14
Gambar 4
. Pemisahan dari Sampel Herbisida dengan Berbagai Perbandingan Komposisi Fase Gerak Sumber: Snyder, dkk, 2010.
2.4.3.4 Selektivitas
Kemampuan system kromatografi dalam memisahkanmembedakan analit yang berbeda dikenal sebagai selektivitas α. Selektivitas umumnya tergantung
pada sifat analit itu sendiri, interaksinya dengan permukaan fase diam serta jenis fase gerak yang digunakan Meyer, 2004.
Selektivitas ditentukan sebagai rasio perbandingan dua faktor kapasitas dari analit yang berbeda. Selektivitas ditentukan dengan rumus sebagai berikut:
Nilai selektivitas yang didapatkan dalam sistem KCKT harus lebih besar dari 1 Ornaf dan Dong, 2005.
Universitas Sumatera Utara
15
2.4.3.5 Efisiensi Kolom
Ukuran kuantitatif dari efisiensi kolom disebut sebagai nilai lempengplate number
N Ornaf dan Dong, 2005. Kolom yang efisien adalah kolom yang mampu menghasilkan puncak yang sempit dan memisahkan analit dengan baik.
Nilai lempeng akan semakin tinggi jika ukuran kolom semakin panjang, hal ini berarti proses pemisahan yang terjadi semakin baik. Hubungan proporsionalitas
antara nilai lempeng dengan panjang kolom disebut sebagai nilai HETPHigh Equivalent of a Theoritical Plate
. Praktik HPLC yang baik adalah mendapatkan nilai HETP yang kecil untuk nilai N yang maksimum dan efisiensi kolom yang
tertinggi Snyder dan Kirkland, 1979. Parameter yang dapat mempengaruhi nilai lempeng antara lain waktu
tambat puncak, ukuran partikel kolom, laju alir fase gerak, suhu kolom, viskositas fase gerak dan berat molekul analit. FDA merekomendasikan agar tiap analisis
KCKT yang valid mempunyai nilai lempeng lebih besar dari 2000 Meyer, 2004.
2.4.3.6 Resolusi
Resolusi merupakan derajat pemisahan dari dua puncak analit yang bersebelahan Ornaf dan Dong, 2005.
Harga resolusi yang semakin besar memiliki arti proses pemisahan semakin bagus dan sebaliknya resolusi yang kecil merupakan pertanda proses
pemisahan yang buruk. Dua puncak yang tidak terpisah dengan sempurna namun sudah dapat terlihat memiliki resolusi 1. Sedangkan bila kedua puncak yang saling
berdekatan terpisah sempurna tepat pada garis alas, resolusi bernilai 1,5. Oleh karena itu pada analisis kuantitatif, resolusi yang ditunjukkan harus lebih besar
Universitas Sumatera Utara
16 dari 1,5. Sementara bila kedua puncak memiliki perbedaan yang signifikan, maka
diperlukan nilai resolusi yang lebih besar Meyer, 2004. Pemisahan yang kurang baik dalam kromatografi fase balik biasanya
disebabkan oleh tahanan yang lemah untuk senyawa yang sangat polar, sensitifitas deteksi yang kurang bagus dan ukuran sampel terutama dalam senyawa kompleks.
Puncak yang tumpang tindih biasanya ditemukan bila satu puncak lebih besar dari puncak yang lain Snyder, dkk, 2010.
2.4.3.7 Faktor Ikutan dan Faktor Asimetri
Kategori