Uji Aktivitas Antioksidan dan Penentuan Kandungan Fenolik Total Pada Pakkat (Calamus caesius Blume.)
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN PENENTUAN
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
SKRIPSI
OLEH:
M. ADHLI TAWAKKAL S.B.
NIM 141524045
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN PENENTUAN
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
SKRIPSI
Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar
Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
M. ADHLI TAWAKKAL S.B.
NIM 141524045
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017
ii
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN PENENTUAN
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
OLEH:
M. ADHLI TAWAKKAL S.B.
NIM 141524045
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 07 Juni 2017
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt. Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt.
NIP 195008281976032002
NIP 195103261978022001
Pembimbing II,
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP 195008281976032002
Drs. Fathur Rahman, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Drs. Fathur Rahman, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Medan,
Juli 2017
Fakultas Farmasi,
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP. 195707231986012001
iii
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan karunia
yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang
berjudul “Uji Aktivitas Antioksidan dan Penentuan Kandungan Fenolik Total
pada Pakkat (Calamus caesius Blume.)”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu
syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.,
selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis
selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih
kepada Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., dan Bapak Drs. Fathur
Rahman Harun, M.Si., Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam
membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab, memberikan
petunjuk dan saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan
terima kasih juga penulis sampaikan kepada Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt.,
selaku ketua penguji, dan Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku anggota
penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini, dan Ibu
Khairunnisa, S.Si, M.Pharm, Ph.D, Apt., selaku dosen pembimbing akademik
serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak
membimbing penulis selama masa perkuliahan hingga selesai. Penulis juga
mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga untuk yang teristimewa
ayahanda Syamsul Bachri dan ibunda Salmah Dan kepada saudara penulis, yaitu
iv
Universitas Sumatera Utara
Putri Asymah, Amk, Maega Wahyuni, B.Eng, dan M. Noor Ichsan, Amd yang
telah memberi do’a restu, motivasi dan semangat agar penulis tidak pernah
berhenti untuk memempuh cita - cita yang diharapkan.
Terimakasih juga penulis ucapkan kepada teman-teman Farmasi Ekstensi
angkatan 2014 untuk kebersamaan dan dorongan semangatnya, serta semua pihak
yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah banyak membantu hingga
selesainya penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum
sempurna, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang
membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.
Medan,
Penulis,
Juni 2017
M. Adhli Tawakkal .S.B
NIM 141524045
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan dibawah ini :
Nama
: M. Adhli Tawakkal .S.B
NIM
: 141524045
Program Studi
: S-1 Ekstensi Farmasi
Judul Skripsi
: Uji Aktivitas Antioksidan dan Penentuan Kandungan
Fenolik Total pada Pakkat (Calamus caesius Blume.).
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dan
hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis setelah disebutkan sumbernya didalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam
skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikian surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagai mana mestinya.
Medan,
Juni 2017
Yang Membuat Pernyataan
M. Adhli Tawakkal .S.B
NIM 141524045
vi
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN KANDUNGAN FENOLIK TOTAL
PADA PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
ABSTRAK
Rotan muda atau yang biasa disebut dengan pakkat merupakan makanan
khas berbuka puasa masyarakat Mandailing yang dipercaya dapat meningkatkan
nafsu makan dan mempunyai khasiat sebagai obat kencing manis dan malaria.
Kandungan kimia yang terdapat dalam pakkat antara lain vitamin C, flavonoid,
alkaloid, saponin dan glikosida yang berpotensi sebagai antioksidan. Antioksidan
adalah senyawa pemberi elektron yang mampu menginaktivasi berkembangnya
reaksi oksidasi, dengan cara mencegah terbentuknya radikal bebas dan
menghambat reaksi oksidasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan
kekuatan aktivitas antioksidan serta menentukan kandungan fenolik total pada
pakkat segar, rebus dan bakar.
Metode yang dilakukan untuk uji aktivitas antioksidan adalah metode
pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picryhydrazil (DPPH) dan
kandungan fenolik total metode Folin-Ciocalteu dengan pembanding asam galat.
Kemudian diukur menggunakan spektrofotometer visibel.
Hasil penelitian uji aktivitas antioksidan dengan metode pemerangkapan
radikal bebas DPPH pada sampel pakkat yang segar, direbus dan dibakar
menunjukkan kekuatan antioksidan dalam kategori yang sangat lemah dengan
nilai IC50 masing-masing sebesar 2672,24 μg/ml; 3841,76 μg/ml; dan
1497,74 μg/ml dan vitamin C sebagai control positif menunjukkan kekuatan
antioksidan dalam kategori sangat kuat dengan nilai IC50 4,81 μg/ml. Hasil
kandungan fenolik total yang didapat dengan metode Folin-Ciocalteau pada
pakkat yang segar, pakkat direbus dan pakkat dibakar masing-masing sebesar
2,9674 mg GAE/g; 1,7780 mg GAE/g; dan 5,9856 mg GAE/g.
Kata kunci: Aktivitas antioksidan, DPPH, fenolik total, Folin-Ciocalteau, pakkat
\
vii
Universitas Sumatera Utara
ANTIOXIDANT ACTIVITIES TEST AND THE TOTAL PHENOLIC
CONTENT IN PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
ABSTRACT
Young rattan or commonly referred to as pakkat is a typical meal of
Mandailing peoples at the time of the fast breaking which is believed to increase
appetite and has efficacy as a drug diabetes and malaria. Chemical contains
contained in pakkat include vitamin C, flavonoids, alkaloids, saponins and
glycosides which have potential function as an antioxidant. Antioxidants are
compounds electron donor which are able to inactivate the development of the
oxidation reaction, by preventing the formation of free radicals and it can inhibit
the oxidation reaction. The purpose of this study was to determine the antioxidant
activities as well as knowing the total phenolic content in pakkat fresh, boiled and
grilled.
The method used to test the antioxidant acitivities of free radical trapping
method is 1,1-diphenyl-2-picryhydrazil (DPPH) and total phenolic content of
Folin-Ciocalteu method with the comparison of gallic acid. It was then measured
using a visible spectrophotometer.
The results of this research test, the antioxidant activities with DPPH free
radical trapping method on samples pakkat fresh, boiled and grilled showed those
the antioxidant power in the category of very weak with IC50 values of each of
2672.24 μg/ml; 3841,76 μg/ml; and 1497.74 μg/ml and vitamin C as a positive
control showed the antioxidant power in the category of very strong with IC50
value of 4.81 μg/ml and the results of total phenolic content by Folin-Ciocalteau
method on fresh pakkat, boiled pakkat and grilled pakkat of 2.9674 mg GAE/g,
1.7780 mg GAE/g and 5.9856 mg GAE/g.
Keywords: antioxidant activities, DPPH, total phenolic, Folin-Ciocalteau, pakkat
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .....................................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN .....................................................................
iii
KATA PENGANTAR ............................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT .......................................
vi
ABSTRAK ...............................................................................................
vii
ABSTRACT .............................................................................................
viii
DAFTAR ISI ............................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ....................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR ...............................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .....................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah .............................................................
3
1.3 Hipotesis ..............................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian .................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian ...............................................................
4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ....................................................
4
BAB II Tinjauan Pustaka .......................................................................
5
2.1 Pakkat (Calamus Caesius Blume.) ......................................
5
2.1.1 Deskripsi Rotan ..........................................................
6
2.1.2 Tempat Tumbuh dan Penyebaran Rotan ....................
6
2.1.3 Pemanfaatan Rotan .....................................................
6
ix
Universitas Sumatera Utara
2.2 Antioksidan ..........................................................................
7
2.3 Senyawa Fenolik ..................................................................
9
2.4 Spektrofotometri UV-Visibel ...............................................
10
2.5 Metode Pengukuran Antioksidan..........................................
11
2.5.1 Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH ... ...................
11
2.5.2 Penentuan Kandungan Fenolik Total..........................
13
BAB III METODE PENELITIAN ..........................................................
15
3.1 Alat dan Bahan .....................................................................
15
3.1.1 Alat ............................................................................
15
3.1.2 Bahan ..........................................................................
15
3.2 Pembuatan Pereaksi ... ..........................................................
16
3.2.1 Larutan DPPH 0,5 mM ..............................................
16
3.2.2 Larutan Natrium Karbonat 20% ................................
16
3.3 Prosedur Penelitian ..............................................................
16
3.3.1 Pengambilan Sampel .................................................
16
3.3.2 Penyiapan Sampel ......................................................
16
3.3.2.1 Pakkat Segar .................................................
16
3.3.2.2 Pakkat Rebus ................................................
17
3.3.2.3 Pakkat Bakar .................................................
17
3.4 Pengujian Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode
Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH ...............................
17
3.4.1 Pembuatan Larutan Blanko ........................................
17
3.4.2 Pengukuran
Panjang Gelombang Serapan
Maksimum DPPH ....................................................
18
3.4.3 Penentuan Waktu Kerja (Operating Time) .................
18
x
Universitas Sumatera Utara
3.4.4 Pembuatan Larutan Induk .........................................
18
3.4.4.1 Pembuatan Larutan Induk Pakkat ................
18
3.4.4.2 Pembuatan Larutan Induk Vitamin C ...........
18
3.4.5 Pembuatan Larutan Uji .............................................
18
3.4.5.1 Pembuatan Larutan Uji Pakkat ....................
18
3.4.5.2 Pembuatan Larutan Uji Vitamin C ...............
19
3.4.6 Analisis Persen Pemerangkapan Radikal Bebas ........
19
3.4.7 Analisis Nilai IC50 ......................................................
19
3.5 Penentuan Kandungan Fenolik Total ...................................
20
3.5.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Asam Galat .............
20
3.5.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Asam Galat ...............................................................
20
3.5.3 Penentuan Waktu Kerja (Operating Time) .................
20
3.5.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi Asam Galat ...................
21
3.5.5 Pembuatan Larutan Uji Pakkat ....................................
21
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................
22
4.1 Identifikasi Tumbuhan ..........................................................
22
4.2 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Pakkat Metode
Metode DPPH ........................................................................
22
4.2.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Serapan
Maksimum ....................................................................
22
4.2.2 Hasil Penentuan Waktu Pengukuran (operating time)..
23
4.2.3 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Pakkat .............
23
4.2.4 Hasil Analisis Nilai IC50 .............................................
25
4.3 Hasil Analisis Kandungan Fenolik Total ...............................
27
xi
Universitas Sumatera Utara
4.3.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Asam Galat ....................................................................
27
4.3.2 Hasil Penentuan Waktu (operating time) .. ....................
28
4.3.3 Hasil Penentuan Kurva Kalibrasi Asam Galat ..............
28
4.3.4 Hasil Penentuan Kandungan Fenolik Total pada
Pakkat ..........................................................................
29
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................
32
5.1 Kesimpulan ...........................................................................
32
5.2 Saran ........................... ..........................................................
32
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
33
LAMPIRAN ...............................................................................................
36
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
3.1 Persen Pemerangkapan DPPH oleh Pakkat Segar, Pakkat Rebus
dan Pakkat Bakkar ..........................................................................
24
3.2 Persen Pemerangkapan DPPH oleh Vitamin C ...............................
24
3.3 Hasil Persamaaan Regresi Linier dan Hasil Analisa IC50 dari
Pakkat Segar, Pakkat Rebus Pakkat Bakar dan Vitamin C ............
25
3.4 Kategori Nilai IC50 Sebagai Antioksidan .......................................
26
3.5 Nilai Absorbansi Asam Galat .........................................................
29
3.5 Hasil Kandungan Fenolik Total dari Pakkat Segar, Pakkat
Rebus dan Pakkat Bakar .................................................................
30
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
3.1
3.2
3.3
Halaman
Kurva Serapan Panjang Gelombang Maksimum Larutan
DPPH 40 μg/ml Dalam Metanol Secara Spektrofotometri
Visibel ........................................................................................
23
Kurva Serapan Panjang Gelombang Maksimum Larutan
Asam Galat 1000 μg/ml Secara spektrofotometri Visibel .........
27
Kurva Kalibrasi Larutan Standar Asam Galat ...........................
29
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1
Identifikasi Tumbuhan .............................................................
36
2
Sampel yang digunakan ............................................................
37
3
Tumbuhan Rotan (Calamus caesius Blume.) ............................
38
4.
Gambar Alat Spektrofotometer UV-Visibel (shimadzu)...........
39
5
Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Segar .................................
40
6
Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Rebus ................................
41
7
Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Bakar .................................
42
8
Bagan Alir Pembuatan Larutan Blanko DPPH 0,5 mM,
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum dan Waktu
Kerja .........................................................................................
43
9
Bagan Alir Uji Aktivitas Antioksidan pada Pakkat ..................
44
10
Bagan Alir Uji Aktivitas Antioksidan pada Vitamin C .............
45
11
Bagan Alir Pembuatan Larutan Induk Asam Galat, Penentuan
Panjang Gelombang Maksimum, Waktu Kerja dan Standar
Kurva kalibrasi Asam Galat .....................................................
46
Bagan
Alir Penentuan Kandungan Fenolik
Total
Pada Pakkat ..............................................................................
47
13
Hasil Pengukuran Waktu Kerja Larutan DPPH .......................
48
14
Hasil Uji Aktivitas Antioksidan ....................................................
50
15
Contoh
Perhitungan
Persen Pemerangkapan dan
Perhitungan Nilai IC50 ..............................................................
51
Hasil Pengukuran Waktu Kerja Larutan Asam Galat dengan
Pereaksi Folin-Ciocalteu dan Natrium Karbonat .....................
59
Contoh Perhitungan Kandungan Total Fenol Pakkat segar,
Pakkat Rebus dan Pakkat Bakar ...............................................
62
12
16
17
xv
Universitas Sumatera Utara
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
SKRIPSI
OLEH:
M. ADHLI TAWAKKAL S.B.
NIM 141524045
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN PENENTUAN
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
SKRIPSI
Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar
Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
M. ADHLI TAWAKKAL S.B.
NIM 141524045
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2017
ii
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN PENENTUAN
KANDUNGAN FENOLIK TOTAL PADA
PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
OLEH:
M. ADHLI TAWAKKAL S.B.
NIM 141524045
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 07 Juni 2017
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt. Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt.
NIP 195008281976032002
NIP 195103261978022001
Pembimbing II,
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP 195008281976032002
Drs. Fathur Rahman, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Drs. Fathur Rahman, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Medan,
Juli 2017
Fakultas Farmasi,
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP. 195707231986012001
iii
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan karunia
yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang
berjudul “Uji Aktivitas Antioksidan dan Penentuan Kandungan Fenolik Total
pada Pakkat (Calamus caesius Blume.)”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu
syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.,
selaku Dekan Fakultas Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis
selama perkuliahan di Fakultas Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih
kepada Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., dan Bapak Drs. Fathur
Rahman Harun, M.Si., Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam
membimbing penulis dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab, memberikan
petunjuk dan saran-saran selama penelitian hingga selesainya skripsi ini. Ucapan
terima kasih juga penulis sampaikan kepada Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt.,
selaku ketua penguji, dan Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku anggota
penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi ini, dan Ibu
Khairunnisa, S.Si, M.Pharm, Ph.D, Apt., selaku dosen pembimbing akademik
serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak
membimbing penulis selama masa perkuliahan hingga selesai. Penulis juga
mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga untuk yang teristimewa
ayahanda Syamsul Bachri dan ibunda Salmah Dan kepada saudara penulis, yaitu
iv
Universitas Sumatera Utara
Putri Asymah, Amk, Maega Wahyuni, B.Eng, dan M. Noor Ichsan, Amd yang
telah memberi do’a restu, motivasi dan semangat agar penulis tidak pernah
berhenti untuk memempuh cita - cita yang diharapkan.
Terimakasih juga penulis ucapkan kepada teman-teman Farmasi Ekstensi
angkatan 2014 untuk kebersamaan dan dorongan semangatnya, serta semua pihak
yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang telah banyak membantu hingga
selesainya penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum
sempurna, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang
membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.
Medan,
Penulis,
Juni 2017
M. Adhli Tawakkal .S.B
NIM 141524045
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan dibawah ini :
Nama
: M. Adhli Tawakkal .S.B
NIM
: 141524045
Program Studi
: S-1 Ekstensi Farmasi
Judul Skripsi
: Uji Aktivitas Antioksidan dan Penentuan Kandungan
Fenolik Total pada Pakkat (Calamus caesius Blume.).
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dan
hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis setelah disebutkan sumbernya didalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam
skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikian surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagai mana mestinya.
Medan,
Juni 2017
Yang Membuat Pernyataan
M. Adhli Tawakkal .S.B
NIM 141524045
vi
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN KANDUNGAN FENOLIK TOTAL
PADA PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
ABSTRAK
Rotan muda atau yang biasa disebut dengan pakkat merupakan makanan
khas berbuka puasa masyarakat Mandailing yang dipercaya dapat meningkatkan
nafsu makan dan mempunyai khasiat sebagai obat kencing manis dan malaria.
Kandungan kimia yang terdapat dalam pakkat antara lain vitamin C, flavonoid,
alkaloid, saponin dan glikosida yang berpotensi sebagai antioksidan. Antioksidan
adalah senyawa pemberi elektron yang mampu menginaktivasi berkembangnya
reaksi oksidasi, dengan cara mencegah terbentuknya radikal bebas dan
menghambat reaksi oksidasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk menentukan
kekuatan aktivitas antioksidan serta menentukan kandungan fenolik total pada
pakkat segar, rebus dan bakar.
Metode yang dilakukan untuk uji aktivitas antioksidan adalah metode
pemerangkapan radikal bebas 1,1-diphenyl-2-picryhydrazil (DPPH) dan
kandungan fenolik total metode Folin-Ciocalteu dengan pembanding asam galat.
Kemudian diukur menggunakan spektrofotometer visibel.
Hasil penelitian uji aktivitas antioksidan dengan metode pemerangkapan
radikal bebas DPPH pada sampel pakkat yang segar, direbus dan dibakar
menunjukkan kekuatan antioksidan dalam kategori yang sangat lemah dengan
nilai IC50 masing-masing sebesar 2672,24 μg/ml; 3841,76 μg/ml; dan
1497,74 μg/ml dan vitamin C sebagai control positif menunjukkan kekuatan
antioksidan dalam kategori sangat kuat dengan nilai IC50 4,81 μg/ml. Hasil
kandungan fenolik total yang didapat dengan metode Folin-Ciocalteau pada
pakkat yang segar, pakkat direbus dan pakkat dibakar masing-masing sebesar
2,9674 mg GAE/g; 1,7780 mg GAE/g; dan 5,9856 mg GAE/g.
Kata kunci: Aktivitas antioksidan, DPPH, fenolik total, Folin-Ciocalteau, pakkat
\
vii
Universitas Sumatera Utara
ANTIOXIDANT ACTIVITIES TEST AND THE TOTAL PHENOLIC
CONTENT IN PAKKAT (Calamus caesius Blume.)
ABSTRACT
Young rattan or commonly referred to as pakkat is a typical meal of
Mandailing peoples at the time of the fast breaking which is believed to increase
appetite and has efficacy as a drug diabetes and malaria. Chemical contains
contained in pakkat include vitamin C, flavonoids, alkaloids, saponins and
glycosides which have potential function as an antioxidant. Antioxidants are
compounds electron donor which are able to inactivate the development of the
oxidation reaction, by preventing the formation of free radicals and it can inhibit
the oxidation reaction. The purpose of this study was to determine the antioxidant
activities as well as knowing the total phenolic content in pakkat fresh, boiled and
grilled.
The method used to test the antioxidant acitivities of free radical trapping
method is 1,1-diphenyl-2-picryhydrazil (DPPH) and total phenolic content of
Folin-Ciocalteu method with the comparison of gallic acid. It was then measured
using a visible spectrophotometer.
The results of this research test, the antioxidant activities with DPPH free
radical trapping method on samples pakkat fresh, boiled and grilled showed those
the antioxidant power in the category of very weak with IC50 values of each of
2672.24 μg/ml; 3841,76 μg/ml; and 1497.74 μg/ml and vitamin C as a positive
control showed the antioxidant power in the category of very strong with IC50
value of 4.81 μg/ml and the results of total phenolic content by Folin-Ciocalteau
method on fresh pakkat, boiled pakkat and grilled pakkat of 2.9674 mg GAE/g,
1.7780 mg GAE/g and 5.9856 mg GAE/g.
Keywords: antioxidant activities, DPPH, total phenolic, Folin-Ciocalteau, pakkat
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .....................................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN .....................................................................
iii
KATA PENGANTAR ............................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT .......................................
vi
ABSTRAK ...............................................................................................
vii
ABSTRACT .............................................................................................
viii
DAFTAR ISI ............................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ....................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR ...............................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .....................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah .............................................................
3
1.3 Hipotesis ..............................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian .................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian ...............................................................
4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ....................................................
4
BAB II Tinjauan Pustaka .......................................................................
5
2.1 Pakkat (Calamus Caesius Blume.) ......................................
5
2.1.1 Deskripsi Rotan ..........................................................
6
2.1.2 Tempat Tumbuh dan Penyebaran Rotan ....................
6
2.1.3 Pemanfaatan Rotan .....................................................
6
ix
Universitas Sumatera Utara
2.2 Antioksidan ..........................................................................
7
2.3 Senyawa Fenolik ..................................................................
9
2.4 Spektrofotometri UV-Visibel ...............................................
10
2.5 Metode Pengukuran Antioksidan..........................................
11
2.5.1 Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH ... ...................
11
2.5.2 Penentuan Kandungan Fenolik Total..........................
13
BAB III METODE PENELITIAN ..........................................................
15
3.1 Alat dan Bahan .....................................................................
15
3.1.1 Alat ............................................................................
15
3.1.2 Bahan ..........................................................................
15
3.2 Pembuatan Pereaksi ... ..........................................................
16
3.2.1 Larutan DPPH 0,5 mM ..............................................
16
3.2.2 Larutan Natrium Karbonat 20% ................................
16
3.3 Prosedur Penelitian ..............................................................
16
3.3.1 Pengambilan Sampel .................................................
16
3.3.2 Penyiapan Sampel ......................................................
16
3.3.2.1 Pakkat Segar .................................................
16
3.3.2.2 Pakkat Rebus ................................................
17
3.3.2.3 Pakkat Bakar .................................................
17
3.4 Pengujian Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode
Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH ...............................
17
3.4.1 Pembuatan Larutan Blanko ........................................
17
3.4.2 Pengukuran
Panjang Gelombang Serapan
Maksimum DPPH ....................................................
18
3.4.3 Penentuan Waktu Kerja (Operating Time) .................
18
x
Universitas Sumatera Utara
3.4.4 Pembuatan Larutan Induk .........................................
18
3.4.4.1 Pembuatan Larutan Induk Pakkat ................
18
3.4.4.2 Pembuatan Larutan Induk Vitamin C ...........
18
3.4.5 Pembuatan Larutan Uji .............................................
18
3.4.5.1 Pembuatan Larutan Uji Pakkat ....................
18
3.4.5.2 Pembuatan Larutan Uji Vitamin C ...............
19
3.4.6 Analisis Persen Pemerangkapan Radikal Bebas ........
19
3.4.7 Analisis Nilai IC50 ......................................................
19
3.5 Penentuan Kandungan Fenolik Total ...................................
20
3.5.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Asam Galat .............
20
3.5.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Asam Galat ...............................................................
20
3.5.3 Penentuan Waktu Kerja (Operating Time) .................
20
3.5.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi Asam Galat ...................
21
3.5.5 Pembuatan Larutan Uji Pakkat ....................................
21
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................
22
4.1 Identifikasi Tumbuhan ..........................................................
22
4.2 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Pakkat Metode
Metode DPPH ........................................................................
22
4.2.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Serapan
Maksimum ....................................................................
22
4.2.2 Hasil Penentuan Waktu Pengukuran (operating time)..
23
4.2.3 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Pakkat .............
23
4.2.4 Hasil Analisis Nilai IC50 .............................................
25
4.3 Hasil Analisis Kandungan Fenolik Total ...............................
27
xi
Universitas Sumatera Utara
4.3.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Asam Galat ....................................................................
27
4.3.2 Hasil Penentuan Waktu (operating time) .. ....................
28
4.3.3 Hasil Penentuan Kurva Kalibrasi Asam Galat ..............
28
4.3.4 Hasil Penentuan Kandungan Fenolik Total pada
Pakkat ..........................................................................
29
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................
32
5.1 Kesimpulan ...........................................................................
32
5.2 Saran ........................... ..........................................................
32
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
33
LAMPIRAN ...............................................................................................
36
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
3.1 Persen Pemerangkapan DPPH oleh Pakkat Segar, Pakkat Rebus
dan Pakkat Bakkar ..........................................................................
24
3.2 Persen Pemerangkapan DPPH oleh Vitamin C ...............................
24
3.3 Hasil Persamaaan Regresi Linier dan Hasil Analisa IC50 dari
Pakkat Segar, Pakkat Rebus Pakkat Bakar dan Vitamin C ............
25
3.4 Kategori Nilai IC50 Sebagai Antioksidan .......................................
26
3.5 Nilai Absorbansi Asam Galat .........................................................
29
3.5 Hasil Kandungan Fenolik Total dari Pakkat Segar, Pakkat
Rebus dan Pakkat Bakar .................................................................
30
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
3.1
3.2
3.3
Halaman
Kurva Serapan Panjang Gelombang Maksimum Larutan
DPPH 40 μg/ml Dalam Metanol Secara Spektrofotometri
Visibel ........................................................................................
23
Kurva Serapan Panjang Gelombang Maksimum Larutan
Asam Galat 1000 μg/ml Secara spektrofotometri Visibel .........
27
Kurva Kalibrasi Larutan Standar Asam Galat ...........................
29
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1
Identifikasi Tumbuhan .............................................................
36
2
Sampel yang digunakan ............................................................
37
3
Tumbuhan Rotan (Calamus caesius Blume.) ............................
38
4.
Gambar Alat Spektrofotometer UV-Visibel (shimadzu)...........
39
5
Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Segar .................................
40
6
Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Rebus ................................
41
7
Bagan Alir Persiapan pada Pakkat Bakar .................................
42
8
Bagan Alir Pembuatan Larutan Blanko DPPH 0,5 mM,
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum dan Waktu
Kerja .........................................................................................
43
9
Bagan Alir Uji Aktivitas Antioksidan pada Pakkat ..................
44
10
Bagan Alir Uji Aktivitas Antioksidan pada Vitamin C .............
45
11
Bagan Alir Pembuatan Larutan Induk Asam Galat, Penentuan
Panjang Gelombang Maksimum, Waktu Kerja dan Standar
Kurva kalibrasi Asam Galat .....................................................
46
Bagan
Alir Penentuan Kandungan Fenolik
Total
Pada Pakkat ..............................................................................
47
13
Hasil Pengukuran Waktu Kerja Larutan DPPH .......................
48
14
Hasil Uji Aktivitas Antioksidan ....................................................
50
15
Contoh
Perhitungan
Persen Pemerangkapan dan
Perhitungan Nilai IC50 ..............................................................
51
Hasil Pengukuran Waktu Kerja Larutan Asam Galat dengan
Pereaksi Folin-Ciocalteu dan Natrium Karbonat .....................
59
Contoh Perhitungan Kandungan Total Fenol Pakkat segar,
Pakkat Rebus dan Pakkat Bakar ...............................................
62
12
16
17
xv
Universitas Sumatera Utara