Kerangka Konsep TINJAUAN PUSTAKA
Daun sirsak Annona muricata L. yang dipetik di kebun LIPI dicuci bersih kemudian dijemur dibawah sinar matahari langsung. Daun yang telah
kering diblender hingga menjadi serbuk daun sirsak.
11,21
3.5.2 Pembuatan ekstrak daun sirsak Pembuatan ekstrak daun sirsak Annona muricata L. menggunakan
metode maserasi yaitu menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan pengadukan pada temperatur ruangan.
11
3.5.3 Pembuatan Larutan a.
Pembuatan Larutan DPPH 0,004 0,004 g100 mL atau 0,0004 g10 mL.
DPPH yang ditimbang sebanyak 0,0004 g dilarutkan dalam 10 mL etanol 96.
20
Larutan dikocok hingga homogen dan diukur absorbansinya dengan spektrofotometer UV-Vis untuk memperoleh
panjang gelombang maksimum. Panjang gelombang maksimum untuk larutan DPPH adalah 517 nm.
20
b. Pembuatan Larutan Blanko
4500 μL etanol ditambah 500 μL larutan DPPH lalu dikocok hingga homogen.
c. Pembuatan Larutan Uji
1. Larutan Induk 10.000 ppm
50 mg ekstrak dilarutkan dalam 5 mL etanol = 10 mgmL = 10.000 μgml ppm
2. Larutan Seri 1, 10,100,1000 ppm.
a 1000 ppm
20
500 μL dari larutan induk ditambahkan etanol sampai
volumenya 4500 μL. Tambahkan 500 μL larutan DPPH. b
100 ppm
50 μL dari larutan induk ditambahkan etanol sampai volumenya 4500 μL. Tambahkan 500 μL larutan DPPH.
c 10 ppm
5 μL dari larutan induk ditambahkan etanol sampai volumenya 4500 μL. Tambahkan 500 μL larutan DPPH.
d 1 ppm
5 μL dari larutan 1000 ppm ditambahkan etanol sampai volumenya 4500 μL. Tambahkan 500 μL larutan DPPH.
d. Pembuatan Larutan Kontrol Positif Vitamin C
1. Larutan Induk 100 ppm
22
1 mg Vitamin C murni dilarutkan dalam 5 mL etanol = 0,1 mgmL = 100 μgml ppm.
2. Larutan Seri 2,4,6,8 ppm
a 2 ppm
22
100 μL dari larutan induk ditambahkan etanol sampai volumenya
4500 μL. Tambahkan 500 μL larutan DPPH. b 4 ppm
200 μL dari larutan induk ditambahkan etanol sampai volumenya 4500 μL. Tambahkan 500 μL larutan DPPH.
c 6 ppm 300 μL dari larutan induk ditambahkan etanol sampai
volumenya 4500 μL. Tambahkan 500 μL larutan DPPH.
d 8 ppm 400 μL dari larutan induk ditambahkan etanol sampai
volumenya 4500 μL. Tambahkan 500 μL larutan DPPH.
Semua larutan dikocok dengan alat shaker waterbath agar larutan menjadi homogen. Setelah dikocok kemudian didiamkan diinkubasi.
Kedua proses tersebut berlangsung selama 30 menit dalam suhu ruangan