5cc darah, kemudian dimasukkan 2cc ke dalam tabung plastik EDTA untuk pemeriksaan darah lengkap dan 3cc ke dalam tabung plastik tanpa
antikoagulan. Untuk pemeriksaan darah lengkap segera diperiksa dengan
memakai alat Sysmex XT 2000i. Sampel darah beku setelah dibiarkan membeku selama 20 menit pada suhu ruangan, dilakukan sentrifugasi
dengan kecepatan 3000 rpm selama 20 menit, serum dipisahkan dan dimasukkan ke dalam tabung plastik microtube masing-masing 1 ml.
Tabung microtube pertama untuk pengukuran kadar hs-CRP disimpan dalam freezer -38º C sampai waktu pemeriksaan yang telah ditentukan
maksimum 6 bulan
2
. Tabung aliquot kedua untuk pemeriksaan KGDP, HDL-C, TG, SGOT, SGPT.
3.6.5. Pemeriksaan laboratorium
Untuk pengukuran KGDP, TG, HDL-C, SGOT, SGPT, dilakukan segera setelah sampel terkumpul. Sedangkan untuk pengukuran kadar
hs-CRP dilakukan serentak setelah sejumlah sampel terkumpul.
3.6.5.1. Pemeriksaan darah lengkap
Untuk mengukur jumlah leukosit subjek dipakai alat Sysmex XT 2000i, dengan metode flowcitometri.
3.6.5.2. Pemeriksaan KGDP
Menggunakan alat Cobas C 501 Analyzer , dengan metode enzimatik kolorimetrik berdasarkan reaksi:
D-Glukosa + ATP
HK
D-Glukosa-6-pospat + ADP
Universitas Sumatera Utara
D-Glukosa-6-pospat + NADP
+
G6PDH
D-6-Phosphoglukonat + NADPH + H
+
Konsentrasi NADPH yang dibentuk secara langsung menjadi konsentrasi glukosa, absorbsinya diukur pada panjang gelombang 340 nm.
3.6.5.3. Pemeriksaan Trigliserida
Menggunakan alat Cobas C 501 Analyzer dengan metode enzimatik kolorimetrik, dengan reaksi :
Trigliserida
lipoprotein lipase
Gliserol + Asam lemak Gliserol + ATP
Gliserolkinase
Gliserol-3-pospat + ADP Gliserol-3-pospat + O
2 Gliserol pospat oxidase
Dihidroksiaseton pospat + H
2
O
2
2H
2
O
2
+ 4-aminophenazon + 4-kloropenol
Peroxidase
quinoneimine dye + 4H
2
O
Absorbsi warna merah quinoneimine dye diukur pada panjang gelombang 512 nm.
3.6.5.4. Pemeriksaan HDL-C
Menggunakan alat Cobas C 501 Analyzer dengan metode enzimatik kolorimetrik, dengan reaksi :
HDL-C ester + H
2
O
detergent cholesterol esterase
kolesterol + Asam lemak bebas HDL-C + O
2 Cholesterol oxidase
∆4-cholestenone + H
2
O
2
2H
2
O
2
+ 4-aminoantipyrine + HSDA + H
+
+ H
2
O
Peroxidase
Purple blue pigment + 5H
2
O
Absorbsi warna Purple blue diukur pada panjang gelombang 583 nm.
3.6.5.5. Pemeriksaan SGOT
Menggunakan alat Cobas C 501 Analyzer dengan metode enzimatik kolorimetrik, dengan reaksi :
L-aspartate + 2-oxoglutarae
aspartate aminotransferase
oksaloasetat+ L-glutamat Oksaloasetat + NADH + H
+ malate dehydrogenase
L-malat + NAD
+
Universitas Sumatera Utara
Laju oksidasi NADH secara langsung merupakan proporsi aktivitas aspartat aminotransferase yang absorbsinya diukur pada panjang
gelombang 340 nm
3.6.5.6. Pemeriksaan SGPT
Menggunakan alat Cobas C501 Analyzer dengan metode enzimatik kolorimetrik, dengan reaksi :
L-alanine + 2-oxoglutarate
alanin aminotransferase
pyruvat + L-glutamat Pyruvat + NADH + H
+ lactate dehydrogenase
L-laktat + NAD
+
Laju oksidasi NADH secara langsung merupakan proporsi aktivitas alanin aminotransferase, absorbsinya diukur pada panjang gelombang 340 nm.
3.6.5.7. Pemeriksaan hs-CRP Prinsip pemeriksaan
