Perbandingan Aktivitas Antijamur Antara Ekstrak Etanol Dari Serbuk Dan Serbuk Nano Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz & Pav.) Terhadap Jamur Candida Albicans

(1)

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIJAMUR ANTARA

EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO

DAUN SIRIH MERAH (

Piper crocatum

Ruiz & Pav.)

TERHADAP Jamur

Candida albicans

SKRIPSI

Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi Pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

OLEH:

DELVIANA

NIM 121524016

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN


(2)

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIJAMUR ANTARA

EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO

DAUN SIRIH MERAH (

Piper crocatum

Ruiz & Pav.)

TERHADAP Jamur

Candida albicans

SKRIPSI

Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi Pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

OLEH:

DELVIANA

NIM 121524016

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN


(3)

PENGESAHAN SKRIPSI

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIJAMUR ANTARA

EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO

DAUN SIRIH MERAH (

Piper crocatum

Ruiz & Pav.)

TERHADAP Jamur

Candida albicans

OLEH:

DELVIANA

NIM 121524016

Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

Pada Tanggal: 11 Februari 2015 Disetujui oleh:

Pembimbing I, Panitia Penguji:

Prof. Dr. Karsono, Apt. Prof. Dr. Urip Harahap, Apt. NIP 195409091982011001 NIP 195301011983031004

Prof. Dr. Karsono, Apt. Pembimbing II, NIP 195409091982011001

Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt. Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 197812052010121004 NIP 195707231986012001

Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt. NIP 195008221974121002

Medan, Maret 2015 Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara Wakil Dekan I,


(4)

KATA PENGANTAR

Bismillahirrahmanirrahim,

Puji syukur penulis ucapkan kehadirat Allah SWT atas segala limpahan rahmat dan karunianya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini. Shalawat beriring salam untuk Rasulullah Muhammad SAW sebagai suri tauladan dalam kehidupan penulis. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan judul Perbandingan Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Nano Simplisia Dengan Serbuk Simplisia Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav.) Terhadap Jamur Candida albicans.

Pada kesempatan ini, penulis dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Karsono, Apt., dan Bapak Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt. yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan, yang telah menyediakan fasilitas kepada

penulis untuk melakukan penelitian. Bapak Prof. Urip Harahap, Apt., Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., Bapak Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt., selaku dosen

penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Ibu Dra. Erly Sitompul, M.Si., Apt., selaku Kepala Laboratorium Mikrobiologi USU yang telah memberikan izin menggunakan fasilitas untuk penulis sehingga dapat mengerjakan dan menyelesaikan penelitian ini. Yang terkasih, Ayahanda Mansyur Matsyah dan Ibunda Wardiana Yusuf, S.E.


(5)

yang telah memberikan cinta dan kasih sayang yang tidak ternilai dengan apapun, motivasi beserta doa yang tulus dan tak pernah henti. Saudaraku tercinta Safrizal, Dewi Novita, Syahrul dan Zulfidiana dan seluruh keluarga besar yang selalu setia memberikan doa dan dukungan penuh kepada penulis. Akhirnya, penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.

Medan, Maret 2015 Penulis,

Delviana 121524016


(6)

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIJAMUR ANTARA EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO DAUN SIRIH MERAH

(Piper crocatum Ruiz & Pav.) TERHADAP JAMUR Candida albicans

ABSTRAK

Latar Belakang: Candida albicans merupakan jamur yang sering menginfeksi manusia, yaitu penyakit kandidiasis. Tanaman Sirih merah merupakan salah satu tanaman obat yang digunakan sebagai antiseptik, antioksidan, dan fungisida. Ekstrak etanol daun sirih merah memiliki aktivitas antijamur terhadap Candida albicans. Teknologi nano dalam dapat meningkatkan kelarutan senyawa aktif, mengurangi dosis pengobatan dan meningkatkan absorbsi obat herbal.

Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk dan serbuk nano daun sirih merah (Piper crocatum Ruitz & Pav.) terhadap jamur Candida albicans.

Metode: Daun sirih merah dicuci bersih, ditiriskan lalu dikeringkan pada suhu 40oC. Sebagian diserbukkan dengan blender dan sebagian lain dengan teknologi nano High Energy Ballmill. Pembuatan ekstrak etanol dilakukan dengan metode maserasi. Pengujian aktivitas antijamur dilakukan dengan metode difusi agar. Pencadang kertas yang mengandung ekstrak etanol daun sirih merah dengan konsentrasi 1; 2; 3; 4; 5; 6; 10; 20; 30; 40; 50; 100; 125; 150; dan 175 mg/ml diletakkan di atas permukaan media biakan jamur, diinkubasi pada suhu 25oC selama 48 jam. Setelah diinkubasi, diameter hambat pertumbuhan jamur diukur dengan menggunakan jangka sorong. Analisis statistika dilakukan menggunakan perangkat lunak SPSS dengan uji T dan dilanjutkan dengan anava dua arah pada tingkat kepercayaan 95%.

Hasil: Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol serbuk nano dan serbuk daun sirih merah memiliki aktivitas antijamur dengan konsentrasi hambat minimum yaitu masing-masing 2 mg/ml dan 5 mg/ml. Konsentrasi efektif pada ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 125 mg/ml sedangkan konsentrasi efektif ekstrak etanol serbuk yaitu >175 mg/ml. Flukonazol sebagai kontrol positif menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans dengan KHM 25 µg/ml.

Kesimpulan: Ekstrak serbuk nano daun sirih merah memiliki aktivitas antijamur lebih kuat dibandingkan ekstrak serbuk daun sirih merah.

Kata Kunci: Sirih Merah, Piper crocatum, Teknologi Nano, Antijamur, Candida albicans


(7)

THE COMPARISON OF ANTIFUNGAL ACTIVITY BETWEEN ETHANOL EXTRACT OF POWDER AND NANO POWDER OF

Piper crocatum Ruiz & Pav. LEAVES AGAINST

Candida albicans ABSTRACT

Background: Candida albicans is the most of infected fungi on human, which is known as Candidiasis. The Red betel (Piper crocatum) is one of the medicinal plants used for antiseptic, antioxidant, and antifungal. Ethanol extract of

P.crocatum leaves has a antifungal activity against C.albicans. Nano technology can improve the solubility of the active compounds, reducing treatment dose and increasing herbal medicine absorption.

Objective: This study aimed to compare the antifungal activity of the ethanol extracts obtained from powder and nano powder of P. crocatum against Candida albicans.

Methods: P. crocatum leaves were washed, drained and dried at 40oC. A part of the dried plant material were reduced to powder with electrical grinder and the other part with nano technology High Energy Ballmill. The ethanol extract of plant was made by maceration. Antifungal activity test was performed by agar diffusion. Paper disks contained the ethanol extract with certain concentrations of 1; 2; 3; 4; 5; 6; 10; 20; 30; 40; 50; 100; 125; dan 175 mg/ml was placed on the surface of the fungi culture medium, and then incubated at 25°C for 48 hours. After incubation, the diameter of inhibition was measured using calipers. Statistical analysis was performed using SPSS software with T test followed by two-way anova at 95% confidence level.

Results: The results showed that the ethanol extract of nano powder and powder of P. crocatum leaves to have antifungal activity with minimum inhibitory concentration of 2 mg/ml and 5 mg/ml, respectively. The effective concentration of the ethanol extract of nano powder was 125 mg/ml while the effective concentration of powder extract was above 175 mg/ml . Fluconazol served as a positive control inhibited the growth of C.albicans with the MIC of 25 μg/ml. Conclusion: The ethanol extract of P. crocatum nano powder have a stronger antifungal activity than the extract of P.crocatum powder.

Key Words: Red Betel, Piper crocatum, Nano Technology, Antifungal, Candida albicans.


(8)

DAFTAR ISI

Halaman

JUDUL ... i

LEMBAR PENGESAHAN ... iii

KATA PENGHANTAR ... iv

ABSTRAK ... vi

ABSTRCT ... vii

DAFTAR ISI ... viii

DAFTAR GAMBAR ... xii

DAFTAR TABEL ... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiv

BAB I PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Kerangka Pikir ... 3

1.3 Perumusan Masalah ... 3

1.4 Hipotesis ... 3

1.5 Tujuan Penelitian ... 4

1.6 Manfaat Penelitian ... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5

2.1 Jamur ... 5

2.1.1 Fase pertumbuhan jamur ... 5

2.1.2 Jamur Candida albicans ... 6

2.1.3 Patogenesis dan patologi kandidiasis ... 7


(9)

2.2 Tanaman Sirih Merah ... 8

2.2.1 Morfologi sirih merah ... 8

2.2.2 Kandungan kimia ... 8

2.2.3 Khasiat daun sirih merah ... 9

2.3 Ekstraksi ... 9

2.4 Flukonazol ... 11

2.5 Nanopartikel ... 11

2.6 Pengujian Aktivitas Antijamur ... 13

BAB III METODE PENELITIAN ... 15

3.1 Alat dan Bahan ... 15

3.1.1 Alat-alat ... 15

3.1.2 Bahan ... ... 15

3.1.3 Jamur uji ... ... 16

3.2 Pengambilan dan Pengolahan Sampel ... 16

3.2.1 Pengambilan sampel ... 16

3.2.2 Identifikasi sampel ... 16

3.2.3 Pengolahan sampel ... 16

3.2.4 Pembuatan serbuk nano daun sirih merah ... 17

3.3 Pembuatan Ekstrak Etano Daun Sirih Merah Secara Maserasi ... 18

3.4 Pemeriksaan Organoleptis Daun Sirih Merah ... 18

3.4.1 Pemeriksaan organoleptis daun sirih merah ... 18

3.4.2 Pemeriksan partikel serbuk nano dan serbuk daun sirih merah ... 18 3.4.3 Pemeriksaan organoleptis ekstrak etanol daun sirih


(10)

3.5 Pembuatan Media ... 19

3.5.1 Media Mueller Hinton agar (MHA) ... 19

3.5.2 Larutan NaCl 0,9 % ... 19

3.5.3 Pembuatan larutan flukonazol 25µg ... 19

3.5.4 Pembuatan agar miring ... 20

3.6 Pembiakan Jamur ... 20

3.6.1 Pembiakan stok kultur ... 20

3.6.2 Penyiapan inokulum ... 20

3.7 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Serbuk Nano dan Serbuk Daun Sirih Merah ... 20

3.8 Pengujian Aktivitas Antijamur Fluonazol dan Etanol 35 % terhadap Jamur Candida albicans ... 21

3.9 Pengujian Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Serbuk Nano dan Serbuk Daun Sirih Merah Terhadap Jamur Candida albicans ... 21

3.10 Analisis Statistik ... 22

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 23

4.1 Identifikasi Tumbuhan ... 23

4.2 Identifikasi Organoleptis Daun Sirih Merah ... 23

4.2.1 Organoleptis daun sirih merah ... 23

4.2.2 Partikel serbuk nano dan serbuk daun sirih merah ... 23

4.2.3 Organoleptis ekstrak etanol daun sirih merah ... 23

4.3 Reidentifikasi Jamur ... 25

4.4 Uji Aktivitas Antijamur Flukonazol dan Etanol ... 25

4.5 Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah .. 26


(11)

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1.1 Kerangka pikir penelitian ... 3 Gambar 4.1 Karakteristik simplisia daun sirih merah di bawah

mikroskop pemindai elektron ... 24 Gambar 4.2 Gambar koloni jamur Candida albicans ... 25 Gambar 4.3 Pengaruh konsentrasi ekstrak etanol daun sirih merah


(12)

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1 Karakteristik esktrak etanol daun sirih merah ... 24 Table 4.2 Diameter zona hambat ekstrak etanol serbuk nano daun

sirih merah dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans ... 26


(13)

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman Lampiran 1 Hasil identifikasi tumbuhan ... 34 Lampiran 2 Tanaman sirih merah ... 35 Lampiran 3 Hasil penimbangan, rendemen, dan susut pengeringan .. 36 Lampiran 4 Bagan kerja pengolahan serbuk daun sirih merah... 37

Lampiran 5 Bagan kerja pengolahan ekstrak etanol serbuk nano dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah ... 38

Lampiran 6 Bagan pengujian aktivitas antijamur ... 39

Lampiran 7 Gambar hasil uji aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah terhadap jamur

Candida albicans ... 40

Lampiran 8 Gambar hasil uji aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk daun sirih merah terhadap jamur

Candida albicans ... 41

Lampiran 9 Gambar hasil uji aktivitas antijamur antijamur flukonazol dan etanol 70 % terhadap Candida albicans . 42

Lampiran 10 Hasil pengukuran diameter daerah hambat ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah ... 43

Lampiran 11 Hasil pengukuran diameter daerah hambat ekstrak etanol serbuk daun sirih merah ... 44

Lampiran 12 Normalitas dariserbuk nano daun sirih merah dan serbuk daun sirih merah ... 45

Lampiran 13 Analisa stastistik dengan menggunakan analisa variansi


(14)

BAB I PENDAHULUAN

1.1Latar Belakang

Jamur Candida albicans adalah mikroorganisme yang mudah tumbuh di kulit, mulut, saluran cerna dan vagina. Jamur ini merupakan penyebab tersering infeksi jamur pada manusia (Kumar, dkk., 2010). Kandiasis adalah suatu penyakit infeksi yang disebabkan oleh jamur Candida. Ada beberapa macam kandidiasis antara lain kandidiasis kulit, kandidiasis kuku, kandidiasis vagina dan kandidiasis paru. Terapi yang digunakan untuk penyakit kandidiasis biasanya ditangani dengan menggunakan obat antifungi contohnya flukonazol yang memiliki efek samping yang cukup aman dibandingkan dengan obat yang lainnya (Jawetz, dkk., 2013). Namun dikarenakan flukonazol memiliki toksisitas yang kecil dan harganyapun jauh lebih mahal. Oleh karena itu diperlukan obat alternatif yang lebih aman,berkhasiat dan murah (Santoso, dkk., 2010).

Penggunaan tanaman obat lebih disukai karena memiliki efek samping yang lebih kecil dibandingkan dengan obat sintetik dan harganya relatif lebih murah. Bahan tumbuhan yang diduga memiliki sifat antifungi diantaranya Allium sativum Linn, Alium cepa, Piper betle Linn, Piper crocatum Ruiz & Pav., dan lainnya (Rahmah dan Aditya, 2010; Santoso, dkk., 2010; Sulistiyani dkk., 2007). Tanaman sirih merah merupakan salah satu tanaman obat yang digunakan sebagai antiseptik, antioksidan, antifungi, memiliki sifat menahan pendarahan, menyembuhkan luka pada kulit, sebagai obat saluran cerna dan dapat menguatkan gigi (Reveny, 2011). Kandungan kimia yang terdapat dalam daun sirih merah


(15)

adalah flavonoid, alkaloid, tannin, triterpenoid, saponin dan minyak atsiri. Senyawa kimia tersebut memiliki efek antijamur (Nisa, dkk., 2014; Sulistiyani dkk., 2007). Menurut penelitian Reveny (2011) bahwa tumbuhan sirih merah menunjukkan aktivitas antifungi terhadap jamur Candida albicans dan ekstrak etanol daun sirih merah memiliki aktivitas antijamur terhadap Candida albicans. Bahan nanopartikel banyak digunakan pada sistem penghantaran obat terbaru dalam berbagai bentuk sediaan. Sifat pembawa bahan nanopartikel mempunyai berbagai keuntungan seperti meningkatkan efek absorpsi, meningkatkan penetrasi zat aktif dan bersifat lepas terkendali. Teknologi nano dalam bidang farmasi mempunyai berbagai keunggulan dibandingkan dengan herbal yang tidak dinanokan antara lain dapat meningkatkan kelarutan senyawa atau zat aktif, mengurangi dosis pengobatan dan meningkatkan absorbsi obat herbal (Rismana, dkk., 2014).

Aktivitas antijamur dari tumbuhan obat dapat di optimasi melalui teknologi nano partikel. Teknologi ini memungkinkan ukuran simplisia dibuat dalam 10 – 1000 nm. Dengan demikian, kelarutan zat aktif dalam bahan meningkat sehingga aktivitas farmakologi menjadi kuat (Mohanraj dan Chen, 2006).

Berdasarkan uraian diatas peneliti tertarik untuk melakukan perbandingan aktivitas antijamur antara ekstrak etanol dari serbuk dan serbuk nano daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans secara mikrobiologi dengan menggunakan metode difusi agar dan pelarut etanol 70%.


(16)

1.2 Kerangka Pikir Penelitian

Kerangka pikir penelitian ditunjukkan pada Gambar 1.1 di bawah ini:

Variabel bebas Variabel terikat Parameter

Gambar 1.1 Kerangka pikir penelitian

1.3 Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka permasalahan dalam penelitian ini dirumuskan sebagai berikut:

a. apakah ekstrak etanol serbuk nano dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah memiliki aktivitas antijamur terhadap jamur Candida albicans? b. bagaimana perbandingan aktivitas antijamur antara ekstrak etanol serbuk

nano dan serbuk daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans?

1.4 Hipotesis

Dari masalah yang dirumuskan diatas, hipotesis dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:

a. ekstrak etanol serbuk nano dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah memiliki aktivitas antijamur terhadap jamur Candida albicans.

Ekstrak etanol daun sirih merah dengan berbagai konsentrasi

Diameter daya hambat

Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)


(17)

b. aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah lebih tinggi daripada ekstrak etanol serbuk daun sirih merah terhadap jamur

Candida albicans.

1.5 Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk:

a. mengetahui aktivitas antijamur dari ekstrak etanol serbuk nano dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans.

b. mengetahui perbandingan aktivitas antijamur antara ekstrak etanol serbuk nano dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans.

1.6 Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan dapat dimanfaatkan sebagai rujukan dan sumber informasi bagi masyarakat tentang aktivitas antijamur dari daun sirih merah yang dibuat dengan ukuran nano terhadap jamur Candida albicans.


(18)

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA 2.1Jamur

Jamur adalah organisme eukariotik yang tumbuh dengan cara membentuk tunas (khamir) atau filament yang di sebut hifa (kapang) (Kumar, dkk., 2010). Pertumbuhan dalam bentuk kapang terjadi melalui terbentuknya koloni – koloni yang terdiri atas tubulus – tubulus silinder yang bercabang disebut hifa. Kapang biasa berdiameter 2 µm hingga 10 µm. Massa hifa yang saling bertautan dan bertambah disebut miselium (Jawetz, dkk., 2013).

Khamir terdiri dari sel – sel tunggal, biasanya berbentuk sferis dan ellipsoid. Khamir biasa berdiameter mulai 3 µm hingga 15 µm. Kebanyakkan khamir bereproduksi dengan pertunasan. Beberapa spesies menghasilkan tunas yang secara khas tidak dapat melepaskan diri dan memanjang, proses pertunasan yang berkelanjutan ini menghasilkan rantai sel khamir yang panjang dan disebut pseudohifa (Jawetz, dkk., 2013).

2.1.1 Fase pertumbuhan jamur

Jamur mengalami pertumbuhan yang dapat dibagi dalam 4 fase menurut (Pratiwi, 2008) yaitu:

a. Fase lag

Pada saat dipindahkan ke media yang baru, jamur tidak langsung tumbuh dan membelah, meskipun kondisi media sangat mendukung untuk pertumbuhan. Jamur biasanya akan mengalami masa penyesuaian untuk menyeimbangkan pertumbuhan.


(19)

Selama fase ini, populasi meningkat dua kali pada interval waktu yang teratur. Jumlah koloni jamur akan terus bertambah seiring lajunya aktivitas metabolisme sel.

c. Fase stasioner

Pada fase ini jamur berhenti dan terjadi keseimbangan antara jumlah sel yang membelah dengan jumlah sel mati.

d. Fase kematian

Pada fase ini, jumlah sel yang mati meningkat. Faktor penyebabnya adalah ketidaktersediaan nutrisi dan akumulasi produk buangan yang toksis.

2.1.2 Jamur Candida albicans

Pada sediaan jaringan, Candida albicans berbentuk khamir, dan pseudohifa. Pseudohifa adalah sel – sel tunas yang tidak dapat melepasan diri sehingga mebentuk rantai – rantai pendek. Semua bentuk dapat berada di satu jaringan. (Kumar, dkk., 2010: Pratiwi, 2008). Candida albicans merupakan flora normal yang membentuk koloni di kulit, membran mukosa, dan saluran gastrointensinal (Jawetz, dkk., 2013).

Menurut Ali (2008) taksonomi dari jamur Candida albicans adalah sebagai berikut:

Kingdom : Fungi Filium : Ascomycota Kelas : Ascomycetes Ordo : Saccharomycetales Famili : Saccharomycetaceae Genus : Candida


(20)

Spesies : Candida albicans

2.1.3 Patogenesis dan patologi kandidiasis

Kandidiasis superfisial (kutaneus atau mukosal) di diagnosis melalui adanya peningkatan jumlah populasi Candida dan kerusakan kulit atau epitel akibat infeksi jamur. Kandidiasis sistemik terjadi ketika Candida memasuki aliran darah dan sistem pertahanan pejamu. Candida dapat menyerang ginjal melalui sirkulasi darah, melekat ke katup jantung prostetik, atau menghasilkan infeksi kandidiasis hampir seperti arthritis, dan meningitis (Jawet, dkk., 2013).

Candida dapat tumbuh sebagai organisme komersal atau patogen. Jamur

Candida albicans mengembangkan mekanisme – mekanisme untuk cepat beradaptasi terhadap perubahan lingkungan pejamu baik akibat terapi antibiotik, respon imun, atau perubahan fisiologi pejamu. Candida dapat mengubah fenotipe

secara reversibel dan acak. Perubahan fenotipe melibatkan regulasi terpadu gen – gen spesifik sehingga mikroorganisme ini mampu beradaptasi dengan

lingkungan (Kumar, dkk., 2013).

2.1.4 Terapi yang digunakan untuk kandidiasis

Kandidiasis selaput lendir mulut dan bentuk kandidiasis mukokutan lain biasanya ditangani dengan nistatin topikal atau ketokonazol atau flukonazol oral. Sedangkan kandidiasis sistemik diterapi dengan amfoterisin B atau kombinasi amfoterisin B dengan flusitosin, flukonazol, atau caspofungin oral. Penyembuhan lesi kulit dipercepat dengan menghilangkan faktor pendukung seperti kelembapan berlebihan (Jawet, dkk., 2013).

2.2 Tanaman Sirih Merah 2.2.1 Morfologi sirih merah


(21)

Tumbuhan sirih merah merambat atau menjalar, panjangnya dapat mencapai sekitar 5 – 10 m, batang bulat, hijau merah keunguan, beruas dengan panjang ruas 3-8 cm, pada setiap buku tumbuh satu daun. Daun tunggal, kaku, duduk daun berseling, bentuk daun menjantung, permukaan helaian daun mengkilat, panjang 6,1 – 14,6 cm, lebar daun 4 – 9,4 cm, warna dasar daun hijau pada kedua permukaannya, bagian atas hijau dengan garis – garis merah jambu kemerahan, permukaan bagian bawah hijau merah tua keunguan. Tangkai daun hijau merah keunguan, panjang 2,1 – 6,2 cm, pangkal tangkai daun pada helaian daun agak ketengah sekitar 0,7 – 1 cm dari tepi daun bagian bawah (Astuti, dan Munawaroh, 2011).

Menurut Juliantina, dan kawan -kawan (2010) dan Backer dan Den (1936), taksonomi dari sirih merah adalah sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Divisi : Magnoliophyta (tumbuhan berbunga) Kelas : Magnoliopsida (berkeping dua/dikotil) Ordo : Piperales

Famili : Piperaceae Genus : Piper

Species : Piper crocatum Ruiz& Pav. 2.2.2 Kandungan kimia

Daun sirih merah mengandung senyawa alkaloid, saponin, tanin, flavonoid, dan minyak atsiri yang bermanfaat bagi kesehatan. Senyawa minyak atsiri yang terdapat dalam daun sirih merah seperti hidoksikavikol, kavikol,


(22)

kavibetol, allylprokatekol, karvakrol, eugenol, p-simen, sineole, karyofelen, kadimen, estragol, terpen dan fenil propeda (Utami dan Desty, 2013 ).

2.2.3 Khasiat sirih merah

Sirih merah berkhasiat untuk mengobati berbagai jenis penyakit, seperti diabetes melitus, hepatitis, batu ginjal, menurunkan kolesterol, mencegah stroke, asam urat, hipertensi, prostatitis, radang mata, keputihan, tukak lambung, kelelahan dan nyeri sendi. Senyawa utama dalam sirih merah, seperti flavonoid, alkaloid, tanin, dan minyak atsiri. Selain itu, tumbuhan ini juga mengandung karvakol dan eugenol. Karvakol bersifat disinfektan dan antijamur sehingga dapat digunakan sebagai obat antiseptik dan keputihan. Sementara itu, kandungan eugenol dapat digunakan untuk mengurangi rasa sakit (Utami dan Desty, 2013).

2.3 Ekstraksi

Ekstraksi merupakan suatu proses penarikan senyawa kimia dari jaringan tumbuhan ataupun hewan dengan menggunakan penyari tertentu. Terdapat beberapa macam metode ekstraksi, diantaranya adalah maserasi, perkolasi dan sokletasi (Ditjen POM, 1979), refluks, digesti, infus, dan dekok (Ditjen POM, 2000).

a. Maserasi

Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur ruangan (kamar). Maserasi kinetik berarti dilakukan pengadukan yang kontinu. Remaserasi berarti dilakukan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama dan seterusnya (Ditjen POM, 2000).


(23)

b. Perkolasi

Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna yang umum dilakukan pada temperatur ruangan. Prosesnya terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetasan/penampungan ekstrak), terus-menerus sampai diperoleh perkolat yang jumlahnya 1-5 kali jumlah bahan (Ditjen POM, 2000).

Keuntungan dari metode ini adalah dapat menarik bahan berkhasiat dari tanaman secara total. Kerugiannya adalah membutuhkan waktu yang lama dan memerlukan biaya yang mahal karena dibutuhkan sejumlah besar pelarut (Agoes, 2007).

c. Refluks

Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temparatur titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna (Ditjen POM, 2000).

d. Sokletasi

Sokletasi adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik (Ditjen POM, 2000).


(24)

Digesti adalah maserasi kinetik (dengan adanya pengadukan kontinu pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-50°C (Ditjen POM, 2000).

f. Infus

Infus adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur pada suhu 96-98°C selama waktu tertentu (15-20 menit) (Ditjen POM, 2000).

g. Dekok

Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (≥30°C) dan temperatur sampai titik didih air (Ditjen POM, 2000).

2.4 Flukonazol

Flukonazol merupakan obat antijamur golongan azol. Dimana mekanisme

kerja obat ini mengganggu sintesis ergosterol, melalui penghambatan enzim – enzim sitokrom P450. Dari beragam azol yang ada, flukonazol

mempunyai penetrasi yang paling baik terhadap sistem saraf pusat. Flukonazol juga dapat larut dalam air sehingga memungkinkan pemberian secara intravena (Jawet, dkk., 2013; Katzung, 2004).

2.5 Nanopartikel

Nanopartikel merupakan ukuran partikel berukuran 10 - 1000 nm yang memiliki sistem potensial yang baik untuk dapat menyempurnakan kelarutan suatu obat sehingga dapat diabsopsi dengan lebih cepat, sehingga cocok digunakan untuk memformulasikan suatu sediaan dengan sistem pengiriman obat terkontrol (Mohanraj dan Chen, 2006).


(25)

Nanopartikel didefinisikan sebagai disepersi partikulat atau partikel-partikel padat dengan ukuran dalam rentang 10-1000 nm. Tujuan utama dalam merancang nanopartikel sebagai sistem pemberian adalah untuk mengontrol ukuran partikel, sifat-sifat permukaan dan pelepasan bahan aktif secara farmakologik untuk mencapai tempat tindakan spesifik obat pada laju (Gupta dan Kompella, 2006).

Nanoteknologi berkembang semakin pesat seiring dengan meningkatnya kebutuhan industri akan ukuran partikel yang semakin kecil. Pemanfaatan teknologi nano tidak luput juga dalam dunia pengobatan herbal. Obat herbal yang berkhasiat biasanya diproduksi dengan menggunakan teknologi modern dan salah satunya adalah teknologi nano. Banyak negara di dunia yang telah mengenal teknologi nano sejak 1990-an, seperti Amerika Serikat dan Jepang. Di Indonesia teknologi nano baru populer sejak beberapa tahun yang lalu. Pemanfaatannya masih terbatas dan belum maksimal. Meskipun tergolong baru berkembang di Indonesia, namun teknologi nano kini telah merambah berbagai bidang, termasuk bidang produksi makanan dan minuman kesehatan yang berbasis herbal (Yadav, dkk., 2011).

Aplikasi teknologi nano dalam bidang farmasi mempunyai berbagai keunggulan antara lain dapat meningkatkan kelarutan senyawa, mengurangi dosis pengobatan dan meningkatkan absorbsi. Oleh karena itu, bahan nanopartikel banyak digunakan pada sistem penghantaran obat terbaru pada berbagai bentuk sediaan. Sifat pembawa bahan nanopartikel mempunyai berbagai keuntungan seperti meningkatkan efek absorpsi, meningkatkan penetrasi zat aktif dan bersifat lepas terkendali. Teknologi nano dalam bidang farmasi mempunyai berbagai


(26)

keunggulan antara lain dapat meningkatkan kelarutan senyawa atau zat aktif, mengurangi dosis pengobatan dan meningkatkan absorbsi obat herbal dibandingkan dengan herbal yang tidak dinanonisasi (Rismana, dkk., 2014).

2.6 Pengujian Aktivitas Antimikroba

Penentuan kepekaan mikroba terhadap antimikroba pada dasarnya dapat dilakukan melalui dua cara, yaitu:

a. Metode dilusi

Metode ini mengukur kadar hambat minimum (KHM) dan kadar bunuh minimum (KBM). Metode ini menggunakan antimikroba dengan kadar yang menurun secara bertahap, dengan media cair dan padat. Mikroba ini diinokulasi ke dalam media cair dan padat lalu diinkubasi. Dimasukkan larutan antimikroba dengan kadar yang menghambat atau mematikan. Uji kepekaan cara dilusi menggunakan 2 cara yaitu dengan menggunakan tabung reaksi dan microdilution plate (Pratiwi, 2008).

b. Metode difusi

Metode yang paling sering digunakan dan biasanya menggunakan cakram. Ada beberapa jenis cakram yaitu cakram kertas, dan cakram silinder. Cakram tersebut yang berisi sejumlah tertentu obat ditempatkan pada permukaan medium padat yang sebelumnya telah diinokulasi mikroba uji pada permukaannnya. Setelah diinkubasi, diameter zona hambatan sekitar cakram dipergunakan untuk mengukur kekuatan hambatan obat terhadap mikroorganisme uji (Pratiwi, 2008). c. Metode turbidimetri

Metode turbidimetri dilakukan berdasarkan hambatan pertumbuhan mikroba dalam media cair yang mengandung sampel uji dan mikroba uji.


(27)

Hambatan ditentukan dengan cara mengukur serapannya dengan menggunakan alat spektofotometer (Ditjen POM, 1979).


(28)

BAB III

METODE PENELITIAN

Penelitian ini dilakukan menggunakan metode eksperimental untuk membandingkan aktivitas antijamur antara ekstrak etanol dari serbuk dan serbuk nano daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans. Pengujian perbandingan aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk dan serbuk nano daun sirih merah dilakukan melalui beberapa tahap meliputi pengumpulan bahan, penyiapan simplisia dan pembuatan ekstrak etanol serbuk dan nano serbuk daun sirih merah, serta pengujian aktivitas antijamur terhadap jamur Candida albicans.

3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah kertas saring, kertas perkamen, batang pengaduk, aluminium foil, blender (Neowa), oven (Memmert), inkubator (Fischer Scientific), jarum ose, cawan petri, jangka sorong, pinset, pencadang kertas (Merck), pipet mikro (Eppendrof), autoklaf (Webeco), neraca analitik (Vibra AJ), Laminar Air Flow Cabinet (Astec HLF 1200 L), mikroskop (Olympus), lemari pendingin (Toshiba), mikroskop pemindai elektron (Tm 300 hitachi), spektrofotometer visibel (Dynamic), dan alat-alat gelas (pyrex).

3.1.2 Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini serbuk nano daun sirih merah, serbuk daun sirih merah, natrium klorida (NaCl) 0,9% (merck), Mueller Hinton


(29)

Agar (MHA) (merck), dektrosa(merck), Infus fluonazol (generik), etanol 70%, dan air suling.

3.1.3 Jamur uji

Mikroba uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah jamur Candida albicans yang di peroleh dari laboraturium Instituti Teknologi Bandung (ITB).

Sebelum digunakan, jamur direidentifikasi di bawah mikroskop dengan cara sebagai berikut: satu tetes kalium hidroksida (KOH) 10% diletakkan secara aseptik pada gelas objek lalu satu ose biakan koloni dihomogenkan atau disuspensikan, diratakan dan setelah itu dipanaskan dengan api yang kecil hingga keringkan. Morfologi diamati di bawah mikroskop (Siregar, 2005).

3.2 Pengambilan dan Pengolahan Sampel 3.2.1 Pengambilan sampel

Daun sirih merah (Piper crocatum Ruiz & Pav) diperoleh dari Desa Namoriam Kecamatan Pancur Batu, Kabupaten Deli Serdang, Medan, Sumatera Utara. Pengambilan sampel dilakukan secara purposif yaitu tanpa membandingkan dengan tanaman yang sama dari daerah lain.

3.2.2 Identifikasi sampel

Identifikasi sampel dilakukan di Herbarium “Bogoriense” Bidang Botani Pusat Penelitian dan Pengembangan Biologi Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Bogor.

3.2.3 Pengolahan sampel

Daun sirih merah dicuci dengan air mengalir, ditiriskan kemudian dikeringkan dalam oven pada suhu 40°C. Bahan kering sebagian dihaluskan


(30)

dengan menggunakan blender. Sebagian bahan kering lainnya diserbukkan dengan teknologi nano dengan alat High Energy Ballmill (HEM).

3.2.4Pembuatan serbuk nano daun sirih merah

Pembuatan serbuk nano daun Sirih Merah dilakukan di Pusat Penelitian Fisika-LIPI PUSPITEK Serpong. Prosedur pembuatan nanopartikel daun Sirih Merah sebagai berikut:

a. Dimasukkan bola-bola yang akan digunakan sebagai media penghancur ke dalam jar/vial HEM.

b. Bola-bola dengan ukuran diameter lebih besar dimasukkan terlebih dahulu, kemudian bola-bola dengan ukuran diameter lebih kecil, terakhir sampel dimasukkan.

c. Volume total dari bola-bola dan sampel yang bisa dimasukkan dalam jar/vial tidak boleh melebihi 2/3 volume jar/vial.

d. Sampel yang bisa digiling adalah material logam, keramik dan mineral alam, dan ukuran pada hasil giling tergantung pada material yang dimiling. e. BPR (Ball to Power Ratio) yang biasa digunakan adalah 20:1, 10:1, dan

8:1, contoh BPR 20:1 dimana setiap 20 g berat bola yang digunakan maka 1 g sampel dapat digiling.

f. Di tutup jar/vial yang telah berisi bola dan sampel dengan rapat.

g. Pasangkan jar/vial pada dudukan jar/vial yang terdapat dalam HEM. Dinyalakan HEM dengan mengoperasikan tombol-tombol elekronik.


(31)

3.3 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah Secara Maserasi

Sebanyak 100 g serbuk nano daun sirih merah dimaserasi dengan 750 ml etanol 70% dalam wadah tertutup rapat dan dibiarkan pada suhu kamar selama 5 hari sambil sesekali diaduk. Setelah 5 hari maserat dipisahkan dan ampas dimaserasi kembali dengan etanol 70%, filtrat dimasukkan dalam wadah dan disimpan di tempat yang terlindung dari cahaya selama 2 hari, kemudian dienap tuangkan (Ditjen POM, 1979). Perlakuan ekstraksi yang sama juga dilakukan pada serbuk daun sirih merah.

3.4 Pemeriksaan Organoleptis Daun Sirih Merah 3.4.1 Pemeriksaan organoleptis daun sirih merah

Daun sirih merah di karakterisasi secara organoleptis dengan mengamati bentuk, warna, dan bau, serta rendemannya.

3.4.2 Pemeriksaan partikel serbuk nano dan serbuk daun sirih merah

Pemeriksaan karakteristik serbuk nano dan serbuk daun sirih merah menggunakan mikroskop pemindai elektron. Mikroskop ini terdiri dari sebuah senapan elektron yang memproduksi berkas elektron pada tegangan dipercepat sebesar 2 – 30 kV. Berkas elektron tersebut dilewatkan pada beberapa lensa elekromagnetik untuk menghasilkan gambar berukuran kecil dari 10 nm pada sampel yang ditampilkan dalam bentuk film fotografi atau kedalam tabung layar (Angraeni, 2008).

3.4.3Pemeriksaan organoleptis ekstrak etanol daun sirih merah

ekstrak etanol dari daun sirih merah di karakterisasi secara organoleptis dengan mengamati bentuk, warna, dan bau, serta rendemannya.


(32)

3.5.1 Media Mueller Hinton agar (MHA) + dektose 2%

MHA mengandung kaldu daging 2,0 gram, kasein hidrolisat 17,5 gram, amidon 1,5 gram, agar-agar 13,0 gram, Dektrose 2,0 %.

Cara Pembuatan:

Sebanyak 34 g sediaan MHA + dektrose 2% ke dalam 1 liter air suling, lalu dipanaskan sambil diaduk hingga media larut dan menjadi jernih. Kemudian media disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit.

3.5.2 Larutan NaCl 0,9%

Sebanyak 0,9 g NaCl kemudian dilarutkan dalam air suling dan dicukupkan hingga 100 ml dan disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit (Ditjen POM RI, 1979).

3.5.3 Pembuatan larutan flukonazol 25 µg

Dipipet larutan infus flukonazol sebanyak 1 mL (konsentrasi 2mg/mL), dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 mL dan dicukupkan dengan akuadest steril hingga garis tanda (konsentarsi 200 µg/mL) larutan ini digunakan sebagai LIB I.

kemudian diipipet lagi l,25 mL dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml (25 µg/mL) larutan inilah yang digunakan sebagai kontrol positif.

3.5.4 Pembuatan agar miring

Ke dalam tabung reaksi dimasukkan 10 ml media MHA + 2 % dektose cair, tabung diletakkan sedemikian rupa sehingga kemiringan permukaan media lebih kurang 45o, mulut tabung ditutup dengan kapas dan dibiarkan memadat pada suhu kamar.

3.6 Pembiakan Jamur


(33)

Biakan jamur Candida albicans dari strain utama diinokulasikan pada permukaan media MHA+ 2% dektrose miring, biakan jamur tersebut diinkubasikan pada suhu 25oC selama 48 jam.

3.6.2 Penyiapan inokulum

Koloni jamur Candida albicans dari stok kultur di pindahkan secara aseptik ke dalam 10 ml larutan NaCl 0,9%, kemudian di homogenkan. Turbiditas inokulum jamur diatur menggunakan spektrofotometri pada panjang gelombang 580 nm hingga diperoleh transmitan 25% (Ditjen POM RI, 1995).

3.7 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Serbuk Nano Dan Serbuk Daun Sirih Merah

Sebanyak 2 g ekstrak etanol dari serbuk nano daun sirih merah, dilarutkan dengan 5 ml etanol 70% dan diencerkan dengan air suling steril hingga 10 ml (konsentrasi 200 mg/ml). Larutan tersebut diencerkan kembali hingga diperoleh konsentrasi ektrak etanol nano 1, 2, 3, 4, 5, 6, 10, 20, 30, 40, 50, 100, 125, 150, dan 175 mg/ml. Perlakuan yang sama juga dilakukan pada ekstrak etanol serbuk daun sirih merah.

3.8 Pengujian Aktivitas Antijamur Flukonazol dan Etanol 35 % terhadap Jamur Candida albicans.

Sebanyak 0,1 ml inokulum jamur Candida albicans dimasukkan ke dalam cawan petri yang sudah disterilkan lalu ditambahkan 15 ml media (MHA + dekstrose 2%) cair. Campuran dihomogenkan dan dibiarkan memadat pada suhu kamar. Pencadang kertas yang mengandung larutan etanol 35% digunakan sebagai kontrol negatif. Sedangkan Flukonazol 25 µg digunakan sebagai kontrol positif. diletakkan dipermukaan media, lalu cawan ditutup, dan dibungkus. Seluruh cawan petri diinkubasi pada suhu 25°C selama 48 jam (Ditjen POM, 1995). Setelah


(34)

diinkubasi, diameter zona hambat disekitar pencadang diukur menggunakan jangka sorong.

3.9 Pengujian Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Nano Simplisia dan Serbuk Simplisia Daun Sirih Merah terhadap Jamur Candida albicans.

Pengujian aktivitas antijamur ekstrak etanol nano simplisia dan ekstrak etanol serbuk simplisia daun sirih merah dilakukan menggunakan metode difusi agar. Sebanyak 0,1 ml inokulum jamur Candida albicans dimasukkan ke dalam cawan petri yang sudah disterilkan lalu ditambahkan 15 ml media (MHA + dekstrose 2%) cair. Campuran dihomogenkan dan dibiarkan memadat pada suhu kamar. Pencadang kertas yang mengandung ekstrak etanol nano simplisia dan ekstrak etanol serbuk simplisia daun sirih merah dengan berbagai konsentrasi, diletakkan dipermukaan media, lalu cawan ditutup, dan dibungkus. Seluruh cawan petri diinkubasi pada suhu 25°C selama 48 jam (Ditjen POM, 1995). Setelah diinkubasi, diameter zona hambat disekitar pencadang diukur menggunakan jangka sorong.

3.10 Analisis Statistika

Data diameter zona hambat ekstrak etanol daun sirih merah terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans disajikan sebagai nilai rata-rata dari tiga kali pengujian. Analisis stastitik dilakukan menggunakan perangkat lunak SPSS versi 17 dengan metode analisis variansi (anava). Dan dilanjutkan dengan uji T pada tingkat kepercayaan 95 %.


(35)

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan di Herbarium Bogoriense Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor, menunjukkan bahwa tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Daun sirih merah (Piper crocatum Ruiz & Pav.). Hasil dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 34.

4.2 Identifikasi Organolepstis Daun Sirih Merah 4.2.1 Organoleptis daun sirih merah

Secara makroskopis daun sirih merah berwarna hijau kemerahan dengan bau khas sirih yang menyengat, rasa sangat pahit, bentuk bulat memanjang membentuk jantung dengan bagian atas meruncing, bertepi rata dan keriput, panjang daun 12,3 cm dan lebar daun 7,2 cm. Rendemen simplisia daun sirih merah mencapai 20%.

4.2.2 Partikel serbuk nano dan serbuk daun sirih merah

Partikel gambar 4.1A menunjukkan bahwa serbuk nano daun sirih merah berbentuk persegi dengan permukaan yang halus dan berukuran 644 nm. Gambar 4.1B menunjukkan bahwa serbuk daun sirih merah di bawah mikroskop pemindai elektron berbentuk tidak beraturan dengan permukaan yang halus dan berukuran 164 µm.


(36)

A B

Gambar 4.1 Karakteristik simplisia daun sirih merah di bawah mikroskop pemindai elektron. A. serbuk nano ; B. serbuk.

4.2.3 Organoleptis ekstrak etanol daun sirih merah Tabel 4.1 Karakteristik ekstrak etanol daun sirih merah

Sampel Konsistensi Warna Bau Rasa Rendemen Ekstrak

etanol serbuk nano

Kental Coklat kehijauan pekat Khas sirih Pahit pedas 14,54% Ekstrak etanol serbuk

Kental Coklat kehijauan terang Khas sirih Pahit pedas 10,84%

Karakterisasi ekstrak etanol daun sirih merah dapat dilihat pada Tabel 4.1. Warna ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah lebih pekat dengan rendemen lebih tinggi dibandingkan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah. Hal ini kemungkinan karena senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah lebih banyak daripada ekstrak etanol serbuk daun sirih merah dan juga dikarenakan pengurangan ukuran partikel dapat meningkatkan


(37)

luas permukaan kontak zat aktif dengan pelarut, sehingga meningkatkan laju penarikan zat aktif (Aiache, dkk., 1993).

4.3 Reidentifikasi Jamur

Hasil reidentifikasi menunjukkan bahwa mikroorganisme uji (Gambar 4.2) memiliki pseudohifa, kelompok sel yang menguncup, dan klamidospora yang merupakan ciri khas dari Candida albicans (Volk dan Margaret, 1989).

Gambar 4.2 Gambar koloni jamur Candida albicans.

4.4 Uji Aktivitas Antijamur Flukonazol dan Etanol

Hasil penelitian menunjukkan bahwa flukonazol (25 µg) sebagai kontrol positif mampu menghambat pertumbuhan jamur dengan diameter zona hambat 8,30 mm, sebagai kontrol negatif etanol (35%) tidak menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans.


(38)

4.5 Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk nano dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah yang ditentukan berdasarkan diameter zona hambatnya terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans dapat dilihat pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2 Diameter zona hambat ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans.

Konsentrasi (mg/ml)

Diameter Daerah Hambat (mm)* Ekstrak etanol serbuk nano

daun sirih merah

Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah

175 16,50 10,21

150 15,43 9,78

125 14,35 9,45

100 13,55 9,14

50 12,23 8,64

40 11,92 8,26

30 11,40 8,08

20 10,45 7,86

10 9,85 7,55

6 9,41 7,11

5 8,91 7,06

4 8,63 -

3 7,65 -

2 7,20 -

1 - -

Keterangan: * = hasil rata-rata tiga kali pengukuran - = tidak ada hambatan

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol serbuk daun sirih

merah menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans dengan KHM 5 mg/ml, dengan diameter zona hambat 7,06 mm. Ekstrak etanol serbuk nano

daun sirih merah menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans pada KHM 2 mg/ml, dengan diameter zona hambat 7,20 mm. Menurut Farmakope Indonesia (1995) suatu antijamur dikatakan efektif jika diameter zona hambat 14 – 16 mm. Konsentrasi efektif yang di peroleh untuk ekstrak etanol serbuk nano daun sirih


(39)

merah adalah 125 mg/ml dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah > 175 mg/ml. Aktivitas antijamur ekstrak etanol daun sirih merah ini diduga karena kandungan senyawa kimia seperti triterpenoid, alkaloid, flavonoid, minyak atsiri dan tanin. Flavonoid menghambat pertumbuhan jamur dengan merusak membran sel jamur. Gugus hidroksil yang terdapat pada senyawa flavonoid menyebabkan perubahan komponen organik dan transport nutrisi yang akan mengakibatkan efek toksik terhadap jamur. Senyawa triterpenoid bersifat lipofilik dapat merusak komponen lipid pada membran sel sehingga fungsi membran sel jamur terganggu. Candida albicans tumbuh baik pada kisaran pH 4,5 – 6,5. Alkaloid memiliki sifat basa dengan pH > 7 sehingga mampu menekan pertumbuhan jamur Candida albicans. Tanin yang juga terkandung dalam daun sirih segar dapat menghambat kerja enzim-enzim termasuk enzim katalase. Salah satu dari enzim tersebut adalah enzim C-14 demethylase yang berfungsi untuk memacu pembentuk ergosterol. Ergosterol merupakan komponen utama membran plasma fungi dan khamir. Dengan terganggunya fungsi enzim ini maka fungi tidak dapat mensintesis ergosterol secara normal (Lutfiyanti, dkk., 2012; Reveny, 2011; Rahman dan Aditya, 2010; Wahyuni, dkk., 2010). Namun komponen kimia yang aktif dalam ekstrak etanol daun sirih merah sebagai antijamur belum diketahui, sehingga perlu diteliti lebih lanjut.

Gambar 4.3 menunjukkan bahwa aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk nano dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah dipengaruhi oleh konsentrasi. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol yang digunakan semakin besar pula diameter zona hambat terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans. Hal ini dikarenakan semakin tingginya konsentrasi ekstrak etanol daun sirih merah


(40)

tersebut berarti semakin banyak zat aktif yang terkandung didalam ekstrak. Selain itu, semakin besar konsentrasi zat yang teradapat dalam cakram akan memperbesar kemampuan difusi zat tersebut pada media sehingga mempermudah penetrasi zat dalam menghambat pertumbuhan jamur (Rahman dan Aditya, 2010; Pelczar dan Chan, 1986).

Gambar 4.3 Pengaruh konsentrasi ekstrak etanol daun sirih merah terhadap aktivitas antijamur.

Analisis statistika dengan menggunakan anava dan uji T menunjukkan nilai signifikan 0,00. Dimana nilai sig < 0,05, hal ini berarti terdapat perbedaan secara signifikan aktivitas antijamur antara ekstrak etanol dari serbuk nano dan serbuk daun sirih merah. Hal ini mengindikasikan bahwa aktivitas antijamur ekstrak

etanol serbuk nano daun sirih merah lebih kuat dibandingkan

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

1 2 3 4 5 6 10 20 30 40 50 100 125 150 175

D iam et er Z o n a H am b at ( m m ) Konsentrasi (mg/ml)

ekstrak etanol serbuk daun sirih merah ekstrak etanol serbuk nano daun sirh merah


(41)

dengan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah. Hal ini kemungkinan karena komponen kimia yang terkandung dalam ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah lebih banyak dari pada ekstrak etanol serbuk daun sirih merah. Ini sesuai dengan penelitian Afrida Sari (2014) menunjukkan ekstrak etanol serbuk nano daun sirih memiliki 38 komponen sedangkan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah hanya 12 komponen yang diukur dengan menggunakan GC-MS. Perbedaan ini karena dalam ukuran nano, partikel zat aktif lebih mudah terisolasi karena luas kontak permukaan simplisia menjadi lebih besar dan kelarutan zat aktif meningkat sehingga aktivitas antijamurnya semakin kuat (Kammona dan Costas, 2012; Aiache, dkk., 1993).


(42)

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan

Dari data yang di peroleh dapat disimpulan sebagai berikut:

a. ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah memiliki aktivitas antijamur pada konsentrasi hambat minimum 2 mg/ml. Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah memiliki aktivitas antijamur pada konsentrasi hambat minimum 5 mg/ml.

b. aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah lebih kuat daripada ekstrak etanol serbuk daun sirih merah Pada konsentrasi 175 mg/ml, ekstrak etanol serbuk nano memberikan daya hambat terhadap jamur Candida albicans yaitu 16,50 mm sedangkan ekstrak etanol serbuk simplisia memberikan daya hambat terhadap terhadap jamur Candida albicans yaitu 10,21 mm.

5.2 Saran

Dari kesimpulan di atas maka disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk dapat mengisolasi senyawa kimia daun sirih merah (Piper crocatum Ruis & Pav.) yang aktif sebagai antijamur.


(43)

DAFTAR PUSTAKA

Afrida, S. (2014). Perbandingan Jumlah Komponen Pada Ukuran Partikel yang Berbeda dari Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav.) Yang Diuji Dengan GC-MS. Medan: Universitas Muslim Nusantara Al- Washliyah. Hal. 25 - 31

Agoes, G. (2007). Teknologi Bahan Alam. Bandung: Penerbit ITB. Hal. 38 – 39. Aiache, J.M., Devissaguet, J., dan Guyot, HA.M. (1993). Farmasetika 2

Biofarmasi Edisi II. Surabaya: Airlangga University Press. Hal. 153 - 167. Ali, A.S. (2008). Oral Immune Defense Agains Chronic Hyperplastic

Candidiasis. Finland: Universitas of Helsinki. Hal. 18.

Anggraeni, N.D. (2008). Analisa SEM (Scanning Electron Microscopy) dalam Pemantauan Proses Oksidasi Magnetite Menjadi Hematite. Seminar Nasional ke-VII. Artikel. Hal. 52.

Astuti, I.P., dan Munawaroh, E. (2011). Karakteristik Morfologi Daun Sirih Merah: Piper crocatum Ruitz & Pav dan Piper porphyrophyllum N.E.Br. Koleksi Kebun Raya Bogor. Berk. Penel. Hayati Edisi Khusus: 7A: 83-85. Backer, C.A., dan Den, B.V.B.J.R. (1963). Flora of Java. Published Under The

Auspices of The Rijksherbarium. Leyden. Hal. 167.

Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Hal. 713, 748, 889-892.

Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia Edisi Ke IV. Jakarta. Departemen Kesehatan RI. Hal. 854, 896.

Ditjen POM. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, Departemen Kesehatan RI. Jakarta. Halaman. 1, 10-12.

Gupta, R. B., dan Kompella, U. B. (2006). Nanoparticle Technology For Drug Delivery. Vol. 159. New York: Taylor & Francis. Hal. 14.

Jawetz, E., Melnick, J.L., dan Adelberg, E.A. (2013). Mikrobiologi untuk Profesi Kesehatan. Edisi Kedua puluh lima. Alih Bahasa oleh Aryandhito Widhi Nugroho, Dian Rahmadhani, Nella Yesdelita, dan Windriya Kerta Nirmala. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran. Hal. 629 – 671.

Juliantina, R,F., Citra, M., D.A., Nirwani, B., Nurmasitoh, T., Bowo, T., dan Endrawati. (2009). Manfaat Sirih Merah (Piper crocatum) sebagai Agen Antibakterial terhadap Bakteri Gram Positif dan Gram Negatif. JKKI –


(44)

Katzung, B.G. (2004). Farmakologi Dasar dan Klinik Buku 3 Edisi 8. Jakarta: Penerbit Salemba Medika. Hal.117 – 120.

Kumar, V., Abbas, A.K., dan Fausto, N. (2010). Dasar Patologis Penyakit. Edisi Ketujuh. Alih Bahasa oleh Brahim. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran. Hal. 471- 490.

Kammona, O., dan Costas, K. (2012). Recent Advances in Nanocarrier-based

Mucosal Delivery of Biomolecules. Journal of Controlled Release. 161: 781 - 794.

Lutfiyanti,R., Widodo, F.M., dan Eko, N.D. (2012). Aktivitas Antijamur Senyawa Bioaktif Ekstrak Gelidium latifolium Terhadap Candida albicans. Jurnal Pengolahan dan Bioteknologi Hasil Perikanan. 1(1): 1-8.

Mohanraj, VJ., dan Chen, Y. (2006). Nanoparticles – A Review. Tropical Journal of Pharmaceutical Research. 5(1): 561 – 573.

Nisa, G.K., Wahyunanto, A.N., dan Yusuf, H. (2014). Ekstraksi Daun Sirih Merah (Piper crocatum ) Dengan Metode Microwave Assisted Extraction (Mae).

Jurnal Bioproses Komoditas Tropis. 2(1): 1 – 7.

Pratiwi, S.T. (2008). Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Penerbit Erlangga. Hal. 28, 150 - 164, 171

Pelczar, M.I., dan Chan, E.C.S. (1986). Penterjemah Rama, S.H. Dasar–dasar Mikrobiologi. Jakarta: Penerbit UI Press. Hal. 144

Rahman, N., dan Aditya, R. (2010). Uji Fungistatik Ekstrak Daun Sirih (Piper betle L.) Terhadap Candida albicans. Bioscientiae. 7(2) : 17 - 24.

Reveny, J. (2011). Daya Antimikroba Ekstrak dan Fraksi Daun Sirih Merah (Piper beter Linn). Jurnal Ilmu Dasar. 12(1): 6 - 12.

Rismana, E., Kusumaningrum, S., Bunga, O., Niar., dan Marhammah. (2014). Pengujian Aktivitas Antiacne Nanopartikel Kitosan Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana). Media Litbangkes. 24(1): 19-27.

Santoso, Widodo., dan Abdul. A. (2010). Pengaruh Ekstrak Ethanol Bawang Bombay (Allium cepa) Terhadap Pertumbuhan Candida albicans Isolat 076-Sv Secara In vitro. Jurnal Penelitian Mirobiologi. 1(1): Hal. 1-11. Siregar, R.S. (2005). Penyakit Jamur Kulit. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran.

Hal. 5.

Sulistiyani., Arniputri, B., dan Retna. (2007). Identifikasi Komponen Utama Minyak Atsiri Sirih Merah. Biodiversitas. 8(2): 136-137.


(45)

Utami, P., dan Desty, E.P. (2013). The Miracle of Herbs. Jakarta: Agromedia Pustaka. Hal. 15 - 16.

Wahyuni,S., Mukarlina., dan Ari, H.Y. (2010). Aktivitas Antifungi Ekstrak Metanol Daun Buas-Buas (Premna serratifolia) Terhadap Jamur Diplodia

sp. Pada Jeruk Siam (Citrus nobilis var. microcarpa). Jurnal Protobiont.

3(2): 274 -279.

Volk, W.A., dan Margaret, F.W. (1989). Mikrobiologi Dasar. Edisi ke 5. Jakarta: Erlangga. Hal. 196 - 197.

Yadav, D., Suri, S., Choundhary, AA., Sikender, M., Beg, NM. (2011). Novel Approach Herbal Remedies And Natural Products In Pharmaceutical Science As Nano Drug Delivery Systems. Int J Pharm Tech. 24(2): 111 -116.


(46)

LAMPIRAN


(47)

Lampiran 2. Tanaman sirih merah

A B Keterangan:

A = Tanaman sirih merah B = Daun sirih merah


(48)

Lampiran 3. Rendemen, dan susut pengeringan. Berat keseluruhan simplisia segar = 750 g Berat keseluruhan simplisia kering = 150 g

Rendemen Simplisia =

segar daun n keseluruha Berat simplisia n keseluruha Berat X 100% = g 750 g 150 X 100% = 20%

Susut pengeringan =

g 750 g ) 150 750 ( − x 100% = 80%

Rendemen ekstrak etanol nano

Berat serbuk simplisia = 100 g Berat ekstrak = 14,54 g Rendemen =

simplisia nano Berat ekstrak Berat x 100% = g 100 g 54 , 14

x 100% = 14,54%

Rendemen ekstrak etanol serbuk

Berat serbuk simplisia = 100 g Berat ekstrak = 10,84 g Rendemen =

simplisia serbuk Berat ekstrak Berat x 100% = g 100 g 84 , 10


(49)

Lampiran 4. Bagan kerja pengolahan serbuk daun sirih merah

Dicuci dari pengotor sampai bersih

Ditiriskan

Ditimbang berat basahnya

Dikeringkan pada suhu ± 40ᵒC Ditimbang berat keringnya

Dihaluskan dengan blender

Dimasukkan ke dalam wadah

Ditambahkan etanol 70% sebanyak 750 ml

Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya, sambil sesekali diaduk

Dienaptuangkan

Dicuci kembali dengan etanol 70%sebanyak 250ml

Diuapkan hingga kental Daun Sirih Merah

Daun Sirih Merah

Serbuk Simplisia Daun Sirih Merah

Ekstrak Etanol Serbuk Daun Sirih Merah

Maserat Ampas


(50)

Lampiran 5. Bagan kerja pengolahan ekstrak etanol serbuk nano dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah

Dimasukkan ke dalam wadah

Ditambahkan etanol 70% sebanyak 750 ml

Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya, sambil sesekali diaduk

Dienaptuangkan

Dicuci kembali dengan etanol 70% sebanyak 250 ml

Diuapkan hingga kental

Disimpan di dalam lemari pendingin Sampel

Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Maserat Ampas


(51)

Lampiran 6. Bagan pengujian aktivitas antijamur

Diambil 1 ose

Disuspensikan ke dalam 10 ml NaCl 0,9 % dihomogenkan

Diinkubasi pada suhu 25oC selama 2-3 jam

Diukur kekeruhan pada panjang gelombang 580 nm sampai diperoleh transmitan 25%

Dimasukkan 0,1 ml inokulum ke dalam cawan petri

Ditambahkan 15 ml MHA + 2% dekstrosa steril cair ke dalam cawan petri

Dihomogenkan dan dibiarkan hingga memadat

Ditanamkan pencadang kertas yang telah direndam ekstrak dengan berbagai konsentasi

Diinkubasi pada suhu 25 oC selama 48 jam

Diukur diameter daerah hambat di sekitar pencadang kertas

Stok kultur

Inokulum jamur

Media padat


(52)

Lampiran 7. Uji aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans.

Keterangan:

A = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 175 mg/ml B = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 150 mg/ml C = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 125 mg/ml D = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 100 mg/ml E = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 50 mg/ml F = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 40 mg/ml G = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 30 mg/ml H = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 20 mg/ml I = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 10 mg/ml J = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 6 mg/ml K = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 5 mg/ml L = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 4 mg/ml M = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 3 mg/ml N = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 2 mg/ml O = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 1 mg/ml


(53)

Lampiran 8. Uji aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans

Keterangan:

A = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 175 mg/ml B = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 150 mg/ml C = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 125 mg/ml D = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 100 mg/ml E = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 50 mg/ml F = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 40 mg/ml G = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 30 mg/ml H = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 20 mg/ml I = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 10 mg/ml J = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 6 mg/ml K = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 5 mg/ml L = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 4 mg/ml M = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 3 mg/ml N = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 2 mg/ml O = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 1 mg/ml

A

B

C D


(54)

Lampiran 9. Gambar hasil uji aktivitas antijamur flukonazol dan etanol 35%

Candida albicans

Keterangan:

KN = Kontrol negatif (Etanol 35%) KP = Kontrol positif (Flukonazol 25µg)


(55)

Lampiran 10. Hasil pengukuran diameter (mm) daerah hambatan ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah

Konsentrasi

(mg/ml) D1 D2 D3 D*

175 16,50 16,30 16,70 16,50

150 15,10 15,50 15,70 15,43

125 14,00 14,75 14,30 14,35

100 13,30 13,65 13,70 13,55

50 12,20 12,25 12,25 12,23

40 12,00 11,80 11,95 11,92

30 11,30 11,35 11,55 11,40

20 10,50 10,45 10,40 10,45

10 9,90 9,80 9,85 9,85

6 9,50 9,40 9,35 9,41

5 8,95 8,90 8,90 8,91

4 8,60 8,70 8,75 8,63

3 7,70 7,65 7,55 7,70

2 7,20 7,15 7,05 7,20

1 - - - -

Keterangan

* = Rata –rata


(56)

Lampiran 11. Hasil pengukuran diameter (mm) daerah hambatan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah

Konsentrasi

(mg/ml) D1 D2 D3 D*

175 10,10 10,30 10,25 10,21

150 9,80 9,70 9,85 9,78

125 9,50 9,40 9,45 9,45

100 9,20 9,10 9,15 9,14

50 8,70 8,60 8,65 8,64

40 8,20 8,30 8,30 8,26

30 8,10 8,00 8,15 8,08

20 7,90 7,90 7,80 7,86

10 7,60 7,50 7,55 7,55

6 7,10 7,15 7,10 7,11

5 7,10 7,00 7,10 7,06

4 - - - -

3 - - - -

2 - - - -

1 - - - -

Keterangan

* = Rata –rata

- = Tidak memiliki diameter daya hambat

Lampiran 12. Normalitas dari ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah.

Normalitas ekstrak etanol serbuk daun sirih merah

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk Statistic Df Sig. Statistic Df Sig. Daya_hambat .088 36 .200* .963 36 .267

Normalitas ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk Statistic Df Sig. Statistic Df Sig.

Daya_hambat .126 36 .163 .927 36 .020

Lampiran 13. Analisis stastitik dengan menggunakan analisis variansi (anava) dua arah dan Uji T


(57)

Source

Type III Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Corrected Model 711.1299 29 24.404 1719.267 .000 Intercept 7878.126 1 7878.126 555014.764 .000 Konentrasi 431.928 14 30.852 2173.524 .000 ukuran_partikel_simplisia 214.184 1 214.184 15089.272 .000 konentrasi *

ukuran_partikel_simplisia

61.606 14 4.400 310.009 .000

Error .852 60 .014

Total 8586.695 90

Corrected Total 708.569 89

R squared = .999 (Adjusted R Squared = .998)

Tabel uji T

Paired sampel test

Paired differences

t df Sig (2 tailed) Mean Std.

Deviation

Std. Error Mean

95% Confidence interval of the

difference lower Upper Pair

serbuk_nano serbuk


(1)

Lampiran 7. Uji aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans.

Keterangan:

A = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 175 mg/ml B = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 150 mg/ml C = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 125 mg/ml D = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 100 mg/ml E = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 50 mg/ml F = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 40 mg/ml G = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 30 mg/ml H = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 20 mg/ml I = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 10 mg/ml J = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 6 mg/ml K = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 5 mg/ml L = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 4 mg/ml M = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 3 mg/ml N = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 2 mg/ml O = Ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah 1 mg/ml


(2)

Lampiran 8. Uji aktivitas antijamur ekstrak etanol serbuk daun sirih merah terhadap jamur Candida albicans

Keterangan:

A = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 175 mg/ml B = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 150 mg/ml C = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 125 mg/ml D = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 100 mg/ml E = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 50 mg/ml F = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 40 mg/ml G = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 30 mg/ml H = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 20 mg/ml I = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 10 mg/ml J = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 6 mg/ml K = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 5 mg/ml L = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 4 mg/ml M = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 3 mg/ml N = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 2 mg/ml O = Ekstrak etanol serbuk daun sirih merah 1 mg/ml

A

B

C D


(3)

Lampiran 9. Gambar hasil uji aktivitas antijamur flukonazol dan etanol 35%

Candida albicans

Keterangan:

KN = Kontrol negatif (Etanol 35%) KP = Kontrol positif (Flukonazol 25µg)


(4)

Lampiran 10. Hasil pengukuran diameter (mm) daerah hambatan ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah

Konsentrasi

(mg/ml) D1 D2 D3 D*

175 16,50 16,30 16,70 16,50

150 15,10 15,50 15,70 15,43

125 14,00 14,75 14,30 14,35

100 13,30 13,65 13,70 13,55

50 12,20 12,25 12,25 12,23

40 12,00 11,80 11,95 11,92

30 11,30 11,35 11,55 11,40

20 10,50 10,45 10,40 10,45

10 9,90 9,80 9,85 9,85

6 9,50 9,40 9,35 9,41

5 8,95 8,90 8,90 8,91

4 8,60 8,70 8,75 8,63

3 7,70 7,65 7,55 7,70

2 7,20 7,15 7,05 7,20

1 - - - -

Keterangan

* = Rata –rata


(5)

Lampiran 11. Hasil pengukuran diameter (mm) daerah hambatan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah

Konsentrasi

(mg/ml) D1 D2 D3 D*

175 10,10 10,30 10,25 10,21

150 9,80 9,70 9,85 9,78

125 9,50 9,40 9,45 9,45

100 9,20 9,10 9,15 9,14

50 8,70 8,60 8,65 8,64

40 8,20 8,30 8,30 8,26

30 8,10 8,00 8,15 8,08

20 7,90 7,90 7,80 7,86

10 7,60 7,50 7,55 7,55

6 7,10 7,15 7,10 7,11

5 7,10 7,00 7,10 7,06

4 - - - -

3 - - - -

2 - - - -

1 - - - -

Keterangan

* = Rata –rata

- = Tidak memiliki diameter daya hambat

Lampiran 12. Normalitas dari ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah dan ekstrak etanol serbuk daun sirih merah.

Normalitas ekstrak etanol serbuk daun sirih merah

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic Df Sig. Statistic Df Sig.

Daya_hambat .088 36 .200* .963 36 .267

Normalitas ekstrak etanol serbuk nano daun sirih merah

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic Df Sig. Statistic Df Sig.

Daya_hambat .126 36 .163 .927 36 .020

Lampiran 13. Analisis stastitik dengan menggunakan analisis variansi (anava) dua arah dan Uji T


(6)

Source

Type III Sum of

Squares Df

Mean

Square F Sig.

Corrected Model 711.1299 29 24.404 1719.267 .000

Intercept 7878.126 1 7878.126 555014.764 .000

Konentrasi 431.928 14 30.852 2173.524 .000

ukuran_partikel_simplisia 214.184 1 214.184 15089.272 .000

konentrasi *

ukuran_partikel_simplisia

61.606 14 4.400 310.009 .000

Error .852 60 .014

Total 8586.695 90

Corrected Total 708.569 89

R squared = .999 (Adjusted R Squared = .998)

Tabel uji T

Paired sampel test Paired differences

t df Sig (2

tailed)

Mean Std.

Deviation

Std. Error Mean

95% Confidence interval of the

difference lower Upper Pair

serbuk_nano serbuk


Dokumen yang terkait

Formulasi Tablet Hisap Nanopartikel Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz &amp; Pav.) Secara Granulasi Basah

3 53 89

Perbandingan Aktivitas Antibakteri Antara Ekstrak Etanol dari Serbuk dan Serbuk Nano Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz &amp; Pav.) Terhadap Strain Bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus aureus

6 64 0

Perbandingan Uji Aktivitas Antibakteri Antara Ekstrak Etanol Dari Serbuk Dan Serbuk Nano Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz &amp; Pav.) Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli

8 98 74

Formulasi Tablet Hisap Nanopartikel Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz &amp; Pav.) Secara Granulasi Basah

9 71 88

UJI DAYA ANTIFUNGI EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz & Pav) TERHADAP Uji Daya Antifungi Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz & Pav) Terhadap Candida Albicans ATCC 10231 Secara In Vitro.

0 0 15

Perbandingan Aktivitas Antijamur Antara Ekstrak Etanol Dari Serbuk Dan Serbuk Nano Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz & Pav.) Terhadap Jamur Candida Albicans

0 0 10

DAFTAR ISI - Perbandingan Aktivitas Antijamur Antara Ekstrak Etanol Dari Serbuk Dan Serbuk Nano Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz & Pav.) Terhadap Jamur Candida Albicans

0 0 10

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz Pav.) TERHADAP Strain BAKTERI Methicillin Resistant Staphylococcus aureus SKRIPSI

0 1 13

Perbandingan Uji Aktivitas Antibakteri Antara Ekstrak Etanol Dari Serbuk Dan Serbuk Nano Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz & Pav.) Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli

0 0 19

PERBANDINGAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz Pav.) TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli SKRIPSI

0 1 15