16
B. Penelitian Utama
1. Penyiapan Media Kultivasi
Susunan media kultivasi yang akan dibuat dalam penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 3. yang dibuat dua kali ulangan.
Tabel 3. Perbandingan media kultivasi
Sandi Media Rasio CN
Perbandingan Media Urea
A 3:1
80 Limbah Cair Tahu dan 20 Air Kelapa
0.0558 gr B
5:1 0.0243 gr
C 7:1
0.0120 gr D
9:1 0.0054 gr
E 11:1
0.0013 gr Jenis dan jumlah mineral yang digunakan dalam penelitian ini sesuai dengan
yang digunakan oleh Dulmage dan Rhodes 1971, yaitu 0.3 gl MgSO
4
.7H
2
O, 0.02 gl ZnSO
4
.7H
2
O, 0.02 gl FeSO
4
.7H
2
O, 0.02 gL ZnSO
4
.7H
2
O dan 1.0 gl CaCO
3
. Pembuatan media kultivasi yang dilakukan adalah sebagai berikut : limbah cair
tahu, air kelapa, urea, trace element dan CaCO
3
dicampur hingga homogen kemudian pH diatur hingga 6.8 - 7.2 selanjutnya disterilisasi. Setelah disterilisasi menggunakan
autoklaf didinginkan sampai ± 50
o
C. Kemudian media dibagi-bagi dalam beberapa labu erlenmeyer dan ditambahkan starter inokulum B.t.a sebanyak 10 dari volume media.
2. Kultivasi
Kultivasi B.t.a dilakukan secara curah dengan kondisi kultivasi sebagai berikut : kultivasi dilakukan dalam labu erlenmeyer 250 ml pada suhu 28-32
o
C, pH awal media diatur 6.5-7.5, volume media fermentasi 50 ml. Diinkubasi dengan kecepatan 180 rpm,
dan dipanen pada waktu inkubasi 0-72 jam. Kultivasi dilakukan dua kali ulangan dengan kondisi kultivasi yang sama antara ulangan I dan ulangan II disajikan dalam
Tabel 4. sebagai berikut : Tabel 4. Kondisi kultivasi
Sandi Media Sandi Media Kultivasi
Jumlah starter yang ditambahkan
A A1 dan A2
10 vw B
B1 dan B2 10 vw
C C1 dan C2
10 vw D
D1 dan D2 10 vw
E E1 dan E2
10 vw
3. Pemanenan
Pemanenan hasil kultivasi dilakukan pada waktu inkubasi yang telah ditentukan, yaitu pada jam ke-0,3,6,9,12,15,18,24,36,48 dan jam ke-72. Kemudian dilakukan
analisis pH, total mikroba, jumlah spora hidup, total gula sisa, kekeruhan, bobot kering biomassa dan toksisitas. Gambar 7. menunjukkan diagram alir produksi bioinsektisida
B.t.a .
17
4. Penentuan Toksisitas Produk
Kategori