Spesifisitas Validasi metode analisis penetapan kadar imunoglobulin G

Tabel 10. Uji Akurasi dengan Uji Rekoveri Pengu langan Dens. Optik OD Kons. IgG total ngmL Kons. IgG baku ngmL Bobot sampel mg Kons IgG sampel ngmL Reko veri 1 0,64 38,19 15,6 14,66 18,04 129,00 2 0,64 38,42 15,6 14,23 18,54 127,00 3 0,63 37,31 15,6 15,72 17,86 124,00 4 0,61 35,81 15,6 15,13 17,67 116,28 5 0,62 36,38 15,6 14,98 17,56 120,64 6 0,56 32,15 15,6 15,62 18,89 85,00 7 0,57 32,69 15,6 16,08 18,79 89,49 8 0,64 38,31 15,6 14,73 20,24 115,83 9 0,59 34,13 15,6 15,09 19,48 93,91 Jumlah 1001,15 Rata rata 111,24 Evaluasi hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa nilai persen rekoveri 111,24 yang memenuhi kriteria keberterimaan persen rekoveri yang terletak antara 85-115. Hal ini menunjukkan bahwa sistem operasional instrumen dan prosedur metode sudah baik dengan respon.

4.2.4 Spesifisitas

Spesifisitas adalah kemampuan metode untuk mendeteksi mengukur analat secara cermat dan seksama dengan adanya analat asingbahanmatriks lain, matriks yang merupakan sampel blanko tanpa analat dan kemungkinan dapat mengandung analat lain yang dapat mempengaruhimengganggu penetapan yang dicari. Sehingga perlu diketahui apakah metode yang akan digunakan spesifik untuk analisis analat dan analat lain yang tidak diinginkan tidak mengganggu mempengaruhi hasil analisis Chan 2004. Dari hasil penetapan sampel matriks tanpa IgG IgG negatif dan sampel yang mengandung IgG IgG positif maka diperoleh densitas optik yang baik untuk sampel yang mengandung IgG pada perbandingan kadar dari pengenceran 110 sampai 11000 adalah 0,71 dan 0,10. Densitas optik larutan baku bovine IgG yang tercantum pada Tabel 4 digunakan sebagai kurva baku, dan data densitas optik larutan sampel dan larutan matriks dengan dan tanpa kandungan IgG tertera pada Tabel 11. Hasil analisis pada larutan matriks sampel tanpa IgG terlihat densitas optik pada kadar 110 sampai dengan 11000 adalah 0,07 ngmL dan 0,07 ngmL, yang menunjukkan nilai dibawah 0.200 atau nilai yang hampir sama dengan nilai densitas optik larutan baku bovine IgG pada kadar 0 ngmL yaitu 0,08 ngmL seperti yang tercantum pada Tabel 3, blanko assay diluent adalah 0,07 dan blanko substrat sebesar 0,06. Tabel 11. Densitas optik larutan sampel dan larutan matriks 1,5 mgmL dengan dan tanpa kandungan IgG Pengenceran sampelmatriks OD sampel IgG pos. OD matriks IgG neg. 1:10 0,71 0,07 1:100 0,38 0,07 1:500 0,26 0.07 1:1000 0,10 0,07 Hal ini menunjukkan tidak adanya kandungan bovine IgG dalam larutan matriks sehingga dapat disimpulkan bahwa matriks sampel yang terkandung dalam sampel susu bubuk skim tidak mengganggu dalam analisis dan spesifik untuk penetapan bovine IgG dalam sampel susu bubuk skim.

4.2.6 Penetapan kadar IgG pada susu bubuk skim dengan kadar Ig G bervariasi