32 indikator fenolftalein 0.5 dalam alkohol sampai terbentuk warna merah
muda tetap tidak berubah selama 15 detik. Perhitungan bilangan asam dilakukan dengan menggunakan persamaan sebagai berikut :
Vt – Vo x N KOH x 56.1 Bilangan asam mg KOHg sampel =
Berat sampel g
Keterangan :
Vt = volume KOH yang terpakai untuk sampel Vo = volume KOH yang terpakai untuk blanko
N = normalitas larutan standar KOH yang digunakan
2. Bilangan Peroksida SNI 01-3555-1994
Sampel ditimbang sebanyak 5 g ke dalam erlenmeyer 300 ml. Ditambahkan 10 ml kloroform dan 15 ml asam asetat glasial, kemudian
larutkan sampel dengan menggoyangkan erlenmeyer. Selanjutnya ditambahkan 1 ml KI jenuh dan tutup segera erlenmeyer sambil dikocok
kira-kira 5 menit di tempat gelap pada suhu 15
o
-25
o
C. Ditambahkan 75 ml air suling dan kocok dengan kuat. Titer dengan larutan standar natrium
tiosulfat 0.02 N dengan larutan pati sebagai indikator. Perhitungan bilangan peroksida dilakukan dengan menggunakan persamaan sebagai
berikut : Vt – Vo x NNa
2
S
2
O
3
x 1000 Bilangan peroksida meqkg sampel =
Berat sampel g Keterangan
: Vt = volume natrium tiosulfat yang terpakai
Vo = volume natrium tiosulfat yang terpakai untuk blanko N = normalitas larutan standar natrium tiosulfat yang digunakan
33
3. Thiobarbituric Acid TBA Rossell, 1983
Bahan ditimbang sebanyak 10 gram dengan teliti, lalu dimasukkan ke dalam waring blender, ditambahkan 50 ml aquades dan dihancurkan
selama 2 menit. Sampel dipindahkan secara kuantitatif ke dalam labu destilasi sambil dicuci dengan 47.5 ml aquades. Selanjutnya, ditambahkan
2.5 ml HCL 4 M hingga pH mencapai 1.5, kemudian ditambahkan batu didih dan pencegah buih anti foaming agent secukupnya dan
dipasangkan labu destilasi pada alat destilasi. Destilasi dijanlan dengan pemanasan tinggi sehingga diperoleh 50 ml
destilat selama 10 menit pemanasan. Destilat yang diperoleh diaduk merata, kemudian 5 ml destilat dipipet ke dalam tabung reaksi bertutup.
Ditambahkan 5 ml pereaksi TBA, ditutup, dan dicampur merata lalu dipanaskan selama 35 menit dalam air mendidih. Dibuat pula blanko
dengan menggunakan 5 ml aquades dan 5 ml pereaksi, lakukan seperti pada penetapan sampel.
Tabung reaksi didinginkan dengan pendingin selama 10 menit, kemudian diukur absorbansinya D pada panjang gelombang 528 nm
dengan larutan blanko sebagai titik nol. Digunakan sampel sel berdiameter 1 cm. Bilangan TBA dihitung dan dinyatakan dalam mg malonaldehid per
kg sampel. TBA = 7.8 x Absorbansi
4. Total Mikroba Harrigan, 1998
