1956 Hasil isolasi alkaloida dari ekstak etanol dengan metode pengocokan asam basa dapat dilihat pada lampiran 5, gambar 4 halaman 61 .
3.9 Analisis Senyawa Alkaloida Hasil Isolasi Secara Kromatografi Lapis
Tipis KLT
Terhadap ekstrak alkaloida kasar dilakukan KLT untuk melihat kandungan alkaloidanya menggunakan plat pra lapis silika gel 60 F
254
dengan fase gerak kloroform - metanol - amonia 85 : 15 : 1. Sebagai penampak bercak
dipakai pereaksi Dragendorff. Cara kerja :
Ke dalam chamber dimasukkan campuran pengembang. Ekstrak etanol ditotolkan pada plat pra lapis silika gel 60 F
254
, setelah kering dimasukkan kedalam chamber yang telah jenuh dengan uap pengembang dan ditutup rapat.
Sesudah pengembangan selesai plat dikeluarkan dari chamber dan dikeringkan di udara, kemudian plat disemprot
dengan larutan penampak bercak Dragendorff, warna bercak yang terjadi diamati dan dihitung harga Rf-nya. Hasil kromatogram ekstak etanol dan dapat dilihat
pada lampiran 6, gambar 5 halaman 62 . Adams et al, 1970; Sastro Hamidjojo, 1985; Stahl, 1985
3.10 Isolasi Senyawa Alkaloida Secara Kromatografi Lapis Tipis Preparatif
Isolasi senyawa alkaloida dilakukan secara KLT preparatif, sebagai fase gerak digunakan kloroform - metanol - amonia 85 : 5 : 1 dan sebagai penampak
bercak digunakan pereaksi Dragendorff.
Universitas Sumatera Utara
Cara kerja: Ekstrak diencerkan dengan etanol dan ditotolkan pada jarak 2 cm dari tepi
bawah plat pra lapis silika gel 60 F
254
berukuran 20 x 20 cm yang telah diaktifkan sehingga membentuk pita. Setelah kering plat pra lapis silika gel 60 F
254
dimasukkan kedalam bejana yang telah jenuh dengan uap fase gerak kloroform - metanol - amonia 85 : 5 : 1, pengembang dibiarkan naik membawa komponen
yang ada. Setelah mencapai batas pengembang plat dikeluarkan dari bejana lalu dikeringkan. Bagian tengah plat ditutup dengan kaca yang bersih sedangkan pada
sisi kanan dan kiri plat disemprot dengan pereaksi Dragendorff dan dipanaskan dengan hair dryer. Bercak berwarna merah jingga yang terdapat pada sisi kiri yang
dihubungkan pada sisi kanan terhadap isolat yang diperoleh dikerok dan dikumpulkan, direndam dengan metanol satu malam dan disaring kemudian
pelarutnya diuapkan. Kemudian dilakukan uji kemurnian terhadap isolat A
1
yang diperoleh Hasil isolasi senyawa alkaloida secara kromatogram KLT preparatif
dapat dilihat pada lampiran 7, gambar 6 halaman63.
3.11 Analisis Senyawa Alkaloida Hasil Isolasi Secara Kromatografi Lapis
Tipis KLT Dengan Satu Arah Memakai Fase Gerak Yang Berbeda
Terhadap ekstrak alkaloida kasar dilakukan KLT untuk melihat kandungan alkaloidanya menggunakan plat pra lapis silika gel 60 F
254
dengan fase gerak kloroform - metanol - amonia dengan berbagai perbandingan, yaitu : 85 :
15 : 1, dan 95 : 5 : 1. Sebagai penampak bercak dipakai pereaksi Dragendorff. Cara kerja :
Universitas Sumatera Utara
Ke dalam chamber dimasukkan campuran pengembang. Ekstrak etanol ditotolkan pada plat pra lapis silika gel 60 F
254
, setelah kering dimasukkan kedalam chamber yang telah jenuh dengan uap pengembang dan ditutup rapat. Sesudah
pengembangan selesai plat dikeluarkan dari chamber dan dikeringkan di udara, kemudian plat disemprot dengan larutan penampak bercak Dragendorff, warna
bercak yang terjadi diamati dan dihitung harga Rf-nya. Adams et al, 1970; Sastro Hamidjojo, 1985; Stahl, 1985. Hasil kromatogram KLT satu arah dengan
memakai fase gerak berbeda dapat dilihat pada lampiran 8, gambar 7 halaman 64.
3.12 Uji Kemurnian Senyawa Alkaloida Hasil Isolasi
