pembiakan bakteri Tryptic Soy Agar − Suhu inkubasi P. gingivalis 37 o C − Waktu yang digunakan untuk mengamati pertumbuhan atau pembiakan P. gingivalis yaitu 24 jam Variabel Tak Terkendali − Lama penyimpanan buah delima − Lama penyimpanan, pengiriman, dan suhu saat pengiriman bahan coba ektrak kulit buah delima ke laboratorium.

3.5 Definisi Operasional

− Ekstrak kulit buah delima adalah ekstrak yang diperoleh dengan melakukan ekstraksi kulit buah delima yang telah diperkolasi dengan pelarut etanol 70 sehingga diperoleh ekstrak kental buah delima. Universitas Sumatera Utara − Koloni Porphyromonas gingivalis adalah bakteri yang berasal dari stem cell P. gingivalis ATCC 33277 dan kemudian dikultur pada media Tryptic Soy Agar dalam suasana anaerob − Konsentrasi Hambat Minimum KHM adalah konsentrasi minimal bahan coba yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri setelah diinkubasi selama 24 jam dan tidak tumbuh koloni bakteri pada media perbenihan dengan menggunakan metode dilusi. − Konsentrasi Bunuh Minimum KBM adalah konsentrasi minimal bahan coba yang dapat membunuh 99,9 atau 100 bakteri setelah dilakukan uji dilusi selama 24 jam, dengan menghitung jumlah koloni bakteri pada media padat menggunakan metode Drop Plate Miles Mesra. 3.6 Bahan dan Alat Penelitian 3.6.1 Bahan Penelitian − Buah delima sebanyak 5000 gram − Pelarut etanol 70 sebanyak 5 liter Kimia Farma, Indonesia − Suspensi Porphyromonas gingivalis ATCC 33277 − Media Tryptic Soy Agar Difco, USA − Tryptic Soy Broth − NaCl 0,9 1 liter Kimia Farma, Indonesia − Aquadest 1 liter 3.6.2 Alat Penelitian − Lemari pengering − Kertas perkamen − Vaccum Rotary Evaporator Heidolph VV 2000, Germany − Perkolator − Kapas Bio Panca, Indonesia − Alumunium foil 1 gulungan − Erlenmeyer Pyrex, USA Universitas Sumatera Utara − Destilator − Lemari penyimpan petri − Piring petri Pyrex, Japan − Blender Panasonic, Japan − Kertas saring Whatman no.42, England − Autoklaf Tomy, Japan − Inkubator Co 2 Sanyo, Japan − Electronic Balance Ohyo JP2 6000, Japan − Vortexwhirli mixer Iwaki model TM 100, Japan − Pipet mikro dan tips Gilson, France − Kaca pembesar Ootsuka ENV-CL, Japan − Ose − Spiritus 3.7 Prosedur Pengambilan dan Pengumpulan Data 3.7.1 Prosedur Pembuatan Ekstrak Kulit Buah Delima