12
Gambar 3.
kromatogram yang diperoleh dari analisis KCKT Sumber: Ornaf dan Dong, 2005.
Lebar puncak yang diukur biasanya merupakan lebar pada 5 tinggi puncak Ornaf dan Dong, 2005.
Tinggi dan luas puncak berkaitan secara proporsional dengan kadar atau jumlah analit tertentu yang terdapat dalam sampel memiliki informasi
kuantitatif. Namun demikian, luas puncak lebih umum digunakan dalam perhitungan kuantitatif karena lebih akuratcermat daripada perhitungan
menggunakan tinggi puncak. Hal ini dikarenakan luas puncak relatif tidak banyak dipengaruhi oleh kondisi kromatografi, kecuali laju alir. Sementara itu, tinggi
puncak dipengaruhi oleh banyak faktor seperti misalnya faktor tambat, suhu kolom serta cara injeksi sampel Ornaf dan Dong, 2005.
2.4.3.2 Waktu tambat
Periode waktu antara penyuntikan sampel dan puncak maksimum yang terekam oleh detector disebut sebagai waktu tambatretention time t
R
. Waktu tambat dari suatu komponen yang tidak ditahandihambat oleh fase diam disebut
sebagai waktu hampavoid time t . Waktu tambat merupakan fungsi dari laju alir
fase gerak dan panjang kolom. Jika fase gerak mengalir lebih lambat atau kolom semakin panjang, waktu hampa dan waktu tambat akan semakin besar, dan
Universitas Sumatera Utara
13 sebaliknya bila fase gerak mengalir lebih cepat atau kolom semakin pendek, maka
waktu hampa dan waktu tambat akan semakin kecil Meyer, 2004.
2.4.3.3 Faktor Kapasitas
Waktu tambat dipengaruhi oleh laju alir, ukuran kolom dan parameter yang lain. Oleh karena itu, diperlukan suatu ukuran derajat tambatan dari analit
yang lebih independen yaitu faktor kapasitas k’. Faktor kapasitas dihitung dengan membagi waktu tambat bersih t’
R
dengan waktu hampa t seperti yang
dapat dilihat pada rumus berikut ini Ornaf dan Dong, 2005.
Dalam beberapa literatur lain, faktor kapasitas juga disebut sebagai faktor tambat k. Idealnya, analit yang sama jika diukur pada dua instrumen yang
berbeda namun memiliki fase diam dan fase gerak yang sama, maka faktor tambat dari analit pada kedua system KCKT tersebut secara teoritis adalah sama Meyer,
2004. Faktor tambat yang disukai berada diantara nilai 1 hingga 10. Jika nilai k
terlalu kecil menunjukkan bahwa analit terlalu cepat melewati kolom sehingga tidak terjadi interaksi dengan fase diam dan oleh karena itu tidak akan muncul
dalam kromatogram. Sebaliknya nilai k yang terlalu besar mengindikasikan waktu analisis akan panjang Meyer, 2004.
Faktor kapasitas dipengaruhi oleh perbandingan komposisi fase gerak yang digunakan sehingga akan menghasilkan resolusi dan waktu retensi dari puncak-
puncak kromatogram yang berbeda pada setiap perbandingan komposisi fase gerak seperti yang terlihat pada Gambar 4 berikut Snyder, dkk, 2010.
Universitas Sumatera Utara
14
Gambar 4
. Pemisahan dari Sampel Herbisida dengan Berbagai Perbandingan Komposisi Fase Gerak Sumber: Snyder, dkk, 2010.
2.4.3.4 Selektivitas
